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lncRNA XIST靶向miR-410对谷氨酸诱导视网膜神经细胞损伤的调控机制研究
1
作者
王丽纯
舒宝童
+1 位作者
马宇
刘意
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2020年第10期936-941,共6页
目的探讨长链非编码RNA XIST(lncRNA XIST)对谷氨酸(Glu)诱导视网膜神经细胞损伤的分子机制。方法原代培养视网膜神经细胞,Glu处理后建立视网膜神经细胞损伤模型。流式细胞术检测Glu对细胞凋亡能力的影响;使用试剂盒检测Glu对乳酸脱氢酶...
目的探讨长链非编码RNA XIST(lncRNA XIST)对谷氨酸(Glu)诱导视网膜神经细胞损伤的分子机制。方法原代培养视网膜神经细胞,Glu处理后建立视网膜神经细胞损伤模型。流式细胞术检测Glu对细胞凋亡能力的影响;使用试剂盒检测Glu对乳酸脱氢酶(LDH)活性的影响;qRT-PCR检测Glu对lncRNA XIST、微小RNA-410(miR-410)表达水平的影响。分别将si-lncRNA XIST、si-con、miR-410模拟物(mimics)、miR-con转染至视网膜神经细胞,检测各组细胞凋亡率及LDH活性。双荧光素酶报告实验验证lncRNA XIST与miR-410的靶向关系;Western blot检测活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Cleaved Caspase-9)、核因子E2相关因子2(Nrf-2)、NADH脱氢酶1(NQO1)、血红素氧合酶1(HO-1)表达量。结果与正常培养的视网膜神经细胞比较,Glu诱导后视网膜神经细胞凋亡率、LDH活性及细胞凋亡蛋白Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9和lncRNA XIST的表达水平均显著升高,miR-410和Nrf-2、HO-1、NQO1蛋白的表达水平均显著降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与阴性转染相比,转染si-lncRNA XIST后细胞凋亡率、LDH活性及Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白相对表达量均显著降低,Nrf-2、HO-1、NQO1蛋白的相对表达量均显著升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。lncRNA XIST可靶向结合miR-410,并可抑制miR-410的表达(P<0.05);干扰miR-410的表达可逆转沉默lncRNA XIST对Glu诱导的视网膜神经细胞损伤的影响。结论lncRNA XIST通过靶向miR-410促进Glu诱导的视网膜神经细胞损伤,且其可能是通过抑制Nrf-2信号通路活化而发挥作用。
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关键词
长链非编码RNA
XIST
微小RNA-410
谷氨酸
视网膜神经细胞
细胞凋亡
小鼠
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职称材料
题名
lncRNA XIST靶向miR-410对谷氨酸诱导视网膜神经细胞损伤的调控机制研究
1
作者
王丽纯
舒宝童
马宇
刘意
机构
郑州市第二人民医院
眼
科
河南医学高等专科学校眼视光教研室
郑州大学第五附属医院
眼
科
出处
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2020年第10期936-941,共6页
文摘
目的探讨长链非编码RNA XIST(lncRNA XIST)对谷氨酸(Glu)诱导视网膜神经细胞损伤的分子机制。方法原代培养视网膜神经细胞,Glu处理后建立视网膜神经细胞损伤模型。流式细胞术检测Glu对细胞凋亡能力的影响;使用试剂盒检测Glu对乳酸脱氢酶(LDH)活性的影响;qRT-PCR检测Glu对lncRNA XIST、微小RNA-410(miR-410)表达水平的影响。分别将si-lncRNA XIST、si-con、miR-410模拟物(mimics)、miR-con转染至视网膜神经细胞,检测各组细胞凋亡率及LDH活性。双荧光素酶报告实验验证lncRNA XIST与miR-410的靶向关系;Western blot检测活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Cleaved Caspase-9)、核因子E2相关因子2(Nrf-2)、NADH脱氢酶1(NQO1)、血红素氧合酶1(HO-1)表达量。结果与正常培养的视网膜神经细胞比较,Glu诱导后视网膜神经细胞凋亡率、LDH活性及细胞凋亡蛋白Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9和lncRNA XIST的表达水平均显著升高,miR-410和Nrf-2、HO-1、NQO1蛋白的表达水平均显著降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与阴性转染相比,转染si-lncRNA XIST后细胞凋亡率、LDH活性及Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白相对表达量均显著降低,Nrf-2、HO-1、NQO1蛋白的相对表达量均显著升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。lncRNA XIST可靶向结合miR-410,并可抑制miR-410的表达(P<0.05);干扰miR-410的表达可逆转沉默lncRNA XIST对Glu诱导的视网膜神经细胞损伤的影响。结论lncRNA XIST通过靶向miR-410促进Glu诱导的视网膜神经细胞损伤,且其可能是通过抑制Nrf-2信号通路活化而发挥作用。
关键词
长链非编码RNA
XIST
微小RNA-410
谷氨酸
视网膜神经细胞
细胞凋亡
小鼠
Keywords
long non-coding RNA XIST
miR-410
glutamate
retinal nerve cells
apoptosis
mice
分类号
R774 [医药卫生—眼科]
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出处
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1
lncRNA XIST靶向miR-410对谷氨酸诱导视网膜神经细胞损伤的调控机制研究
王丽纯
舒宝童
马宇
刘意
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2020
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