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适用免疫组化的突触素与嗜铬素A单克隆抗体的制备与临床初步评价: 1; 作者闫敏宋军营 +5 位作者曾华辉袁永张钟允翟晋豫张振强刘文弟《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1828-1831,共4页; 目的:制备突触素与嗜铬素A免疫组化单克隆抗体,期望可初步应用于临床。方法:设计Syn与Cg A融合基因,并构建至表达载体上表达获得融合蛋白。经过抗原免疫、细胞融合后筛选获得目标抗体。通过临床样本对比验证,研究Syn和Cg A两者的特异性... 展开更多; 关键词突触素嗜铬素A 单克隆抗体免疫组化; 在线阅读下载PDF 职称材料

小鼠抗人S100A9单克隆抗体可变区基因克隆及其序列分析: 2; 作者闫敏米丹阳 +3 位作者孙向东张振强曾华辉刘文第《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期252-255,共4页; 目的克隆小鼠抗人S100A9单克隆抗体(mAb)可变区基因并对其序列进行分析。方法从分泌小鼠抗人S100A9mAb的杂交瘤细胞株(ⅡD4B10)中提取RNA,采用逆转录PCR扩增出轻链可变区基因VL和重链可变区基因VH,并对VL和VH进行克隆测序与BLAST同源性... 展开更多; 关键词 S100A9 单克隆抗体可变区基因克隆; 在线阅读下载PDF 职称材料

六味地黄丸含药血清对β-淀粉样蛋白损伤大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞的保护作用研究被引量：7: 3; 作者宋军营袁永 +5 位作者王丛笑张钟允宫洪涛张振强刘文弟高爱社《中国全科医学》 CAS 北大核心 2017年第30期3763-3769,共7页; 目的研究六味地黄丸含药血清(MSLDP)对β-淀粉样蛋白(Aβ)25-35损伤大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)的保护作用,探讨六味地黄丸在防治阿尔茨海默病(AD)中的作用机制。方法 2012年3月—2013年4月选取SPF级雄性SD大鼠20只,按照随机数... 展开更多; 关键词阿尔茨海默病六味地黄汤血管内皮生长因子类淀粉样β肽类; 在线阅读下载PDF 职称材料

鼠抗人S100A9天然蛋白单克隆抗体的制备与鉴定被引量：2: 4; 作者米丹阳段睿 +7 位作者宋军营孙向东张钟允闫敏袁永张振强张改平刘文第《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1485-1490,共6页; 目的：探索以白细胞为免疫原的鼠抗人白细胞天然蛋白单克隆抗体（monoclonal antibodies,m Abs）制备与克隆筛选鉴定方法,制备鼠抗人S100A9天然蛋白单克隆抗体,并鉴定抗体性质。方法：用健康人外周血白细胞免疫小鼠,利用B淋巴细胞杂交... 展开更多; 关键词白细胞 S100A9 单克隆抗体免疫学特性; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名适用免疫组化的突触素与嗜铬素A单克隆抗体的制备与临床初步评价: 1; 作者闫敏宋军营曾华辉袁永张钟允翟晋豫张振强刘文弟; 机构河南中医药大学中医药免疫学实验室河南省肿瘤病理诊断试剂工程技术研究中心; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1828-1831,共4页; 基金 2015年度河南省科技创新人才计划(154100510019) 河南省基本科研业务费(2014KYYWF-ZZCX3-06 +2 种基金 2014KYYWF-ZZCX3-04) 河南省高校科技创新人才支持计划(13HASTIT027); 文摘目的:制备突触素与嗜铬素A免疫组化单克隆抗体,期望可初步应用于临床。方法:设计Syn与Cg A融合基因,并构建至表达载体上表达获得融合蛋白。经过抗原免疫、细胞融合后筛选获得目标抗体。通过临床样本对比验证,研究Syn和Cg A两者的特异性,评价相关系数。结果:通过筛选,共获得2株分别针对Syn与Cg A的抗体3D9和4A12。通过对比抗体试剂共同验证19种蜡块组织,统计结果分析,结果符合性较好,相关系数分别达到r=0.989 2与r=0.993 9。结论:该方法成功制备获得了可初步适用于免疫组化的突触素与嗜铬素A抗体,该方法可为免疫学抗体研究提供一定的借鉴意义。; 关键词突触素嗜铬素A 单克隆抗体免疫组化; Keywords Synaptophysin Chromogranin A Monoclonal antibody Immunohistochemistry; 分类号 R392.3 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小鼠抗人S100A9单克隆抗体可变区基因克隆及其序列分析: 2; 作者闫敏米丹阳孙向东张振强曾华辉刘文第; 机构河南中医药大学中医药免疫学实验室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期252-255,共4页; 基金 2015年度河南省科技创新人才计划科技创新杰出青年项目(154100510019) 河南中医学院省属高校基本科研业务专项(2014KYYWFZZCX3-06); 文摘目的克隆小鼠抗人S100A9单克隆抗体(mAb)可变区基因并对其序列进行分析。方法从分泌小鼠抗人S100A9mAb的杂交瘤细胞株(ⅡD4B10)中提取RNA,采用逆转录PCR扩增出轻链可变区基因VL和重链可变区基因VH,并对VL和VH进行克隆测序与BLAST同源性比较分析。结果小鼠抗人S100A9 mAb VL基因编码区291 bp,编码97个氨基酸,属于IGKV14-111*01家族;VH基因编码区324 bp,编码108个氨基酸,属于IGHV1-80*01家族。所获取的VH和VL序列有明显抗体可变区特征,具有骨架区和互补决定区。结论获得鼠抗人S100A9 mAb的重链和轻链可变区基因,为构建基因工程抗体奠定基础。; 关键词 S100A9 单克隆抗体可变区基因克隆; Keywords S100A9 monoclonal antibody variable region gene cloning; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学] Q813.2 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名六味地黄丸含药血清对β-淀粉样蛋白损伤大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞的保护作用研究被引量：7: 3; 作者宋军营袁永王丛笑张钟允宫洪涛张振强刘文弟高爱社; 机构河南中医药大学中医药免疫学实验室河南中医药大学第三附属医院河南中医药大学第一附属医院河南中医药大学基础医学院; 出处《中国全科医学》 CAS 北大核心 2017年第30期3763-3769,共7页; 基金国家自然科学基金联合基金项目(U1504829) 河南省基础与前沿科学研究项目(14230041023 +2 种基金 162300410127) 河南省科技攻关项目(16102310182); 文摘目的研究六味地黄丸含药血清(MSLDP)对β-淀粉样蛋白(Aβ)25-35损伤大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)的保护作用,探讨六味地黄丸在防治阿尔茨海默病(AD)中的作用机制。方法 2012年3月—2013年4月选取SPF级雄性SD大鼠20只,按照随机数字表法将20只雄性SD大鼠分为对照组、给药组,每组10只。制备MSLDP及Aβ25-35母液备用。根据Aβ25-35、MSLDP不同干预浓度将处于对数生长期PC12细胞分为0、10、20、40 μmol/LAβ25-35组和0%、2.5%、5.0%、10.0%、20.0%、30.0%MSLDP组,另取处于对数生长期PC12细胞分为正常对照组(不加Aβ25-35和MSLDP)、模型组(加入20 μmol/L Aβ25-35制备AD模型)、MSLDP干预组(加入20%MSLDP+20 μmol/L Aβ25-35),显微镜下观察0%、2.5%、5.0%、10.0%、20.0%、30.0%MSLDP组及正常对照组、模型组、MSLDP干预组PC12细胞形态。采用MTT法检测PC12细胞存活率,同上分组方法及步骤采用Western blotting法检测PC12细胞血管内皮生长因子B(VEGF-B)蛋白表达水平。结果 0 μmol/L Aβ25-35组PC12细胞存活率高于10、20、40 μmol/L Aβ25-35组(P<0.05);10 μmol/L Aβ25-35组PC12细胞存活率高于20、40 μmol/L Aβ25-35组(P<0.05);20 μmol/L Aβ25-35组PC12细胞存活率高于40 μmol/L Aβ25-35组(P<0.05)。0、10 μmol/L Aβ25-35组VEGF-B蛋白表达水平高于20、40 μmol/L Aβ25-35组(P<0.05);20 μmol/L Aβ25-35组VEGF-B蛋白表达水平高于40 μmol/L Aβ25-35组(P<0.05)。0%MSLDP组PC12细胞存活率低于2.5%、5.0%、10.0%、20.0%、30.0%MSLDP组(P<0.05);2.5%MSLDP组PC12细胞存活率低于5.0%、10.0%、20.0%、30.0%MSLDP组(P<0.05);5.0%MSLDP组PC12细胞存活率低于10.0%、20.0%、30.0%MSLDP组(P<0.05);10.0%MSLDP组PC12细胞存活率低于20.0%、30.0%MSLDP组(P<0.05)。20.0%MSLDP组PC12细胞存活率低于30.0%MSLDP组(P<0.05)。显微镜下示0%MSLDP组PC12细胞形态规则,大小均一;2.5%、5.0%MSLDP组PC12细胞数目增多,形态正常;10.0%MSLDP组PC12细胞聚集成片状生长;20.0%、30.0%MSLDP组PC12细胞聚集成片状生长,边缘长出小的棘突,具有分化趋势。0%、2.5%、5.0%MSLDP组VEGF-B蛋白表达水平低于10.0%、20.0%、30.0%MSLDP组(P<0.05);10.0%MSLDP组VEGF-B蛋白表达水平低于20.0%MSLDP组(P<0.05);20.0%MSLDP组VEGF-B蛋白表达水平高于30.0%MSLDP组(P<0.05)。正常对照组、MSLDP干预组PC12细胞存活率高于模型组(P<0.05)。显微镜观察示正常对照组细胞形态规则,大小均一;模型组细胞数量减少,形态不规则,呈凋亡或死亡的萎缩状,有细胞碎片;MSLDP干预组细胞数量明显增多,部分细胞呈拉伸状有棘突。正常对照组VEGF-B蛋白表达水平高于模型组和MSLDP干预组(P<0.05);模型组VEGF-B蛋白表达水平低于MSLDP干预组(P<0.05)。结论 MSLDP可增加Aβ25-35损伤的PC12细胞的活性,并对PC12细胞具有保护作用,其机制可能与其可增加VEGF-B蛋白表达水平有关。; 关键词阿尔茨海默病六味地黄汤血管内皮生长因子类淀粉样β肽类; Keywords Alzheimer disease Liuwei dihuang decoction Vascular endothelial growth factors Amyloid beta - peptides; 分类号 R745.7 [医药卫生—神经病学与精神病学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鼠抗人S100A9天然蛋白单克隆抗体的制备与鉴定被引量：2: 4; 作者米丹阳段睿宋军营孙向东张钟允闫敏袁永张振强张改平刘文第; 机构河南中医药大学中医药免疫学实验室/郑州市抗体组学重点实验室河南省农业科学院动物免疫学重点实验室; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1485-1490,共6页; 基金 2015年度河南省科技创新人才计划(No.154100510019) 河南中医学院创新团队(No.2014XCXTD01) 河南中医学院基本科研业务专项课题(No.2014KYYWF-ZZCX3-06); 文摘目的：探索以白细胞为免疫原的鼠抗人白细胞天然蛋白单克隆抗体（monoclonal antibodies,m Abs）制备与克隆筛选鉴定方法,制备鼠抗人S100A9天然蛋白单克隆抗体,并鉴定抗体性质。方法：用健康人外周血白细胞免疫小鼠,利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备m Abs,通过免疫细胞化学法对杂交瘤细胞进行非特异性阳性筛选,有限稀释法进行亚克隆,应用免疫沉淀-质谱法进行mAb特异性鉴定,通过Western blot进行细胞株筛选,小鼠体内诱生腹水法制备单抗,亲和层析法纯化,ELISA间接法测定效价及亲和力,Western blot进行特异性鉴定及交叉反应性分析,免疫组化染色人乳腺癌石蜡切片。结果：获得免疫细胞化学检测阳性多克隆细胞35孔,分泌鼠抗人S100A9蛋白单克隆抗体细胞株11株,优选1株制备腹水并纯化鉴定抗体,抗体效价为1∶3.18×10^5,亚类为IgG1,轻链为kappa链,抗体纯度达95%以上,亲和力常数3.54×10^8L/mol,与S100A8的交叉反应率为0.12%,与S100A12和S100A13几乎无交叉反应,组化染色识别人乳腺癌组织中的S100A9蛋白。结论：成功制备鼠抗人S100A9天然蛋白单克隆抗体,该单抗具有高效价、较高亲和力和高特异性,能为其应用于免疫组化检测S100A9蛋白的表达提供依据。; 关键词白细胞 S100A9 单克隆抗体免疫学特性; Keywords Leukocyte S100A9 Monoclonal antibody Immunity characterisation; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	适用免疫组化的突触素与嗜铬素A单克隆抗体的制备与临床初步评价	闫敏宋军营曾华辉袁永张钟允翟晋豫张振强刘文弟	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2017	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	小鼠抗人S100A9单克隆抗体可变区基因克隆及其序列分析	闫敏米丹阳孙向东张振强曾华辉刘文第	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2017	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	六味地黄丸含药血清对β-淀粉样蛋白损伤大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞的保护作用研究	宋军营袁永王丛笑张钟允宫洪涛张振强刘文弟高爱社	《中国全科医学》 CAS 北大核心	2017	7	在线阅读下载PDF 职称材料
4	鼠抗人S100A9天然蛋白单克隆抗体的制备与鉴定	米丹阳段睿宋军营孙向东张钟允闫敏袁永张振强张改平刘文第	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2016	2	在线阅读下载PDF 职称材料