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芹菜素通过抑制NF-κB信号通路缓解高糖对雪旺细胞的损伤 被引量：7
1
作者 赵璐 孙俊波 +2 位作者 许华 付婷婷 徐江雁 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1007-1011,共5页
目的研究芹菜素对高糖培养条件下雪旺细胞损伤的保护作用,为芹菜素治疗糖尿病周围神经损伤提供初步的实验依据。方法体外培养RSC96雪旺细胞,分为对照组(葡萄糖浓度为5.6 mmol/L)、高糖组(培养液葡萄糖浓度为50 mmol/L)和芹菜素组(在高... 目的研究芹菜素对高糖培养条件下雪旺细胞损伤的保护作用,为芹菜素治疗糖尿病周围神经损伤提供初步的实验依据。方法体外培养RSC96雪旺细胞,分为对照组(葡萄糖浓度为5.6 mmol/L)、高糖组(培养液葡萄糖浓度为50 mmol/L)和芹菜素组(在高糖基础上加入0.1、1.0、10.0 μmol/L芹菜素)。CCK-8法检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA法检测神经生长因子(NGF)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的表达;Western blot检测细胞中Bcl-2、 Bax、NF-κB、p-NF-κB的表达。qRT-PCR检测细胞中Bcl-2和Bax的mRNA表达。结果与高糖组比较,低浓度的芹菜素(≤1.0 μmol/L)提高细胞活性(P< 0.05 ),并存在浓度依赖性;10.0 μmol/L芹菜素对细胞增殖则没有明显作用。1.0 μmol/L芹菜素显著抑制高糖培养条件下细胞凋亡(P<0.05)。同时,芹菜素显著增加高糖培养条件下细胞中Bcl-2蛋白和mRNA表达,但抑制Bax基因蛋白和mRNA表达。与高糖组比较,1.0 μmol/L芹菜素显著增加NGF表达,并抑制TNF-α表达(P<0.05)。此外,芹菜素可显著抑制高糖培养条件下NF-κB磷酸化水平(P<0.05)。结论芹菜素增加高糖诱导的雪旺细胞活性,抑制细胞凋亡并调节NGF和TNF-α表达,该机制可能与抑制NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 芹菜素 雪旺细胞 凋亡 炎症因子 糖尿病周围神经病变
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丹皮酚对大鼠糖尿病视网膜病变的改善作用及其调节miR-802-5p表达的作用机制 被引量：9
2
作者 孙俊波 高达 +3 位作者 赵逸菲 许华 邱帆 赵璐 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期82-93,共12页
目的:探讨丹皮酚对大鼠糖尿病视网膜病变(DR)的改善作用,并阐明其可能的作用机制。方法:40只SPF级SD大鼠随机分为对照组、DR模型组、15 mg·kg^(-1)丹皮酚组和30 mg·kg^(-1)丹皮酚组,每组10只,除对照组外其余3组大鼠腹腔注射55... 目的:探讨丹皮酚对大鼠糖尿病视网膜病变(DR)的改善作用,并阐明其可能的作用机制。方法:40只SPF级SD大鼠随机分为对照组、DR模型组、15 mg·kg^(-1)丹皮酚组和30 mg·kg^(-1)丹皮酚组,每组10只,除对照组外其余3组大鼠腹腔注射55 mg·kg^(-1)链脲佐菌素(STZ)构建DR模型。建模成功后,对照组和DR模型组大鼠皮下注射8 mL·kg^(-1)生理盐水,15和30 mg·kg^(-1)丹皮酚组大鼠皮下注射15和30 mg·kg^(-1)丹皮酚磺酸钠注射液,每日1次,共2周。取大鼠视网膜组织用于实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、Western blotting和酶联免疫吸附测定(ELISA)检测,HE染色观察各组大鼠视网膜组织病理形态表现。采用高糖(HG,33 mmol·L^(-1)葡萄糖)培养基培养人视网膜微血管内皮细胞(HRMECs)。采用不同剂量(0、5、25、50、70和100 mg·L^(-1))丹皮酚分别干预HRMECs和HG处理24 h后的HRMECs,采用CCK-8法和流式细胞术检测各组细胞活性和凋亡率,以确定后续实验中丹皮酚最适作用剂量。HRMECs进行转染后分为对照组、HG组、HG+NC inhibitor组、HG+miR-802-5p inhibitor组、HG+丹皮酚(25 mg·L^(-1))组、HG+丹皮酚+NC mimic组和HG+丹皮酚+miR-802-5p mimic组。采用RT-qPCR法检测各组大鼠视网膜组织和各组细胞中miR-802-5p表达水平,荧光素酶报告基因和RNA免疫共沉淀法检测HRMECs中miR-802-5p与SIRT6的结合关系,Western blotting法检测各组大鼠视网膜组织和各组细胞中沉默调节蛋白6(SIRT6)、色素上皮衍生因子(PEDF)和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达水平,ELISA法检测各组大鼠视网膜组织和各组细胞中活性氧(ROS)水平及过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:与对照组比较,DR模型组大鼠视网膜组织中miR-802-5p表达水平和VEGF蛋白表达水平明显升高(P<0.01),SIRT6和PEDF蛋白表达水平明显降低(P<0.01),ROS水平明显升高(P<0.01),CAT和SOD活性明显降低(P<0.01);与DR模型组比较,不同剂量丹皮酚组大鼠视网膜组织中miR-802-5p表达水平和VEGF蛋白表达水平明显降低(P<0.05),SIRT6和PEDF蛋白表达水平明显升高(P<0.01),ROS水平明显降低(P<0.05或P<0.01),CAT和SOD活性明显升高(P<0.05或P<0.01)。HE染色,对照组大鼠视网膜组织结构清晰,内外核层细胞排列规则,未见新生血管生成;DR模型组视网膜组织结构不清晰,神经纤维层伴水肿,内外核层细胞排列疏松,有新生血管生成;不同剂量丹皮酚组大鼠视网膜组织结构较DR清晰,内外核层细胞排列较整齐,新生血管生成均较DR模型组有明显改善。与对照组比较,HG组细胞凋亡率升高(P<0.01);与HG组比较,HG+丹皮酚组细胞凋亡率明显降低(P<0.01)。与对照组比较,HG组细胞中miR-802-5p表达水平明显升高(P<0.01);与HG+NC inhibitor组比较,HG+miR-802-5p inhibitor组细胞中miR-802-5p表达水平明显降低(P<0.01)。荧光素酶报告基因分析和RNA免疫共沉淀检测,SIRT6是miR-802-5p的靶基因。与对照组比较,HG组细胞中SIRT6和PEDF蛋白表达水平及CAT和SOD活性明显降低(P<0.01),VEGF蛋白表达水平和ROS水平明显升高(P<0.01);与HG组比较,HG+miR-802-5p inhibitor组细胞中VEGF蛋白表达水平明显降低(P<0.01),SIRT6和PEDF蛋白表达水平明显升高(P<0.01),ROS水平明显降低(P<0.05),CAT和SOD活性明显升高(P<0.01);与HG组比较,HG+丹皮酚组细胞中ROS水平明显降低(P<0.01),CAT和SOD活性明显升高(P<0.01);与HG+丹皮酚+NC mimic组比较,HG+丹皮酚+miR-802-5p mimic组细胞中ROS水平明显升高(P<0.05),CAT和SOD活性明显降低(P<0.01)。结论:丹皮酚可能通过miR-802-5p/SIRT6轴对DR起到一定的改善作用。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 丹皮酚 微小RNA-802-5p 沉默调节蛋白6 高糖
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薯蓣皂苷通过调控SIRT1-FoxO1-自噬通路减轻糖尿病大鼠胰岛素抵抗 被引量：8
3
作者 魏桂梅 任锟 +3 位作者 赵璐 陈芳 张珂珂 燕树勋 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期303-310,共8页
目的:探究薯蓣皂苷是否通过调控沉默信息调节因子1(sirtuin 1,SIRT1)-叉头框蛋白O1(forkhead box protein O1,FoxO1)-自噬通路减轻糖尿病大鼠胰岛素抵抗。方法:将60只SPF级SD大鼠随机分为对照组、模型组、低剂量(5 mg/kg)薯蓣皂苷组、... 目的:探究薯蓣皂苷是否通过调控沉默信息调节因子1(sirtuin 1,SIRT1)-叉头框蛋白O1(forkhead box protein O1,FoxO1)-自噬通路减轻糖尿病大鼠胰岛素抵抗。方法:将60只SPF级SD大鼠随机分为对照组、模型组、低剂量(5 mg/kg)薯蓣皂苷组、中剂量(10 mg/kg)薯蓣皂苷组、高剂量(20 mg/kg)薯蓣皂苷组和薯蓣皂苷(20 mg/kg)+EX-527(SIRT1抑制剂)组,每组10只。高脂饲料喂养4周后腹腔注射链脲佐菌素以构建2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)大鼠模型,低、中、高剂量薯蓣皂苷组和薯蓣皂苷+EX-527组大鼠分别灌胃相应剂量药物,对照组和模型组大鼠灌胃等量生理盐水,每天1次,为期4周。全自动生化分析仪检测血清中空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、甘油三酯(triglyceride,TG)和总胆固醇(total cholesterol,TC)水平,酶联免疫吸附实验检测血清空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)水平,计算胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment-insulin resistance,HOMA-IR)和胰岛素敏感指数(insulin sensitivity index,ISI),行口服葡萄糖耐量实验(oral glucose tolerance test,OGTT),计算OGTT曲线下区域面积(area under curve,AUC);HE染色观察大鼠胰腺组织损伤情况;使用Western blot检测胰腺组织中beclin-1、LC3及SIRT1-FoxO1自噬通路相关蛋白的表达。结果:与对照组相比,模型组FBG、AUC、FINS、HOMA-IR、体重、TG、TC和LDL-C水平、胰腺组织损伤程度及FoxO1水平显著增加,ISI、beclin-1、LC3-II/LC3-I和SIRT1水平显著降低(P<0.05);与模型组相比,低、中、高剂量组FBG、AUC、FINS、HOMA-IR、体重、TG、TC和LDL-C水平、胰腺组织损伤程度及FoxO1水平以薯蓣皂苷剂量依赖性的方式显著降低,ISI、beclin-1、LC3-II/LC3-I和SIRT1水平以薯蓣皂苷剂量依赖性的方式显著增加(P<0.05);与高剂量薯蓣皂苷组相比,薯蓣皂苷+EX-527组FBG、AUC、FINS、HOMA-IR、体重、TG、TC和LDL-C水平、胰腺组织损伤程度及FoxO1水平显著增加,ISI、beclin-1、LC3-II/LC3-I和SIRT1水平显著降低(P<0.05)。结论:薯蓣皂苷可能通过激活SIRT1-FoxO1-自噬通路减轻T2DM大鼠胰岛素抵抗。 展开更多
关键词 薯蓣皂苷 2型糖尿病 胰岛素抵抗 SIRT1-FoxO1信号通路 自噬
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张磊国医大师沉滞脉临床应用浅析 被引量：2
4
作者 赵璐 甄林强 +6 位作者 庞雨 孙宇轩 邱帆 王伟光 赵逸菲 高达 宋纯东 《辽宁中医杂志》 CAS 2023年第7期29-32,共4页
张磊老师是第三届国医大师,理验俱丰、医术精湛,行医近70年,擅用临证八法治疗内科杂病。作者有幸成为张磊国医大师第一批传承弟子,于跟师侍诊时发现其常于病案中亲自书写“沉滞脉”,临床可见于肝郁气滞、气郁化火、痰湿中阻、情志抑郁... 张磊老师是第三届国医大师,理验俱丰、医术精湛,行医近70年,擅用临证八法治疗内科杂病。作者有幸成为张磊国医大师第一批传承弟子,于跟师侍诊时发现其常于病案中亲自书写“沉滞脉”,临床可见于肝郁气滞、气郁化火、痰湿中阻、情志抑郁、浊邪内生、瘀血阻络、经络湮瘀、少阳经气失枢等几种证型,多见于年轻人中亚健康状态或代谢综合征患者,相对轻的病人偏多,但亦可见于年迈体虚,合并多种慢性并发症的老年患者。“沉滞脉”病案涉及病种包括呕吐、胃痛、胃胀、胁痛、口苦、痞证、失眠、心悸、中风、痹证、皮肤病、月经病等多种疾病。在选方上,张磊老师广泛应用临证八法处方用药,灵活选用经方、时方、自拟经验方,脉证结合,组方用药,临床效验。 展开更多
关键词 张磊 沉滞脉 临床应用
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沉默SPARC基因抑制高氟介导的甲状腺细胞凋亡
5
作者 赵璐 孙俊波 +1 位作者 史素琴 孙亚茹 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期222-226,共5页
目的研究富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(SPARC)对高氟介导的甲状腺细胞凋亡的作用及可能机制。方法培养人甲状腺细胞Nthy-ori 3-1,给予不同浓度的NaF(0.1、1、10 mmol/L)处理24 h,通过实时定量PCR和蛋白印迹法评价SPARC的表达,确定后续实... 目的研究富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(SPARC)对高氟介导的甲状腺细胞凋亡的作用及可能机制。方法培养人甲状腺细胞Nthy-ori 3-1,给予不同浓度的NaF(0.1、1、10 mmol/L)处理24 h,通过实时定量PCR和蛋白印迹法评价SPARC的表达,确定后续实验NaF作用浓度。另将细胞分组进行实验:对照组、NaF组(1 mmol/L孵育24 h)、si-SPARC组(转染SPARC siRNA 48 h用NaF处理)和si-NC组(转染Negative control siRNA 48 h用NaF处理)。CCK-8法和乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞毒性;细胞凋亡试剂盒检测细胞凋亡率,蛋白印迹法检测活化caspase3(c-caspase3)和IGF-1R的蛋白表达。此外,将siSPARC和siIGF-1R共同转染至甲状腺细胞,通过评价细胞凋亡进一步探讨SPARC的作用机制。结果随着NaF的浓度增大,SPARC mRNA和蛋白表达均逐渐升高(P<0.05)。si-SPARC组细胞活性较si-NC组增高[(84.02±9.51)%vs.(58.31±6.86)%,P<0.05],且LDH释放率减少[(134.25±18.98)%vs.(195.18±23.50)%,P<0.05]。si-SPARC组较si-NC组细胞凋亡率减少[(124.67±19.44)%vs.(175.24±16.46)%,P<0.05]。此外,si-SPARC组(1.95±0.24 vs. 0.93±0.08,P<0.05)IGF-1R蛋白表达上调,抑制IGF-1R逆转SPARC对细胞凋亡的作用。结论沉默SPARC基因降低高氟介导的细胞毒性、抑制细胞凋亡,其机制可能是通过负调控IGF-1R实现的。 展开更多
关键词 富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(SPARC) 细胞凋亡 IGF-1R 乳酸脱氢酶
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