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水相条件下合成短链脂肪酸酯霉菌角质酶的筛选与催化特性研究 被引量:1
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作者 林良才 梁梦帆 +5 位作者 杜荣菲 郑佳 肖冬婷 张煜行 彭志云 张翠英 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1-8,共8页
短链脂肪酸酯是白酒重要风味物质,挖掘适用于白酒酿造体系的酯化酶对提升白酒品质具有重要的应用价值。该文在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达了7个霉菌角质酶,研究了其在单一酸和混酸条件下水相中催化合成风味酯的能力。研究结果表明角质... 短链脂肪酸酯是白酒重要风味物质,挖掘适用于白酒酿造体系的酯化酶对提升白酒品质具有重要的应用价值。该文在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达了7个霉菌角质酶,研究了其在单一酸和混酸条件下水相中催化合成风味酯的能力。研究结果表明角质酶AFLACUT-2在水相条件下具有较好的短链脂肪酸酯合成能力,其在30℃、pH 4的条件下酶活力最高。进一步酶学特性分析显示,当反应温度升到40℃时,该酶催化合成己酸乙酯的活力不变,而合成丁酸乙酯活力显著下降。角质酶AFLACUT-2催化合成己酸乙酯的最佳反应时间为18 h,比催化合成丁酸乙酯缩短了25%。此外,酸醇比例的提高有助于短链脂肪酸酯的合成,但过高的酸浓度会抑制酶活力,AFLACUT-2对已酸的耐受性优于丁酸。这些结果不仅拓宽了对白酒风味酯合成机制的认识,也为利用酯化生香技术定向调控基酒风味提供了新的策略。 展开更多
关键词 白酒 短链脂肪酸酯 角质酶 水相催化体系
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理性设计提高角质酶水相催化合成风味酯的热稳定性 被引量:1
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作者 林良才 肖冬婷 +3 位作者 袁宇轩 方超 张煜行 张翠英 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第20期161-168,共8页
为了提高角质酶AFLACUT-2的热稳定性,基于蛋白质折叠自由能变化(ΔΔG)进行预测、筛选,并对突变体的酶学性质进行表征。结果显示,突变体Q163M在不影响酶活性的基础上,其热稳定性明显提高,在40℃条件下孵育168h时剩余酶活力可以保持在86.... 为了提高角质酶AFLACUT-2的热稳定性,基于蛋白质折叠自由能变化(ΔΔG)进行预测、筛选,并对突变体的酶学性质进行表征。结果显示,突变体Q163M在不影响酶活性的基础上,其热稳定性明显提高,在40℃条件下孵育168h时剩余酶活力可以保持在86.09%,较野生型高;在60℃条件下,突变体Q163M的半衰期是野生型的1.68倍。另外,相比于野生型,突变体Q163M对偏酸性环境也具有更好的耐受性。通过分子间作用力和分子动力学模拟初步阐明突变体Q163M热稳定性提高的机制。这些研究结果可为理性改造角质酶热稳定性,提高其在高温条件下水相合成风味酯的能力提供依据和策略。 展开更多
关键词 白酒 角质酶 热稳定性 水相体系
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