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柽柳再生和转化体系的建立及瞬时转化TcSYP121基因功能分析 被引量:1
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作者 韩帅 靳芊芊 +2 位作者 殷楠 张国君 徐兴兴 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期823-833,共11页
【目的】建立柽柳再生及遗传转化体系并分析瞬时转化柳树突触融合蛋白(TcSYP121)基因功能,为筛选柽柳分子抗性育种候选基因及盐碱土的改良和生态修复提供理论参考。【方法】通过单因素筛选最佳外植体、消毒处理、各阶段(初代、分化、增... 【目的】建立柽柳再生及遗传转化体系并分析瞬时转化柳树突触融合蛋白(TcSYP121)基因功能,为筛选柽柳分子抗性育种候选基因及盐碱土的改良和生态修复提供理论参考。【方法】通过单因素筛选最佳外植体、消毒处理、各阶段(初代、分化、增殖和生根)的培养基类型及激素浓度建立柽柳再生体系;通过正交试验分析影响转化体系的4个因素(预培养时间、侵染时间、共培养时间和农杆菌浓度);通过PCR扩增及电泳结果验证柽柳转化体系;瞬时转化TcSYP121基因获得过表达植株(OE)和病毒诱导的基因沉默植株(VI),进行表型观测、植物超氧阴离子染色液(NBT)和二氨基联苯胺法(DAB)染色并测定盐腺直径和盐腺密度、叶绿素含量、超氧化物酶(SOD)活性、过氧化物酶(POD)活性及TcSYP121基因相对表达量,分析TcSYP121基因的功能。【结果】最优外植体为柽柳嫩茎段,最适宜次氯酸钠(NaClO)消毒浓度为5%,最佳消毒时间为5 min,最适合的初代培养基为MS培养基,最佳分化培养基为MS+1.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA,最佳增殖培养基为MS+1.5mg/L6-BA+0.1mg/LIBA,最佳生根培养基是1/2MS+0.5mg/L IBA。转化体系中正交试验结果为最佳预培养时间是2 d,最佳侵染时间是5 min,最佳共培养时间是2 d,最佳农杆菌浓度OD600为0.8,抗生素头孢霉素(Cef)浓度为300 mg/L,卡那霉素(Kan)筛选压为30 mg/L。PCR扩增及电泳结果显示,利用该遗传转化体系可获得阳性转基因植株。瞬时转化TcSYP121基因柽柳的耐盐功能分析结果显示,在盐胁迫下,VI和对照(CK)柽柳中叶绿素含量显著下降(P<0.05),而OE下降不显著(P>0.05);OE柽柳SOD和POD活性均高于VI与CK,且OE中Tc SYP121基因的相对表达量高于CK和VI。【结论】建立了柽柳的再生体系和遗传转化体系,通过对柽柳进行瞬时转化获得过表达和沉默表达柽柳,证实TcSYP121基因能够提高柽柳耐盐性。 展开更多
关键词 柽柳 转化体系 再生体系 TcSYP121基因 瞬时转化 耐盐
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74个观赏海棠品种的遗传多样性及指纹图谱构建 被引量:6
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作者 董聚苗 刘月 +4 位作者 李扬森 冯树香 程蓓蓓 刘振林 张国君 《种子》 北大核心 2022年第5期30-35,50,共7页
观赏海棠种质资源丰富,表型鉴定与分类难度大。本试验以74个观赏海棠品种为材料,利用SSR分子标记以及表型性状测定,分析观赏海棠的遗传多样性并构建指纹图谱。利用20对谱带清晰、多态性好的引物对74个种(品种)进行PCR扩增及遗传多样性分... 观赏海棠种质资源丰富,表型鉴定与分类难度大。本试验以74个观赏海棠品种为材料,利用SSR分子标记以及表型性状测定,分析观赏海棠的遗传多样性并构建指纹图谱。利用20对谱带清晰、多态性好的引物对74个种(品种)进行PCR扩增及遗传多样性分析,共检测到766个等位基因,扩增出的多态位点百分率达100%,每个位点的平均等位基因数为38.3个。遗传多样性信息含量变化幅度为0.86~0.97,基因多样性指数平均值为0.94,表现出丰富的遗传多样性。从分子水平上探讨其亲缘关系,基于SSR的聚类结果可将74个观赏海棠品种分为四大类。最终利用3对SSR引物成功地构建了74个观赏海棠的指纹图谱,为海棠种质资源的保护、开发利用及创新提供参考和依据。 展开更多
关键词 观赏海棠 SSR分子标记 指纹图谱 遗传多样性
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华北落叶松种子园288个无性系种子的品质比较 被引量:2
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作者 张星伟 张国君 +4 位作者 曹延鹏 刘振林 徐兴兴 杨俊明 袁德水 《种子》 北大核心 2021年第6期116-121,共6页
为了比较华北落叶松1代种子园不同种源的288个无性系的种子品质,对种子千粒重、饱满率、发芽率等特性进行了测量分析。结果表明,华北落叶松种子园5个种源和288个无性系间的种子品质均差异显著,有选择的潜力;河北蔚县种源的种子千粒重和... 为了比较华北落叶松1代种子园不同种源的288个无性系的种子品质,对种子千粒重、饱满率、发芽率等特性进行了测量分析。结果表明,华北落叶松种子园5个种源和288个无性系间的种子品质均差异显著,有选择的潜力;河北蔚县种源的种子千粒重和发芽指数最高;山西浑源种源的种子千粒重和饱满率最小,但其发芽指数高;河北围场、滦平和阜平种源的种子品质相差不大。种子园无性系千粒重为3.5127~7.2628 g,饱满率为40.89%~95.55%,98%以上的无性系发芽率高于60%,为Ⅰ级种子;发芽高峰出现在第5天,有90%以上的无性系发芽时间在7 d以内;发芽指数大于群体平均值的125个无性系可作为优良无性系筛选的重点群体,但筛选种子园种子高品质无性系时,还应在萌发特性的基础上兼顾千粒重。 展开更多
关键词 华北落叶松 种子园 种源 无性系 发芽率
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京红桃及其晚熟芽变晚京红果实差异表达转录因子的转录组分析 被引量:1
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作者 王海静 李晓颍 +3 位作者 殷亚蕊 宋立琴 张立彬 武军凯 《江苏农业科学》 北大核心 2022年第22期1-10,共10页
为探究调控桃果实发育成熟的分子机制,以京红及其晚熟芽变晚京红为试验材料,基于转录组测序(RNA-seq)数据分析二者果实在转录组中差异表达的转录因子基因,并分析其在果实发育成熟过程中的表达模式。结果表明,共鉴定出302个转录因子基因... 为探究调控桃果实发育成熟的分子机制,以京红及其晚熟芽变晚京红为试验材料,基于转录组测序(RNA-seq)数据分析二者果实在转录组中差异表达的转录因子基因,并分析其在果实发育成熟过程中的表达模式。结果表明,共鉴定出302个转录因子基因,其中158个差异表达,分属于B3、MYB-related、NAC、WRKY、bHLH、MYB和HB-other等转录因子家族。对京红和晚京红相同花后时间差异表达转录因子进行分析,发现一系列转录因子以不同的表达模式参与了桃果实发育成熟调控过程,进一步筛选到17个转录因子表达模式存在较大差异,表明与晚京红成熟期延长调控密切相关。试验结果为深入研究特定转录因子在桃果实成熟过程中的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 晚熟芽变 转录组 转录因子 表达分析
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不同农艺型措施对温室黄瓜连作土壤的改良效果 被引量:9
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作者 万小琪 窦维卉 +3 位作者 杨雪 谢洋 张宁 武春成 《江苏农业科学》 北大核心 2022年第23期228-234,共7页
为探究不同农艺型措施对温室黄瓜连作土壤的改良效果,采用田间试验,研究单施有机肥(CK)、微生物菌肥配施有机肥(MF)、高碳堆肥配施有机肥(CF)、微生物菌剂配施有机肥(MA)、生物炭和木霉菌配施有机肥(BT)5个处理对温室黄瓜产量、土壤化... 为探究不同农艺型措施对温室黄瓜连作土壤的改良效果,采用田间试验,研究单施有机肥(CK)、微生物菌肥配施有机肥(MF)、高碳堆肥配施有机肥(CF)、微生物菌剂配施有机肥(MA)、生物炭和木霉菌配施有机肥(BT)5个处理对温室黄瓜产量、土壤化学性质以及土壤微生物多样性等方面的影响。结果表明,与CK相比各处理黄瓜小区产量提高了1.17%~5.94%,其中BT处理提高效果最为显著。MF处理提高了土壤pH值、电导率(EC值)及有机质、全氮、碱解氮、速效钾含量;BT处理提高了土壤pH值及有机质、速效钾含量,降低了土壤EC值。在土壤细菌群落门水平下,BT处理提高了酸杆菌门(Acidobacteriota)的相对丰度,显著降低了放线菌门(Actinobacteriota)的相对丰度;MF处理提高了变形菌门(Proteobacteria)的相对丰度。土壤真菌门水平下MF明显降低了子囊菌门(Ascomycota)的相对丰度。不同施肥处理下,引起细菌和真菌群落结构变化的主要土壤环境因子为有机质和速效磷含量。综合分析认为,微生物菌肥配施有机肥(MF)和生物炭、木霉菌配施有机肥(BT)2种措施可以改善土壤化学性质,优化土壤微生物环境,促进黄瓜生长。 展开更多
关键词 黄瓜连作土壤 生物炭 微生物菌肥 高碳堆肥 微生物多样性
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不同处理对沙枣嫩枝扦插效果的影响 被引量:3
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作者 王旭鹏 董聚苗 +3 位作者 孙富强 金照光 刘振林 张国君 《防护林科技》 2023年第1期54-57,共4页
沙枣抗逆性强,适应范围广,利用价值高,但播种繁殖性状分离,很难保持亲本的优良特性。用沙枣嫩枝为扦插材料,通过正交试验来探索扦插时期、插穗部位和插穗长度对生根的影响。结果表明:扦插时期对沙枣嫩枝扦插生根影响最大,插穗部位影响... 沙枣抗逆性强,适应范围广,利用价值高,但播种繁殖性状分离,很难保持亲本的优良特性。用沙枣嫩枝为扦插材料,通过正交试验来探索扦插时期、插穗部位和插穗长度对生根的影响。结果表明:扦插时期对沙枣嫩枝扦插生根影响最大,插穗部位影响次之。6个时期(6月9日、6月23日、7月7日、7月21日、8月4日、8月18日)以6月23日的生根率显著高于其他时期,达86.25%,根系效果指数与除7月7日外的其他时期无显著差异;7月7日的生根率显著高于除6月23日以外的其他时期,为64.82%,根系效果指数显著高于其他时期,达0.297。沙枣嫩枝扦插的最佳时间是6月下旬,此时期在无植物生长调节剂处理的情况下也可以大量生根成活。 展开更多
关键词 沙枣 嫩枝扦插 根系效果指数 生根率
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基于叶绿素合成关键基因构建马蹄莲佛焰苞离体VIGS技术体系
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作者 刘红艳 杨拓 +5 位作者 王壹 孙轩 王贤 刘振林 张国君 卫尊征 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1289-1298,共10页
返青是天南星科观赏植物在发育过程中发生的一种典型的功能叶绿体重新分化形成的生理现象,其中马蹄莲佛焰苞常出现这一现象,但其潜在的调控机制并不明确。为了探究马蹄莲返青的调控机制,提高彩色马蹄莲的观赏品质,本研究以黄色品种Flore... 返青是天南星科观赏植物在发育过程中发生的一种典型的功能叶绿体重新分化形成的生理现象,其中马蹄莲佛焰苞常出现这一现象,但其潜在的调控机制并不明确。为了探究马蹄莲返青的调控机制,提高彩色马蹄莲的观赏品质,本研究以黄色品种Florex Gold为材料,以返青过程中两个叶绿素合成关键基因ZhGluTR和ZhChlH为研究对象,建立病毒诱导的基因沉默(VIGS)体系,对马蹄莲进行基因功能验证。通过离体佛焰苞孔片试验并对取样部位和侵染时长进行综合分析,结果显示,中部真空抽吸5 min的试验组返青现象出现最迟,VIGS沉默效果最好。在上述沉默背景下,与对照组相比,ZhGluTR和ZhChlH沉默孔片的返青现象均出现得更迟,色调角值上升更缓慢,并且叶绿素含量更低,类胡萝卜素含量更高。综合上述结果表明,本研究建立的VIGS体系可分别有效沉默佛焰苞中的叶绿素合成关键基因ZhGluTR和ZhChlH。研究结果有助于进一步探究马蹄莲佛焰苞返青现象的分子调控机制。 展开更多
关键词 马蹄莲 佛焰苞孔片 病毒诱导的基因沉默(VIGS) 基因功能
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果园生草与除草技术 被引量:3
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作者 刘冬楠 赵峻生 +1 位作者 张强 申艳红 《河北果树》 2023年第2期53-53,55,共2页
果园生草是较为科学的现代果园土壤管理技术,于19世纪末在美国出现[1],在欧美、日本等农业发达国家,生草果园已占果园总面积的60%以上,在有的国家甚至超过了90%[2]。果园生草具有很多优点:1)减少土壤和水分流失;2)增加土壤有机质含量,... 果园生草是较为科学的现代果园土壤管理技术,于19世纪末在美国出现[1],在欧美、日本等农业发达国家,生草果园已占果园总面积的60%以上,在有的国家甚至超过了90%[2]。果园生草具有很多优点:1)减少土壤和水分流失;2)增加土壤有机质含量,并提高土壤养分和碳源利用率[3-4];3)改善土壤理化性质,增加团粒结构[5-6];4)增加天敌数量和丰富度,提高果园生物多样性[7]。 展开更多
关键词 果园生草 土壤有机质含量 除草技术 天敌数量 土壤养分 团粒结构 水分流失 生物多样性
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华北落叶松2.5代种子园17个优良家系种子萌发特性比较 被引量:1
9
作者 王旭鹏 王贤 +4 位作者 邢学丁 金照光 孙富强 袁德水 张国君 《林业科技》 2022年第5期1-3,6,共4页
对河北省围场县龙头山国家落叶松种子基地初选出的17个优良家系种子进行试验的结果表明,17个家系种子饱满率、发芽时间、发芽势、发芽率、发芽指数差异显著,而千粒重差异不显著。1、5、7、8、11、12、13、15号家系的饱满率高于70%;1、5... 对河北省围场县龙头山国家落叶松种子基地初选出的17个优良家系种子进行试验的结果表明,17个家系种子饱满率、发芽时间、发芽势、发芽率、发芽指数差异显著,而千粒重差异不显著。1、5、7、8、11、12、13、15号家系的饱满率高于70%;1、5、7、8、9、10、12、13、15、17号家系的发芽率高于50%;1、7、8、9、12、13、15、17号家系的发芽指数大于5;1、7、8、12、13、15号家系饱满率、发芽率、发芽指数表现均优良;5号家系饱满率、发芽率表现优良;9、17号家系发芽率、发芽指数表现优良。综合各项指标分析,1,5,7,8,9,12,13,15,17号家系显著高于其他家系。 展开更多
关键词 华北落叶松 种子园 饱满率 发芽率 发芽指数
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蒙古栎和栓皮栎不同砧穗组合嫁接苗生长特性研究
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作者 邢学丁 任俊杰 +4 位作者 张婉莹 刘朝华 解婷 陈光照 王利佳 《现代农业科技》 2023年第15期108-110,共3页
为了解蒙古栎、栓皮栎在太行山冀北平原区的生长特性,对其进行种间和种内嫁接试验,调查分析了不同砧穗组合的成活率、当年生长量、分枝数、成熟叶叶长、成熟叶叶宽、南北冠幅、东西冠幅、高径比。结果表明,蒙古栎/蒙古栎与栓皮栎/栓皮... 为了解蒙古栎、栓皮栎在太行山冀北平原区的生长特性,对其进行种间和种内嫁接试验,调查分析了不同砧穗组合的成活率、当年生长量、分枝数、成熟叶叶长、成熟叶叶宽、南北冠幅、东西冠幅、高径比。结果表明,蒙古栎/蒙古栎与栓皮栎/栓皮栎种内嫁接组合的当年生长量、分枝数、成熟叶叶长和成熟叶叶宽等生长指标要优于蒙古栎/栓皮栎与栓皮栎/蒙古栎种间嫁接组合。以成活率为筛选标准,则栓皮栎/栓皮栎>蒙古栎/栓皮栎>蒙古栎/蒙古栎>栓皮栎/蒙古栎,其中栓皮栎/栓皮栎成活率最高,为56.00%;以当年生长量为筛选标准,则蒙古栎/蒙古栎>栓皮栎/栓皮栎>栓皮栎/蒙古栎>蒙古栎/栓皮栎,其中蒙古栎/蒙古栎当年生长量最高,为112.54 cm。 展开更多
关键词 蒙古栎 栓皮栎 嫁接 成活率 生长特性
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