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马铃薯卷叶病毒分离株外壳蛋白基因和17k蛋白基因的克隆及序列分析
被引量：
7
1
作者
吴志明
朱水芳
+1 位作者
田文会
张成良
《河北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第4期62-66,72,共6页
从典型的马铃薯卷叶病毒病株中直接提取出植物总RNA ,根据PLRV外壳蛋白基因序列 ,设计合成了一对寡核苷酸引物 ,经RT -PCR法扩增出全长的cDNA片段 ,将其克隆到质粒pGEM - 3Zf (+)上 ,并进行了序列分析。结果表明 ,克隆的cDNA片段由 6 2 ...
从典型的马铃薯卷叶病毒病株中直接提取出植物总RNA ,根据PLRV外壳蛋白基因序列 ,设计合成了一对寡核苷酸引物 ,经RT -PCR法扩增出全长的cDNA片段 ,将其克隆到质粒pGEM - 3Zf (+)上 ,并进行了序列分析。结果表明 ,克隆的cDNA片段由 6 2 7个核苷酸组成 ,编码 2 0 8个氨基酸组成的理论分子量为2 3k的蛋白 ,与PLRV外壳蛋白的大小一致 ;此外克隆片段还含有一个不同于外壳蛋白基因的阅读框架 ,该框架由 46 5个核苷酸组成 ,编码 15 5个氨基酸组成的理论分子量为 17k的蛋白 ,与PLRV的 17k蛋白大小一致。与国外报道的几个株系相比 ,PLRV分离物的外壳蛋白基因及 17k蛋白基因的核苷酸同源率分别高达97 5 %～ 99 7%和 96 5 %～ 99 6 % ,由此推测的氨基酸同源率高达 97 6 %～ 99 5 %和 96 1%～ 99 4% ,说明所克隆的PLRV外壳蛋白基因和 17k蛋白基因具有高度的保守性 ,本研究克隆了PLRV分离物外壳蛋白和17k蛋白基因的序列 。
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关键词
序列分析
马铃薯卷叶病毒
外壳蛋白基因
基因克隆
基因表达
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职称材料
应用RT-PCR法快速检测马铃薯卷叶病毒
被引量：
26
2
作者
吴志明
朱水芳
+1 位作者
张成良
田文会
《河北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2000年第4期77-79,共3页
根据马铃薯卷叶病毒的外壳蛋白基因序列 ,设计合成了一对寡核苷酸引物 ,从感染PLRV的马铃薯病叶组织中提取出病毒的RNA ,进行cDNA合成及PCR扩增 ,得到一条长度约 6 2 0bp的特异PCR扩增产物 ,与理论设计的外壳蛋白基因大小一致。建立了...
根据马铃薯卷叶病毒的外壳蛋白基因序列 ,设计合成了一对寡核苷酸引物 ,从感染PLRV的马铃薯病叶组织中提取出病毒的RNA ,进行cDNA合成及PCR扩增 ,得到一条长度约 6 2 0bp的特异PCR扩增产物 ,与理论设计的外壳蛋白基因大小一致。建立了快速灵敏简便的PLRV检测的新方法 ,其灵敏度要比PLRV的血清学检测方法高 10 4倍 ,在基因水平上为PLRV的检测提供了更新手段 。
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关键词
马铃薯
卷叶病毒
病毒检测
RT-PCR
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职称材料
一种适于小麦愈伤组织诱导与继代培养的培养基
被引量：
3
3
作者
孙果忠
马民强
+9 位作者
张永强
谢小亮
柴建芳
李杏普
尹志敏
秦君
张润
徐甸
杨静英
王海波
《河北农业科学》
1999年第2期24-26,共3页
培养基是植物离体培养体系中最能体现人为调控作用的因素。N_6培养基的出现曾极大地推动了禾本科植物组织和花药培养的进步,并且至今仍在许多重要作物组织及细胞培养中发挥着重要作用。但是,N_6培养基的作用效果是有其局限性的,禾本科...
培养基是植物离体培养体系中最能体现人为调控作用的因素。N_6培养基的出现曾极大地推动了禾本科植物组织和花药培养的进步,并且至今仍在许多重要作物组织及细胞培养中发挥着重要作用。但是,N_6培养基的作用效果是有其局限性的,禾本科植物组织培养的培养基仍有极大潜力可挖。这里,我们向大家推荐一种新的培养基-HB培养基(表1。
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关键词
小麦
愈伤组织
诱导
继代培养
培养基
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职称材料
题名
马铃薯卷叶病毒分离株外壳蛋白基因和17k蛋白基因的克隆及序列分析
被引量：
7
1
作者
吴志明
朱水芳
田文会
张成良
机构
河北省农林科学院植物转基因中心
农业部
植物
检疫实验所
河北
农业大学植保
学院
出处
《河北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第4期62-66,72,共6页
文摘
从典型的马铃薯卷叶病毒病株中直接提取出植物总RNA ,根据PLRV外壳蛋白基因序列 ,设计合成了一对寡核苷酸引物 ,经RT -PCR法扩增出全长的cDNA片段 ,将其克隆到质粒pGEM - 3Zf (+)上 ,并进行了序列分析。结果表明 ,克隆的cDNA片段由 6 2 7个核苷酸组成 ,编码 2 0 8个氨基酸组成的理论分子量为2 3k的蛋白 ,与PLRV外壳蛋白的大小一致 ;此外克隆片段还含有一个不同于外壳蛋白基因的阅读框架 ,该框架由 46 5个核苷酸组成 ,编码 15 5个氨基酸组成的理论分子量为 17k的蛋白 ,与PLRV的 17k蛋白大小一致。与国外报道的几个株系相比 ,PLRV分离物的外壳蛋白基因及 17k蛋白基因的核苷酸同源率分别高达97 5 %～ 99 7%和 96 5 %～ 99 6 % ,由此推测的氨基酸同源率高达 97 6 %～ 99 5 %和 96 1%～ 99 4% ,说明所克隆的PLRV外壳蛋白基因和 17k蛋白基因具有高度的保守性 ,本研究克隆了PLRV分离物外壳蛋白和17k蛋白基因的序列 。
关键词
序列分析
马铃薯卷叶病毒
外壳蛋白基因
基因克隆
基因表达
Keywords
potato leafroll virus (PLRV)
coat protein (CP) gene
cloning
分类号
S435.32 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
应用RT-PCR法快速检测马铃薯卷叶病毒
被引量：
26
2
作者
吴志明
朱水芳
张成良
田文会
机构
河北省农林科学院植物转基因中心
农业部
植物
检疫实验所
河北
农业大学
植物
病理系
出处
《河北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2000年第4期77-79,共3页
文摘
根据马铃薯卷叶病毒的外壳蛋白基因序列 ,设计合成了一对寡核苷酸引物 ,从感染PLRV的马铃薯病叶组织中提取出病毒的RNA ,进行cDNA合成及PCR扩增 ,得到一条长度约 6 2 0bp的特异PCR扩增产物 ,与理论设计的外壳蛋白基因大小一致。建立了快速灵敏简便的PLRV检测的新方法 ,其灵敏度要比PLRV的血清学检测方法高 10 4倍 ,在基因水平上为PLRV的检测提供了更新手段 。
关键词
马铃薯
卷叶病毒
病毒检测
RT-PCR
Keywords
potato leafroll virus(PLRV)
RT-PCR
virus detection
分类号
S435.32 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
一种适于小麦愈伤组织诱导与继代培养的培养基
被引量：
3
3
作者
孙果忠
马民强
张永强
谢小亮
柴建芳
李杏普
尹志敏
秦君
张润
徐甸
杨静英
王海波
机构
河北省农林科学院植物转基因中心
河北省农林科学院
粮油作物研究所
河北省农林科学院
棉花研究所
中国中央广播电视大学
出处
《河北农业科学》
1999年第2期24-26,共3页
文摘
培养基是植物离体培养体系中最能体现人为调控作用的因素。N_6培养基的出现曾极大地推动了禾本科植物组织和花药培养的进步,并且至今仍在许多重要作物组织及细胞培养中发挥着重要作用。但是,N_6培养基的作用效果是有其局限性的,禾本科植物组织培养的培养基仍有极大潜力可挖。这里,我们向大家推荐一种新的培养基-HB培养基(表1。
关键词
小麦
愈伤组织
诱导
继代培养
培养基
分类号
S512.1 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
马铃薯卷叶病毒分离株外壳蛋白基因和17k蛋白基因的克隆及序列分析
吴志明
朱水芳
田文会
张成良
《河北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002
7
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职称材料
2
应用RT-PCR法快速检测马铃薯卷叶病毒
吴志明
朱水芳
张成良
田文会
《河北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2000
26
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职称材料
3
一种适于小麦愈伤组织诱导与继代培养的培养基
孙果忠
马民强
张永强
谢小亮
柴建芳
李杏普
尹志敏
秦君
张润
徐甸
杨静英
王海波
《河北农业科学》
1999
3
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