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新型复合水凝胶对H_(2)O_(2)诱导心肌细胞氧化应激损伤的保护作用
1
作者 王岳 马宁 +5 位作者 卢嘉骏 王成瑶 陈琳渝 任宇晨 李景武 孙红 《吉林大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第2期352-359,共8页
目的:探讨新型复合水凝胶对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导心肌细胞氧化应激损伤的保护作用,并阐明其可能的作用机制。方法:小鼠皮下注射水凝胶100μL,1、14和28 d正常饲养后处死小鼠,取材,HE染色观察水凝胶的组织相容性。提取出生1d SD大鼠... 目的:探讨新型复合水凝胶对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导心肌细胞氧化应激损伤的保护作用,并阐明其可能的作用机制。方法:小鼠皮下注射水凝胶100μL,1、14和28 d正常饲养后处死小鼠,取材,HE染色观察水凝胶的组织相容性。提取出生1d SD大鼠的原代心肌细胞,建立心肌细胞氧化应激损伤模型。原代心肌细胞分为对照组、H_(2)O_(2)组和水凝胶(H_(2)O_(2)+Hydrogel)组。对照组原代心肌细胞正常培养,H_(2)O_(2)组原代心肌细胞采用200μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)溶液处理24 h;HH_(2)O_(2)+Hydrogel组原代心肌细胞采用1 g·L^(-1)的水凝胶与200μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)共孵育24 h。采用细胞计数试剂盒8 (CCK-8)法检测各组心肌细胞活性,双氢乙啶(DHE)和2',7'-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)检测各组心肌细胞中活性氧(ROS)水平,鬼笔环肽荧光染色标记法检测各组心肌细胞中纤维形肌动蛋白(F-actin)表达情况,免疫荧光法检测各组心肌细胞中连接蛋白43 (Cx43)和心肌肌钙蛋白T (cTnT)表达情况,TUNEL染色法检测各组心肌细胞凋亡率,Western blotting法检测各组心肌细胞中凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤2 (Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平。结果:HE染色,水凝胶周围组织炎性细胞浸润较少,皮下埋植的炎症反应较小。与对照组比较,H_(2)O_(2)组心肌细胞活性明显降低(P<0.05),细胞中ROS水平明显升高(P<0.05),细胞中Cx43、cTnT和F-actin蛋白表达水平明显降低(P<0.001),心肌细胞凋亡率明显升高(P<0.01),心肌细胞中Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.001),Bax蛋白表达水平降低(P<0.01);与H_(2)O_(2)组比较,H_(2)O_(2)+Hydrogel组心肌细胞活性明显升高(P<0.05),细胞中ROS水平明显降低(P<0.01),细胞中cTnT、Cx43和F-actin蛋白表达水平明显升高(P<0.01),心肌细胞凋亡率明显降低(P<0.001),心肌细胞中Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.01),Bax蛋白表达水平升高(P<0.01)。结论:水凝胶能够通过清除环境中的ROS促进心肌细胞相关蛋白的表达,抑制心肌细胞凋亡,发挥对氧化应激环境下心肌细胞的保护作用。 展开更多
关键词 水凝胶 心肌细胞 过氧化氢 氧化应激损伤 细胞凋亡
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沉默CD276基因促进宫颈癌Caski细胞的凋亡及作用机制研究 被引量：4
2
作者 王文普 丁婷婷 +2 位作者 李硕峰 李傲 孙红 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期453-457,共5页
目的:探究免疫共刺激分子CD276在宫颈癌细胞(Caski、Hela)和人源胚胎肾细胞(293T)中的表达量,以及靶向沉默CD276基因来研究CD276对宫颈癌Caski细胞增殖、凋亡影响以及作用机制。方法:荧光定量PCR(RT-PCR)和免疫印迹试验(Western blot)检... 目的:探究免疫共刺激分子CD276在宫颈癌细胞(Caski、Hela)和人源胚胎肾细胞(293T)中的表达量,以及靶向沉默CD276基因来研究CD276对宫颈癌Caski细胞增殖、凋亡影响以及作用机制。方法:荧光定量PCR(RT-PCR)和免疫印迹试验(Western blot)检测CD276在293T、Caski、Hela细胞的表达情况。通过脂质体Lipofectamine 2000体外转染controlsiRNA和CD276 siRNA至宫颈癌Caski细胞中,实验分为对照组、空转染组、CD276 siRNA组,采用Western blot检测Caski细胞中CD276蛋白的表达量。用细胞计数法(CCK-8)、膜联蛋白V-FITC(Annexin V-FITC)&碘化丙啶(PI)双染法检测Caski细胞的增殖、凋亡,酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞培养液上清中IL-8、血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白水平。结果:免疫共刺激分子CD276在Caski、Hela细胞中的表达量显著高于293T细胞(0. 754±0. 068 vs 0. 261±0. 032; 0. 852±0. 087 vs 0. 279±0. 026; P<0. 05); Caski细胞中的表达量显著高于Hela细胞(P<0. 05)。与对照组相比,CD276 siRNA组细胞中CD276蛋白的表达量明显降低(0. 235±0. 028 vs 0. 863±0. 091,P<0. 05),显著抑制细胞的增殖(0. 326±0. 035 vs 0. 659±0. 068,P<0. 05),诱导其凋亡[(23. 487±2. 579)%vs (5. 489±0. 632)%,P<0. 05],下调IL-8(43. 257±3. 612 vs 125. 369±18. 478)、VEGF(136. 751±13. 269 vs 369. 254±28. 157)的蛋白水平(P<0. 05)。结论:CD276在宫颈癌细胞中的表达量显著增加,沉默CD276基因的表达,明显抑制Caski细胞的增殖,促进其凋亡,其作用与IL-8、VEGF的蛋白水平有关。 展开更多
关键词 CD276 宫颈癌 增殖 凋亡
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PVA/ι-CA软骨组织工程支架对ATDC-5细胞生物学行为和组织相容性的影响 被引量：3
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作者 车鹏程 车轩 +6 位作者 李硕峰 张亚彬 熊艳杰 崔曼 崔菁 姚芳莲 孙红 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期1092-1097,共6页
目的:探讨PVA/ι-CA软骨组织工程支架对ATDC-5细胞生物学行为的影响,评价其用于构建组织工程软骨的可行性。方法:采用物理共混技术和反复冷冻-解冻方法,将聚乙烯醇(PVA)和卡拉胶按照一定比例制作成复合支架材料PVA/ι-CA并测定其孔径和... 目的:探讨PVA/ι-CA软骨组织工程支架对ATDC-5细胞生物学行为的影响,评价其用于构建组织工程软骨的可行性。方法:采用物理共混技术和反复冷冻-解冻方法,将聚乙烯醇(PVA)和卡拉胶按照一定比例制作成复合支架材料PVA/ι-CA并测定其孔径和孔隙率。将ATDC-5细胞接种于支架材料,观察细胞的黏附生长情况;免疫组织化学法和免疫荧光法检测ATDC-5细胞中Ⅱ型胶原的表达情况;甲苯胺蓝检测ATDC-5细胞形态表现;扫描电镜(SEM)下观察细胞生长及细胞外基质(ECM)分泌情况。将ATDC-5细胞分为阴性对照组(加入空白培养液)和实验组(加入含材料的培养液),MTT法检测支架材料上2组ATDC-5细胞的增殖率。将支架材料植入SD大鼠皮下,评价该支架材料的组织相容性和血管化能力。结果:PVA/ι-CA软骨组织工程支架平均孔隙率为(86.88±3.88)%,平均孔径为20~40μm。HE染色,ATDC-5细胞在支架材料上贴附生长良好,呈多角形,形态饱满;免疫组织化学和免疫荧光染色,ATDC-5细胞分泌Ⅱ型胶原蛋白;甲苯胺蓝染色,ATDC-5细胞在支架材料上保持软骨细胞的特性,随着培养时间的延长,支架材料上阳性细胞数量明显增加;ATDC-5细胞与支架材料共培养7d时,SEM下可见少量细胞呈多角形;培养14d时细胞数量增多,形态饱满、相互融合,伸入材料间形成锚状结构,牢固地黏附于材料表面;培养21~28d时材料上附着的细胞分泌大量的ECM包裹材料;ATDC-5细胞在材料上于7~14d增殖较快,21~28d增殖较慢,实验组增殖率与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。皮下包埋早期有轻微的炎症反应,随着时间延长而消退;后期有血管化发生,材料降解吸收比较缓慢。结论:PVA/ι-CA支架材料有望成为的软骨组织工程支架材料。 展开更多
关键词 软骨组织工程 聚乙烯醇 卡拉胶 生物相容性
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木葡聚糖基温敏水凝胶预防大鼠腹壁-肠壁再粘连及其对局部TGF-β1和CTGF表达的影响 被引量：2
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作者 孙红 李硕峰 +6 位作者 崔菁 张二帅 李景武 熊艳杰 马丽桃 姚芳莲 车鹏程 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期223-228,共6页
目的:评价木葡聚糖基(mXG)温敏水凝胶对L929鼠成纤维细胞的抗黏附性能,建立粘连松解术后再次粘连动物模型,探讨mXG温敏水凝胶对粘连松解术后再次粘连的预防作用及对转化生长因子β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法:... 目的:评价木葡聚糖基(mXG)温敏水凝胶对L929鼠成纤维细胞的抗黏附性能,建立粘连松解术后再次粘连动物模型,探讨mXG温敏水凝胶对粘连松解术后再次粘连的预防作用及对转化生长因子β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法:将L929鼠成纤维细胞接种于mXG温敏水凝胶表面,荧光显色检测其在凝胶表面的黏附性能。制备粘连松解术后再次粘连大鼠模型。48只SD大鼠二次损伤完成后随机分成3组,分别为再粘连组,将1mL生理盐水注射于大鼠腹壁和盲肠的创面;商业膜组,将2cm×3cm大小的壳聚糖防粘连膜覆盖于腹壁创面;mXG温敏水凝胶组,将1mL 4%mXG温敏水凝胶注射至腹壁和盲肠的创面,待水凝胶完全形成(3min)后关腹;每组16只。二次术后第7和14天,每组分别处死8只大鼠,对粘连程度进行评分及组织学观察,免疫组织化学法观察TGF-β1和CTGF表达水平。结果:对照组可见大量L929鼠成纤维细胞贴壁生长,呈细长的梭形并有伪足的形成;mXG温敏水凝胶组在凝胶表面仅有非常少的L929鼠成纤维细胞,呈圆球状。一次术后所有大鼠均形成了可用钝器分开的粘连区。二次术后第7天,再粘连组形成了4~5分粘连,纤维结缔组织大量增生;商业膜组大部分为中度粘连,纤维结缔组织增生较多;mXG组大部分大鼠未见粘连发生且盲肠及腹壁开始愈合,有少量纤维结缔组织增生。术后第14天,再粘连组大鼠腹腔粘连严重,纤维结缔组织及胶原大量增生;商业膜组形成了接近再粘连组的严重粘连;mXG组有2只大鼠发生轻微粘连,其余均未发生粘连,并且盲肠及腹壁创面恢复良好。术后第7和14天mXG水凝胶组大鼠平均粘连评分明显低于再粘连组和商业膜组(P<0.05)。免疫组织化学染色,TGF-β1和CTGF表达水平随大鼠腹膜粘连评分和胶原沉积升高而升高,在再粘连组表达最高,在mXG温敏水凝胶组表达最低。结论:mXG温敏水凝胶具有优异的抗成纤维细胞黏附性能,可以有效预防粘连松解术后再次粘连的发生,并可减少粘连相关因子TGF-β1和CTGF的表达水平。 展开更多
关键词 木葡聚糖基温敏水凝胶 再次粘连 粘连松解术 转化生长因子β1 结缔组织生长因子
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百合乌药汤对1型糖尿病并发肝损伤的保护作用及其机制分析 被引量：5
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作者 薛丽会 宋宏宇 +5 位作者 高旗 李爽 赵晨蕾 白杨 张博男 齐亚娟 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2022年第2期376-383,共8页
目的:考察百合乌药汤(Baihe Wuyao decoction,BWD)对小鼠1型糖尿病(Type 1 diabetes mellitus,T1DM)并发肝损伤的保护作用,并揭示其潜在机制。方法:小鼠70只,随机选取10只作为空白组,其余采用腹腔注射链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)诱... 目的:考察百合乌药汤(Baihe Wuyao decoction,BWD)对小鼠1型糖尿病(Type 1 diabetes mellitus,T1DM)并发肝损伤的保护作用,并揭示其潜在机制。方法:小鼠70只,随机选取10只作为空白组,其余采用腹腔注射链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)诱导T1DM,成模后随机分为6组:模型组、阳性对照组、BWD各剂量组(15、 5、 2.5、 1.25 g·kg^(-1)·d^(-1))。各组小鼠连续给药6周。检测小鼠血清中谷丙转氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(Aspartate aminotransferase,AST)的含量,及肝组织匀浆超氧化物歧化酶(Superoxidedismutase,SOD)和丙二醛(Malonaldehyde,MDA)的含量;观察小鼠肝脏病理学变化;检测小鼠肝脏中蛋白激酶B(Protein kinase B,AKT)在蛋白水平的表达,检测锰超氧化物歧化酶(Manganese superoxide dismutase,Mn-SOD)和一氧化氮合酶(Inducible nitric oxide synthase,iNOS)、炎症因子包括肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor,TNF-α)、核因子-κB(Nuclear factor-κB,NF-κB)、白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)和白细胞介素-8(Interleukin-8,IL-8)、凋亡因子包括(B-cell lymphoma-2,Bcl2)、(Bcl2-associated X protein,Bax)和(Caspase 3,CASP3)在m RNA水平的表达。结果:BWD可改善T1DM小鼠肝组织病理损伤;与模型组相比,各剂量组ALT和AST水平均显著降低(P<0.01或P<0.05),低1剂量组效果更明显;BWD低1剂量可显著上调p-AKT/AKT(P<0.05);低1剂量显著下调MDA、iNOS,上调SOD、Mn-SOD含量(P<0.01或P<0.05);与模型组相比,低1剂量的Bcl2/Bax比值明显增加,Bax、CASP3被下调;低1剂量显著降低TNF-α、NF-κB、IL-1β、IL-6和IL-8在基因水平的表达(P<0.01或P<0.05)。结论:BWD可通过抗炎、抗氧化、抗凋亡、促进细胞增殖以及改善胰岛素信号通路发挥对T1DM并发肝损伤的保护作用。 展开更多
关键词 肝损伤 炎症 作用机制 百合乌药汤
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饵料添加猪毛蒿粉对南美白对虾生长性能、抗氧化能力和免疫力的影响 被引量：1
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作者 杨冰 李爽 +5 位作者 高明明 李若飞 王瑞 冯欣怡 张文丽 齐亚娟 《饲料研究》 CAS 北大核心 2023年第7期53-58,共6页
试验旨在研究猪毛蒿粉对南美白对虾生长性能、抗氧化能力和免疫力的影响。选取健康、体长约为2.5 cm的南美白对虾2100尾,随机分为7组,每组3个重复,每个重复100尾虾。空白对照组(A组)对虾饲喂基础饵料,阳性对照组(B组)对虾饲喂基础饵料... 试验旨在研究猪毛蒿粉对南美白对虾生长性能、抗氧化能力和免疫力的影响。选取健康、体长约为2.5 cm的南美白对虾2100尾,随机分为7组,每组3个重复,每个重复100尾虾。空白对照组(A组)对虾饲喂基础饵料,阳性对照组(B组)对虾饲喂基础饵料并向水中抛洒5 ml/L五黄精华液,试验组对虾分别在基础饵料中添加0.5%、1.0%、2.0%、4.0%和8.0%猪毛蒿粉。试验期42 d。结果显示,与A组相比,各组对虾存活率(SR)、增重率(WGR)、肥满度(CF)、肝体比(HIS)、特定生长率(SGR)、均显著升高(P<0.05),饵料系数(FCR)显著降低(P<0.05)。与B组相比,各猪毛蒿粉添加组的WGR、SGR均显著升高(P<0.05)。与A组相比,除0.5%组外,各组水体中氨氮含量均显著降低(P<0.05),除B组外各组全虾养殖水体环境中亚硝酸盐含量均显著降低(P<0.05),各组养殖水体环境pH值均显著降低(P<0.05);各试验组对虾肝胰腺丙二醛(MDA)含量均显著降低(P<0.05),超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和多酚氧化酶(PPO)活性均显著升高(P<0.05)。与A组相比,猪毛蒿粉添加组对虾肝胰腺组织中Toll-1和Toll-2在mRNA的表达量显著降低(P<0.05)。研究表明,猪毛蒿粉可促进南美白对虾生长,提高抗氧化能力和非特异性免疫力,适宜添加比例为1.0%~2.0%。 展开更多
关键词 猪毛蒿粉 南美白对虾 生长性能 肝胰腺 抗氧化能力 非特异性免疫
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