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题名基于LAMP技术的番茄灰霉病早期快速检测
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作者
赵芊
李文
李西柳
贾振华
封晓娟
宋水山
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机构
河北省科学院生物研究所
河北省主要农作物病害微生物控制技术创新中心
石家庄医学高等专科学校
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出处
《河南农业科学》
北大核心
2025年第6期84-91,共8页
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基金
河北省中央引导地方科技发展资金项目(226Z6501G)
河北省科学院科技计划项目(23306,24306,25306)。
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文摘
由灰葡萄孢菌引起的番茄灰霉病是番茄主要病害之一,对番茄的产量和品质造成严重影响。为了对番茄灰霉病进行早期快速检测,以灰葡萄孢菌的ACTIN基因为靶基因,基于环介导等温扩增技术(Loop‑mediated isothermal amplification,LAMP),设计并筛选出一组LAMP特异性引物,优化其反应体系和反应条件,实现对灰葡萄孢菌的快速等温扩增。通过琼脂糖凝胶电泳和SYBR GreenⅠ可视化分析,确定BstⅡDNA聚合酶、dNTPs的最佳用量和内外引物最佳比例分别为0.6 U/μL、1.25 mmol/L、2∶1,在61℃反应40 min即可特异性检测出灰葡萄孢菌,其灵敏度可达100 ag/μL,是普通PCR检测灵敏度的106倍。将该方法应用于番茄病害检测时,其对灰葡萄孢菌的孢子检出限达到20个/mL,且可在番茄被侵染4 d、尚无明显灰霉病感病表型的番茄叶片中检测出来,可用于番茄灰霉病的早期快速、灵敏、可视化检测。
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关键词
番茄
灰葡萄孢菌
灰霉病
环介导等温扩增
ACTIN基因
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Keywords
Tomato
Botrytis cinerea
Gray mold
Loop‑mediated isothermal amplification
ACTIN gene
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分类号
S436.412
[农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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