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益气滋肾方通过抑制PI3K/Akt/NF-κB通路改善小鼠慢性阻塞性肺疾病的炎症反应
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作者 王立明 陈宏睿 +5 位作者 杜燕 赵鹏 王玉洁 田燕歌 刘新光 李建生 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第7期1409-1422,共14页
目的明确益气滋肾方(YZF)的化学成分和入血成分,并阐明YZF改善慢性阻塞性肺疾病(COPD)炎症的整合作用机制与药效物质。方法通过超高效液相色谱串联四极杆轨道离子阱质谱(UHPLC-Q-Extractive-Orbitrap MS)鉴定YZF化学成分和入血成分。基... 目的明确益气滋肾方(YZF)的化学成分和入血成分,并阐明YZF改善慢性阻塞性肺疾病(COPD)炎症的整合作用机制与药效物质。方法通过超高效液相色谱串联四极杆轨道离子阱质谱(UHPLC-Q-Extractive-Orbitrap MS)鉴定YZF化学成分和入血成分。基于YZF入血成分构建YZF改善COPD的成分-疾病靶点网络,并进行富集分析筛选关键通路与作用靶标。通过香烟烟雾诱导构建小鼠COPD模型评价YZF抗炎作用及验证网络药理学富集到相关通路中关键蛋白的表达情况。50只C57BL/6J雄鼠随机分为对照组、模型组、YZF高、低剂量组和N-乙酰半胱氨酸组,10只/组。采用全身体积描记系统检测肺功能;HE染色法观察各组小鼠肺病理并进行肺泡和气道评估;ELISA法检测小鼠肺泡灌洗液中炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α含量;采用免疫组化法检测肺组织PI3K、Akt、p-Akt、p65和p-p65的表达水平。结果从YZF中共鉴定出156种化学成分,包括26种黄酮及黄酮苷类、27种生物碱类、11种皂苷类等成分;从含药血清样本中鉴定出43种原型入血成分。网络药理学分析获得YZF成分704个靶点和COPD 1199个疾病靶点;整合分析成分-疾病靶点后发现YZF缓解COPD可能与PI3K-Akt等信号通路相关;动物实验表明YZF可增加COPD模型小鼠的平均肺泡数和呼气峰流速(P<0.05);降低COPD模型小鼠的肺泡平均线性截距和支气管壁厚度和肺系数以及肺泡灌洗液的IL-1β、IL-6、TNF-α含量(P<0.01),并能够抑制肺组织PI3K、Akt、p-Akt、p65和pp65蛋白的表达(P<0.01)。结论YZF能有效改善COPD症状,缓解COPD炎症,机制可能与其通过多成分-多靶点作用抑制PI3K/Akt/NF-κB通路相关。 展开更多
关键词 益气滋肾方 慢性阻塞性肺疾病 入血成分 网络药理学 炎症
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通塞颗粒阻抑巨噬细胞炎症反应改善大鼠慢性阻塞性肺疾病急性加重 被引量:2
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作者 程蒙蒙 刘新光 +4 位作者 魏焱鑫 邢小香 刘览 辛楠 赵鹏 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1995-2003,共9页
目的探讨通塞颗粒(TSG)阻抑巨噬细胞炎症反应改善慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)大鼠的作用机制。方法24只SD大鼠随机分为对照(Control)组、模型(Model)组、TSG组和莫西沙星+沙丁胺醇(MXF+STL)组,6只/组。第1~8周建立慢性阻塞性肺... 目的探讨通塞颗粒(TSG)阻抑巨噬细胞炎症反应改善慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)大鼠的作用机制。方法24只SD大鼠随机分为对照(Control)组、模型(Model)组、TSG组和莫西沙星+沙丁胺醇(MXF+STL)组,6只/组。第1~8周建立慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型,第9周第3天,经鼻滴入肺炎克雷伯杆菌建立AECOPD大鼠模型。第9周的第1~2天和第4~7天,Control组和Model组给予生理盐水灌胃,TSG组和MXF+STL组分别给予TSG和MXF+STL灌胃,灌胃结束后处死大鼠。HE染色观察大鼠肺组织病理变化;检测肺组织白细胞介素IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子TNF-α、基质金属蛋白酶MMP2和MMP9表达。采用脂多糖(LPS)刺激巨噬细胞MH-S,给予TSG含药血清及其代表成分干预,检测IL-1β、IL-6、TNF-α、环氧化酶COX-2及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA水平,磷酸化P38(p-p38)、p-p62、微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3)、Forkhead box O3(FoxO3a)及p-mTOR蛋白水平。结果TSG显著改善AECOPD大鼠肺组织损伤与肺功能,包括降低支气管壁厚度、肺泡平均线性截距及上调平均肺泡数(P<0.05);TSG明显抑制AECOPD大鼠肺组织炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α及基质金属蛋白酶MMP2和MMP9表达水平(P<0.01)。TSG显著抑制脂多糖诱导的巨噬细胞炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α及相关代谢酶COX-2、iNOS的表达(P<0.05)。血清药物化学联合网络药理鉴定了TSG含药血清10种化学成分,其对应466个靶点核心功能分析显示,TSG干预AECOPD可能与其主要成分木犀草素、槲皮素、贝母辛、贝母乙素等调控MAPK、mTOR、FoxO、自噬等有关。体外实验显示,木犀草素可以显著抑制LPS诱导巨噬细胞炎症反应及相关信号如p-p38,调控自噬相关信号FoxO3a、mTOR,以及抑制自噬相关蛋白p-p62、LC3的表达(P<0.05)。结论TSG抑制巨噬细胞炎症反应缓解AECOPD,其机制可能与调控p38、mTOR、FoxO3a信号及抑制自噬有关。 展开更多
关键词 通塞颗粒 慢性阻塞性肺疾病急性加重期 巨噬细胞 炎症反应
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