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骨形成蛋白-7对多孔钽/软骨细胞复合物分泌功能以及Col-Ⅱ、AGG和Sox9基因表达的影响
被引量：
10
1
作者
张辉
李亮
+5 位作者
王茜
甘洪全
王辉
毕成
李琪佳
王志强
《北京大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第2期219-225,共7页
目的:研究人重组骨形成蛋白-7(bone morphogenetic protein-7,BMP-7)对国产多孔钽/软骨细胞复合物中软骨细胞分泌功能以及Ⅱ型胶原(typeⅡcollagen,Col-Ⅱ)、蛋白聚糖(aggrecan,AGG)和SRY相关高迁移率组基因9(SRY-related high mobility...
目的:研究人重组骨形成蛋白-7(bone morphogenetic protein-7,BMP-7)对国产多孔钽/软骨细胞复合物中软骨细胞分泌功能以及Ⅱ型胶原(typeⅡcollagen,Col-Ⅱ)、蛋白聚糖(aggrecan,AGG)和SRY相关高迁移率组基因9(SRY-related high mobility group-box gene 9,Sox9)mRNA表达的影响。方法:3周龄新西兰幼兔,取双膝关节软骨细胞分离培养及鉴定,将生长状态良好的第2代细胞以1×106/m L浓度接种于多孔钽并给予不同浓度BMP-7,分为对照组(多孔钽/软骨细胞组)、50μg/L BMP-7/多孔钽/软骨细胞组、100μg/L BMP-7/多孔钽/软骨细胞组及200μg/L BMP-7/多孔钽/软骨细胞组。CCK-8法检测不同浓度BMP-7对多孔钽/软骨细胞生长及增殖的影响,扫描电镜观察各组软骨细胞在多孔钽表面及内部生长情况,二甲基亚甲蓝(dimethyl methylene blue,DMMB)比色定量法对BMP-7/多孔钽/软骨细胞复合物糖胺多糖(glycosaminoglycan,GAG)进行定量检测,实时荧光定量PCR检测Col-Ⅱ、AGG和Sox9 mRNA的表达。结果:原代软骨细胞培养24 h后呈梭形生长,4 d后细胞呈多角形,胞浆丰富。阿辛蓝(alcian blue)、番红O(safranin O)、Col-Ⅱ免疫细胞化学染色均呈阳性反应。CCK-8法细胞增殖检测结果显示,100μg/L BMP-7/多孔钽/软骨细胞组细胞增殖水平高于其他各组(P<0.05)。扫描电镜示各组软骨细胞在多孔钽表面生长状态良好,细胞有多个突起、伸展、叠层生长并覆盖于多孔钽表面。GAG定量检测显示,100μg/L BMP-7/多孔钽/软骨细胞组GAG含量比其他各组均明显升高(P<0.05);实时荧光定量PCR检测显示,各实验组Col-Ⅱ、AGG和Sox9 mRNA表达量均高于对照组,以200μg/L BMP-7/多孔钽/软骨细胞组升高最为明显(P<0.05)。结论:BMP-7/多孔钽/软骨细胞复合体能促进体外软骨细胞增殖及细胞外基质的分泌,促进软骨基因的表达。
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关键词
骨形态发生蛋白7
钽
软骨细胞
胶原Ⅱ型
葡糖氨基聚糖类
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职称材料
国产多孔钽对成骨细胞生物相容性及其相关成骨基因表达的影响
被引量：
15
2
作者
耿丽鑫
甘洪全
+4 位作者
王茜
张辉
刘英杰
王志强
李琪佳
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第11期1163-1167,共5页
目的 探讨国产多孔钽材料对成骨细胞粘附、增殖及成骨基因OPN、OC及FN mRNA表达的影响。 方法 分离培养新生SD大鼠颅盖骨成骨细胞并鉴定。根据国家标准制备多孔钽浸提液，以多孔钽浸提液与成骨细胞作为实验组，以DMEM完全培养基培养成...
目的 探讨国产多孔钽材料对成骨细胞粘附、增殖及成骨基因OPN、OC及FN mRNA表达的影响。 方法 分离培养新生SD大鼠颅盖骨成骨细胞并鉴定。根据国家标准制备多孔钽浸提液，以多孔钽浸提液与成骨细胞作为实验组，以DMEM完全培养基培养成骨细胞作为对照组。MTT法检测多孔钽浸提液对成骨细胞生长及增殖的影响；倒置相差显微镜及扫描电镜观察成骨细胞在多孔钽上粘附、生长及增殖的情况；实时荧光定量PCR技术检测OPN、OC及FN mRNA的表达并进行定量分析。 结果 肉眼及扫描电镜观察多孔钽外观呈深灰色、多孔状三维立体结构，表面及断面均匀分布直径400～600 μm的微孔，内部孔隙相互连通。MTT法检测结果显示，实验组及对照组成骨细胞培养1～8 d，除第3天外，各时间点细胞光密度值差异无统计学意义（P〉0.05）。成骨细胞种植于多孔钽培养结果显示，材料表面和孔隙内细胞叠层生长，分泌的骨基质完全覆盖材料表面。实时荧光定量PCR检测结果显示，实验组成骨基因OPN、OC、FN mRNA的相对表达量分别为1.45、1.79、1.69。 结论 国产多孔钽材料具有良好三维立体空间构型及良好的生物相容性，可刺激成骨细胞的粘附、增殖及成骨基因OPN、OC及FN mRNA的表达。
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关键词
多孔钽
成骨细胞
细胞增殖
生物相容性
成骨基因
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职称材料
题名
骨形成蛋白-7对多孔钽/软骨细胞复合物分泌功能以及Col-Ⅱ、AGG和Sox9基因表达的影响
被引量：
10
1
作者
张辉
李亮
王茜
甘洪全
王辉
毕成
李琪佳
王志强
机构
南方医科
大学
研究生
学院
唐山市第二医院关节一科
河北联合大学
附属医院骨科
河北联合大学
基础
医学院
人体
解剖
系
唐山市第二医院手一科
河北联合大学
实验中心
出处
《北京大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第2期219-225,共7页
基金
"十二五"国家科技支撑计划项目(2012BAE06B03)资助~~
文摘
目的:研究人重组骨形成蛋白-7(bone morphogenetic protein-7,BMP-7)对国产多孔钽/软骨细胞复合物中软骨细胞分泌功能以及Ⅱ型胶原(typeⅡcollagen,Col-Ⅱ)、蛋白聚糖(aggrecan,AGG)和SRY相关高迁移率组基因9(SRY-related high mobility group-box gene 9,Sox9)mRNA表达的影响。方法:3周龄新西兰幼兔,取双膝关节软骨细胞分离培养及鉴定,将生长状态良好的第2代细胞以1×106/m L浓度接种于多孔钽并给予不同浓度BMP-7,分为对照组(多孔钽/软骨细胞组)、50μg/L BMP-7/多孔钽/软骨细胞组、100μg/L BMP-7/多孔钽/软骨细胞组及200μg/L BMP-7/多孔钽/软骨细胞组。CCK-8法检测不同浓度BMP-7对多孔钽/软骨细胞生长及增殖的影响,扫描电镜观察各组软骨细胞在多孔钽表面及内部生长情况,二甲基亚甲蓝(dimethyl methylene blue,DMMB)比色定量法对BMP-7/多孔钽/软骨细胞复合物糖胺多糖(glycosaminoglycan,GAG)进行定量检测,实时荧光定量PCR检测Col-Ⅱ、AGG和Sox9 mRNA的表达。结果:原代软骨细胞培养24 h后呈梭形生长,4 d后细胞呈多角形,胞浆丰富。阿辛蓝(alcian blue)、番红O(safranin O)、Col-Ⅱ免疫细胞化学染色均呈阳性反应。CCK-8法细胞增殖检测结果显示,100μg/L BMP-7/多孔钽/软骨细胞组细胞增殖水平高于其他各组(P<0.05)。扫描电镜示各组软骨细胞在多孔钽表面生长状态良好,细胞有多个突起、伸展、叠层生长并覆盖于多孔钽表面。GAG定量检测显示,100μg/L BMP-7/多孔钽/软骨细胞组GAG含量比其他各组均明显升高(P<0.05);实时荧光定量PCR检测显示,各实验组Col-Ⅱ、AGG和Sox9 mRNA表达量均高于对照组,以200μg/L BMP-7/多孔钽/软骨细胞组升高最为明显(P<0.05)。结论:BMP-7/多孔钽/软骨细胞复合体能促进体外软骨细胞增殖及细胞外基质的分泌,促进软骨基因的表达。
关键词
骨形态发生蛋白7
钽
软骨细胞
胶原Ⅱ型
葡糖氨基聚糖类
Keywords
Bone morphogenetic protein 7
Tantalum
Chondrocytes
Collagen type Ⅱ
Glycosami-noglycans
分类号
R684 [医药卫生—骨科学]
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职称材料
题名
国产多孔钽对成骨细胞生物相容性及其相关成骨基因表达的影响
被引量：
15
2
作者
耿丽鑫
甘洪全
王茜
张辉
刘英杰
王志强
李琪佳
机构
河北联合大学
实验中心
河北联合大学
附属医院骨科
河北联合大学基础医学院解剖系
唐山市第二医院关节科
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第11期1163-1167,共5页
基金
国家科技部科技支撑课题(2012BAE06B03)~~
文摘
目的 探讨国产多孔钽材料对成骨细胞粘附、增殖及成骨基因OPN、OC及FN mRNA表达的影响。 方法 分离培养新生SD大鼠颅盖骨成骨细胞并鉴定。根据国家标准制备多孔钽浸提液，以多孔钽浸提液与成骨细胞作为实验组，以DMEM完全培养基培养成骨细胞作为对照组。MTT法检测多孔钽浸提液对成骨细胞生长及增殖的影响；倒置相差显微镜及扫描电镜观察成骨细胞在多孔钽上粘附、生长及增殖的情况；实时荧光定量PCR技术检测OPN、OC及FN mRNA的表达并进行定量分析。 结果 肉眼及扫描电镜观察多孔钽外观呈深灰色、多孔状三维立体结构，表面及断面均匀分布直径400～600 μm的微孔，内部孔隙相互连通。MTT法检测结果显示，实验组及对照组成骨细胞培养1～8 d，除第3天外，各时间点细胞光密度值差异无统计学意义（P〉0.05）。成骨细胞种植于多孔钽培养结果显示，材料表面和孔隙内细胞叠层生长，分泌的骨基质完全覆盖材料表面。实时荧光定量PCR检测结果显示，实验组成骨基因OPN、OC、FN mRNA的相对表达量分别为1.45、1.79、1.69。 结论 国产多孔钽材料具有良好三维立体空间构型及良好的生物相容性，可刺激成骨细胞的粘附、增殖及成骨基因OPN、OC及FN mRNA的表达。
关键词
多孔钽
成骨细胞
细胞增殖
生物相容性
成骨基因
Keywords
porous tantalum
osteoblasts
cell proliferation
biocompatibility
osteogenic genes
分类号
R318.08 [医药卫生—生物医学工程]
R322.71 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
骨形成蛋白-7对多孔钽/软骨细胞复合物分泌功能以及Col-Ⅱ、AGG和Sox9基因表达的影响
张辉
李亮
王茜
甘洪全
王辉
毕成
李琪佳
王志强
《北京大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015
10
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
国产多孔钽对成骨细胞生物相容性及其相关成骨基因表达的影响
耿丽鑫
甘洪全
王茜
张辉
刘英杰
王志强
李琪佳
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
15
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