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腺病毒介导的DPP6过表达载体的构建及其在大鼠心肌细胞内表达的鉴定
1
作者
王娜
华乐
+5 位作者
杨甫
王珏
王志华
王琼
董梅
王川
《暨南大学学报（自然科学与医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第6期453-457,共5页
目的:构建腺病毒介导的DPP6过表达载体并验证其在大鼠心肌细胞内的表达.方法:应用PCR技术扩增目的基因DPP6,经酶切、连接等反应将目的基因插入穿梭载体p Shuttle-CMV中,进而转化至含有Ad Easy质粒的大肠杆菌中,进行重组;所产生的腺病毒...
目的:构建腺病毒介导的DPP6过表达载体并验证其在大鼠心肌细胞内的表达.方法:应用PCR技术扩增目的基因DPP6,经酶切、连接等反应将目的基因插入穿梭载体p Shuttle-CMV中,进而转化至含有Ad Easy质粒的大肠杆菌中,进行重组;所产生的腺病毒载体转染在HEK-293细胞中,进行腺病毒的包装、分泌和扩增,所得病毒感染大鼠心肌细胞,进行荧光及实时定量PCR(q PCR)鉴定.结果:DPP6过表达腺病毒载体构建成功,经HEK293细胞包装、扩增后,所得病毒可成功感染初生大鼠心肌细胞,观测到腺病毒携带的绿色荧光蛋白表达,q PCR检测DPP6 mRNA表达明显升高.结论:成功构建了腺病毒介导的DPP6过表达载体,并在大鼠心肌细胞内成功表达,为进一步研究DPP6在心肌细胞内的功能奠定了基础.
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关键词
DPP6
基因
腺病毒载体
绿色荧光蛋白
心肌细胞
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职称材料
FGF13VY腺病毒过表达载体的构建及其鉴定
2
作者
董梅
陈宇峰
+5 位作者
孙如梦
华乐
杨甫
孟丹琳
杨晶
王川
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2018年第12期1956-1959,共4页
利用PCR技术扩增目的基因FGF13VY亚型,经酶切、连接等反应将目的基因插入穿梭载体p Shuttle-CMV中,进而转化至含有Ad Easy质粒的大肠杆菌中,进行重组。将所产生的腺病毒载体转染在HEK-293细胞中,进行腺病毒的包装、分泌和扩增,将所获得...
利用PCR技术扩增目的基因FGF13VY亚型,经酶切、连接等反应将目的基因插入穿梭载体p Shuttle-CMV中,进而转化至含有Ad Easy质粒的大肠杆菌中,进行重组。将所产生的腺病毒载体转染在HEK-293细胞中,进行腺病毒的包装、分泌和扩增,将所获得的腺病毒在背根神经节中进行过表达,可检测到腺病毒携带的绿色荧光蛋白表达在背根神经节神经元,q PCR检测到FGF13VY mRNA的表达明显升高。FGF13VY腺病毒过表达载体的成功构建,为研究其在DRG神经元中作用奠定了基础。
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关键词
FGF13VY
腺病毒载体
绿色荧光蛋白
背根神经节
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职称材料
题名
腺病毒介导的DPP6过表达载体的构建及其在大鼠心肌细胞内表达的鉴定
1
作者
王娜
华乐
杨甫
王珏
王志华
王琼
董梅
王川
机构
河北
医科
大学
药理学教研室
河北
医科
大学
临床医学系
河北科技大学校医院
出处
《暨南大学学报（自然科学与医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第6期453-457,共5页
基金
国家自然科学基金项目(31171097)
河北省自然科学基金项目(C2014206419)
+1 种基金
教育部留学回国人员科研启动基金项目(2013-693)
河北省高等学校科学技术研究项目重点项目(ZD2015007)和自筹项目(Z2015005)
文摘
目的:构建腺病毒介导的DPP6过表达载体并验证其在大鼠心肌细胞内的表达.方法:应用PCR技术扩增目的基因DPP6,经酶切、连接等反应将目的基因插入穿梭载体p Shuttle-CMV中,进而转化至含有Ad Easy质粒的大肠杆菌中,进行重组;所产生的腺病毒载体转染在HEK-293细胞中,进行腺病毒的包装、分泌和扩增,所得病毒感染大鼠心肌细胞,进行荧光及实时定量PCR(q PCR)鉴定.结果:DPP6过表达腺病毒载体构建成功,经HEK293细胞包装、扩增后,所得病毒可成功感染初生大鼠心肌细胞,观测到腺病毒携带的绿色荧光蛋白表达,q PCR检测DPP6 mRNA表达明显升高.结论:成功构建了腺病毒介导的DPP6过表达载体,并在大鼠心肌细胞内成功表达,为进一步研究DPP6在心肌细胞内的功能奠定了基础.
关键词
DPP6
基因
腺病毒载体
绿色荧光蛋白
心肌细胞
Keywords
DPP6 gene
adenovirus vector
real-time PCR
GFP
cardiomyocytes
分类号
R33 [医药卫生—人体生理学]
R34 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
FGF13VY腺病毒过表达载体的构建及其鉴定
2
作者
董梅
陈宇峰
孙如梦
华乐
杨甫
孟丹琳
杨晶
王川
机构
河北科技大学校医院
河北
医科
大学
基础医学院
河北
医科
大学
生理学教研室
河北
医科
大学
药理学教研室
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2018年第12期1956-1959,共4页
基金
国家自然科学基金(编号:81770407)
河北省自然科学基金(编号:H2017206262
+5 种基金
C2018206277)
河北省高等学校科学技术研究项目(编号:ZD2015007
ZD2016002
Z2015005)
河北省高层次人才资助项目(编号:A2017005070)
河北医科大学大学生创新性实验计划项目(编号:USIP201509A)
文摘
利用PCR技术扩增目的基因FGF13VY亚型,经酶切、连接等反应将目的基因插入穿梭载体p Shuttle-CMV中,进而转化至含有Ad Easy质粒的大肠杆菌中,进行重组。将所产生的腺病毒载体转染在HEK-293细胞中,进行腺病毒的包装、分泌和扩增,将所获得的腺病毒在背根神经节中进行过表达,可检测到腺病毒携带的绿色荧光蛋白表达在背根神经节神经元,q PCR检测到FGF13VY mRNA的表达明显升高。FGF13VY腺病毒过表达载体的成功构建,为研究其在DRG神经元中作用奠定了基础。
关键词
FGF13VY
腺病毒载体
绿色荧光蛋白
背根神经节
Keywords
FGF13VY
adenovirus vector
GFP
dorsal root ganglion
分类号
R331.38 [医药卫生—人体生理学]
R337.5 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
腺病毒介导的DPP6过表达载体的构建及其在大鼠心肌细胞内表达的鉴定
王娜
华乐
杨甫
王珏
王志华
王琼
董梅
王川
《暨南大学学报（自然科学与医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
FGF13VY腺病毒过表达载体的构建及其鉴定
董梅
陈宇峰
孙如梦
华乐
杨甫
孟丹琳
杨晶
王川
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2018
0
在线阅读
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职称材料
已选择
0
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引证文献
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