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干扰长链非编码RNA AFAP1-AS1抑制人鼻咽癌HNE2细胞增殖、侵袭及体内移植瘤形成的研究 被引量:3
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作者 谢天飞 王凌云 +1 位作者 刘丽 桑建中 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第22期2742-2746,2752,共6页
目的:探讨短发卡RNA(shRNA)干扰长链非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(lncRNA AFAP1-AS1)对人鼻咽癌(NPC)细胞增殖、侵袭及体内移植瘤形成的影响。方法:将HNE2细胞培养制成细胞悬液后分为空白对照组(Control)、阴性对照组(shRNA... 目的:探讨短发卡RNA(shRNA)干扰长链非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(lncRNA AFAP1-AS1)对人鼻咽癌(NPC)细胞增殖、侵袭及体内移植瘤形成的影响。方法:将HNE2细胞培养制成细胞悬液后分为空白对照组(Control)、阴性对照组(shRNA-NC)与lncRNA AFAP1-AS1干扰组(sh-AFAP1-AS1),通过试剂盒转入对应目的片段,进行RT-PCR验证;结晶紫染色法检测细胞增殖,FCM检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭能力,Western blot检测细胞中血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达水平,免疫组织化学法检测VEGF表达TUNEL检测肿瘤组凋亡,将转染sh-AFAP1-AS1成功的HNE2细胞及其阴性对照细胞悬浮液分别于右腋下静脉注入裸鼠体内,以成瘤直径超过5 mm为抑制成功。2周后比较2组裸鼠肿瘤重量、AFAP1-AS1表达量、肿瘤组织细胞凋亡、VEGF表达变化。结果:sh-AFAP1-AS1细胞AFAP1-AS1表达水平和细胞增殖率低于Control组(P<0.05);sh-AFAP1-AS1细胞凋亡率高于Control组(P<0.05);sh-AFAP1-AS1细胞的侵袭率低于Control组(P<0.05),sh-AFAP1-AS1细胞中VEGF和MMP-9蛋白表达水平较Control组显著降低(P<0.05);sh-AFAP1-AS1组裸鼠肿瘤质量、AFAP1-AS1表达量均较Control组降低(P<0.05);sh-AFAP1-AS1组裸鼠肿瘤组织的细胞凋亡率高于Control组(P<0.05),肿瘤组织中VEGF表达量低于Control组(P<0.05)。结论:AFAP1-AS1可能通过调控癌细胞增殖、转移及侵袭相关蛋白表达参与NPC HNE2细胞的增殖、侵袭及转移过程。 展开更多
关键词 鼻咽癌 HNE2细胞 长链非编码RNA 肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1
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嗅黏膜中Caspase-3的表达对嗅神经细胞凋亡的影响 被引量:1
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作者 谢天飞 娄卫华 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1434-1437,共4页
目的:探讨大鼠急性鼻窦炎时嗅黏膜中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表达对嗅神经细胞(olfactory receptor neurons,ORNs)凋亡的影响。方法:将70只成年SD大鼠,按照配对设计,分成对照组和炎症组,造模后于不同时间取材,采用免疫组... 目的:探讨大鼠急性鼻窦炎时嗅黏膜中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表达对嗅神经细胞(olfactory receptor neurons,ORNs)凋亡的影响。方法:将70只成年SD大鼠,按照配对设计,分成对照组和炎症组,造模后于不同时间取材,采用免疫组织化学方法检测嗅黏膜Caspase-3蛋白表达情况,原位细胞DNA断裂检测末端标记(TUNEL)法观察ORNs凋亡变化。结果:免疫组化结果,对照组ORNs中Caspase-3未见明显表达,炎症组ORNs中Caspase-3的表达在接种细菌后第2天开始升高,第5天明显升高(P<0.05),第8天达到高峰(P<0.01),第14天逐渐下降,第21天接近正常(P>0.05)。细菌接种后第2、21天,炎症组TUNEL阳性细胞计数与对照组相比没有统计学意义(P>0.05),第5、8、14天差异有统计学意义(P<0.05)。结论:急性鼻窦炎时Caspase-3的过度表达可能是促进大鼠ORNs凋亡,导致嗅觉功能下降的原因之一。 展开更多
关键词 急性鼻窦炎 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 嗅神经元 细胞凋亡
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