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脑血栓患者血脂脂蛋白及载脂蛋白变化的研究 被引量:2
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作者 方树友 代清茹 +3 位作者 王建平 方伟 张连峰 李锦堂 《河南医科大学学报》 1993年第4期324-326,共3页
高血压及动脉粥样硬化是脑血栓形成的主要病因之一,而脂蛋白代谢异常,特别是血清高密度脂蛋胆固醇(HDL-C)降低,低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)增高是导致动脉粥样硬化的重要因素。近年来研究证实载脂蛋白A-I(APOA-I)和载脂蛋白B(APOB)
关键词 脑血栓 血脂 脂蛋白 载脂蛋白
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四环素抗性表型筛选外源基因高效表达克隆
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作者 李玉富 孙声桃 +2 位作者 李继昌 李福胜 张智清 《河南医科大学学报》 北大核心 2001年第3期267-271,共5页
目的 :应用四环素抗性表型从外源基因的cDNA文库中筛选高效表达克隆。方法 :将四环素抗性基因(TetR)克隆到载体pBV2 2 0 中构建筛选载体pBV2 2 3 ;根据氨基酸密码子的简并性 ,在保持原有氨基酸序列不变的情况下 ,人工合成外源基因的cDN... 目的 :应用四环素抗性表型从外源基因的cDNA文库中筛选高效表达克隆。方法 :将四环素抗性基因(TetR)克隆到载体pBV2 2 0 中构建筛选载体pBV2 2 3 ;根据氨基酸密码子的简并性 ,在保持原有氨基酸序列不变的情况下 ,人工合成外源基因的cDNA 5′端简并引物库 ,以hGM CSF基因为例进行筛选。把hGM CSFcDNA简并文库克隆到pBV2 2 3 中的TetR 上游位置 ,构建pBV2 2 3 /hGM CSF克隆文库 ,导入大肠杆菌DH5α中 ,构建转基因的细菌文库 ,在不同质量浓度 (2 0mg/L ,40mg/L ,5 0mg/L ,6 0mg/L)的四环素培养基中培养。结果 :从高浓度四环素培养基中获得高效表达的pBV2 2 3 /hGM CSF克隆 ,测序结果显示该克隆的hGM CSFcDNA 5′端序列与天然序列比较有 7个碱基发生突变 ,且符合实验设计的要求。通过基因重组 ,构建成最终的高效表达克隆pBV2 2 0 /hGM CSF ,其表达hGM CSF的量占细菌总量的 18% ,较原表达水平提高 80 %。结论 :可通过四环素抗性筛选系统筛选外源基因的高效表达克隆。 展开更多
关键词 四环素抗性GM-CSF 克隆 筛选 CDNA文库 外源基因
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