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益肾逐瘀通络汤对膝骨关节炎大鼠软骨细胞焦亡和铁死亡的影响 被引量：3
1
作者 王静雅 闫康 +3 位作者 李继安 王萌 杨雨旸 虞跃跃 《中国比较医学杂志》 北大核心 2025年第1期49-58,共10页
目的探究益肾逐瘀通络汤对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)大鼠软骨细胞焦亡和铁死亡的影响。方法40只SD大鼠随机分为假手术组(10只)和造模组(30只);造模组大鼠右后肢膝关节均采用前交叉韧带离断术(anterior cruciate ligament-tra... 目的探究益肾逐瘀通络汤对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)大鼠软骨细胞焦亡和铁死亡的影响。方法40只SD大鼠随机分为假手术组(10只)和造模组(30只);造模组大鼠右后肢膝关节均采用前交叉韧带离断术(anterior cruciate ligament-transection,ACLT)制作KOA模型,抽屉试验检测是否到位,造模操作后,驱赶大鼠每天强制活动30 min以诱导KOA模型,造模4周后大鼠出现跛行、跳跃动作,且苏木素-伊红(HE)染色出现软骨表层缺损变形和炎细胞浸润确认造模成功,造模成功后,大鼠随机分为模型组(n=8)、塞来昔布组(n=8)和益肾逐瘀通络汤组(n=8)。各组大鼠给予生理盐水或药物灌胃干预,其中,假手术组和模型组大鼠灌胃10 mL/kg的生理盐水,塞来昔布组大鼠灌胃12 mg/kg的塞来昔布水溶液,益肾逐瘀通络汤组大鼠灌胃5.4 g/kg的中药水煎液,每天1次,连续8周。干预完成后,麻醉大鼠,腹主动脉采血分离血清,分离膝关节,每组取3份膝关节固定于多聚甲醛,其他分离关节软骨组织备用。使用HE、番红固绿染色观察大鼠关节面软骨病理改变;micro-CT分析骨微结构;ELISA检测血清白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-18的蛋白表达量;逆转录定量PCR(reverse transcription quantitative real-time PCR,RT-qPCR)检测细胞焦亡和铁死亡相关基因NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18、ACSL-4、FTH-1、GPX-4和COX-2的mRNA相对表达水平。免疫组化检测NLRP3、Caspase-1、COX-2蛋白表达情况。结果与假手术组比较,模型组大鼠软骨组织表层缺损变形,整体各层细胞排列紊乱,番红固绿染色丢失较多,骨小梁稀疏、分布紊乱;血清炎症因子IL-1β和IL-18升高(P<0.01);软骨组织NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18、ACSL-4和COX-2 mRNA表达量均升高(均P<0.01),FTH-1和GPX-4 mRNA表达量均下降(P<0.01)。与模型组比较,塞来昔布和益肾逐瘀通络汤组大鼠软骨表面较完整且平滑,细胞数量显著增多,番红固绿染色丢失较少,骨小梁致密、骨皮质丰厚,骨微结构均改善;血清炎性因子IL-1β和IL-18表达量下降(P<0.01);软骨组织NLRP3(P<0.01,P<0.05)、ASC、Caspase-1、GSDMD、IL-1β和IL-18、ACSL-4和COX-2 mRNA(均P<0.01)mRNA表达量下降;FTH-1和GPX-4 mRNA相对表达量显著升高(P<0.01)。结论益肾逐瘀通络汤可通过抑制KOA大鼠软骨细胞焦亡和铁死亡,降低血清IL-1β、IL-18的水平,改善骨微结构,治疗KOA。 展开更多
关键词 逐瘀通络汤 骨关节炎 细胞焦亡 铁死亡
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基于Wnt/β-catenin信号通路探讨益肾活络逐痛汤对膝骨关节炎大鼠软骨组织细胞分解代谢的影响 被引量：1
2
作者 杨雨旸 李继安 +2 位作者 王萌 虞跃跃 邹德辉 《中成药》 北大核心 2025年第4期1321-1325,共5页
目的探究益肾活络逐痛汤对膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨组织细胞分解代谢的影响。方法将大鼠随机分为假手术组、模型组、塞来昔布组(10 mg/kg)和益肾活络逐痛汤组(6 g/kg)。采用前交叉韧带离断手术建立KOA模型,造模成功后给予相应剂量药物,... 目的探究益肾活络逐痛汤对膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨组织细胞分解代谢的影响。方法将大鼠随机分为假手术组、模型组、塞来昔布组(10 mg/kg)和益肾活络逐痛汤组(6 g/kg)。采用前交叉韧带离断手术建立KOA模型,造模成功后给予相应剂量药物,连续8周。HE染色及番红O固绿染色观察关节面软骨组织病理改变并进行OARSI评分,ELISA法检测血清IL-1β、IL-18、MMP3水平,RT-qPCR法检测软骨组织Wnt4、β-catenin、Axin、GSK-3β、Col 2a、SOX9、OCN、Caspase-3 mRNA表达,免疫组化法检测β-catenin、GSK-3β、SOX9、Caspase-3蛋白表达。结果与模型组比较,益肾活络逐痛汤组大鼠关节软骨组织表层较完整,OARSI评分降低(P<0.01);血清IL-1β、IL-18、MMP3水平降低(P<0.01);关节软骨组织Wnt4、β-catenin、GSK-3β、Caspase-3 mRNA表达降低(P<0.01),Axin、SOX9、Col 2a、OCN mRNA表达升高(P<0.01),β-catenin、GSK-3β、Caspase-3蛋白表达降低(P<0.01),SOX9蛋白表达升高(P<0.01)。结论益肾活络逐痛汤可以改善KOA大鼠关节软骨组织损伤,其作用可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路活化,调控软骨组织细胞分解代谢有关。 展开更多
关键词 益肾活络逐痛汤 膝骨关节炎 WNT/Β-CATENIN信号通路 细胞分解代谢
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食管鳞癌差异表达基因的筛选及其与免疫细胞浸润和预后的相关性
3
作者 王高燕 李青园 +2 位作者 杨荣芳 王永红 沈素朋 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS 北大核心 2024年第4期337-347,共11页
目的:利用GEO数据库筛选食管鳞癌的差异表达基因(DEGs),并进一步分析这些基因与食管鳞癌中免疫细胞浸润之间的相关性,以及对预后的影响。方法:从GEO数据库筛选食管鳞状细胞癌芯片数据集GSE23400,使用R软件中的Limma包来分析DEGs。整合GS... 目的:利用GEO数据库筛选食管鳞癌的差异表达基因(DEGs),并进一步分析这些基因与食管鳞癌中免疫细胞浸润之间的相关性,以及对预后的影响。方法:从GEO数据库筛选食管鳞状细胞癌芯片数据集GSE23400,使用R软件中的Limma包来分析DEGs。整合GSE23400芯片中的两平台数据并通过GSVA包的ssGSEA算法计算每个样本免疫细胞浸润程度,并分别计算免疫浸润细胞与DEGs之间的相关性。结合GSE53624数据集分析DEGs对患者生存的影响,分析生存相关基因表达与免疫细胞浸润程度的相关性。使用GSE53622数据集验证食管鳞癌生存相关基因的表达,以及其与患者预后的关系。在38例食管鳞癌和相应癌旁非肿瘤组织中,采用免疫组织化学方法(IHC)检测EHF和CSTB的蛋白表达水平。使用RT-qPCR和Western blot检测EHF和CSTB在食管鳞癌中的mRNA和蛋白表达水平。结果:通过对104例食管鳞癌患者癌组织和正常组织的数据进行分析,共获得38个DEGs。免疫浸润研究发现免疫细胞在癌组织和正常组织中的浸润程度有所不同,38个DEGs与免疫细胞浸润程度具有相关性。在GSE53624数据集中,EHF基因表达与CD4^(+)T细胞和B细胞的浸润程度呈显著正相关,相关系数r分别为0.69和0.67(均P<0.01),CSTB基因表达与CD8^(+)T细胞和自然杀伤T细胞的浸润程度显著正相关,相关系数r分别为0.76和0.62(均P<0.01);食管癌患者中EHF和CSTB基因表达与生存时间显著相关(均P<0.05),EHF和CSTB基因高表达患者的生存时间显著高于低表达患者(中位生存期59.1 vs.24.1个月;63.1 vs.23.9个月)。在GSE53622数据集中,EHF和CSTB基因表达下调(均P<0.01),EHF和CSTB基因高表达的食管鳞癌患者比低表达患者预后好(中位生存期NA vs.29.7个月;NA vs.17.9个月,均P<0.05)。IHC结果显示,EHF和CSTB在食管鳞癌中的蛋白表达水平均低于相应癌旁组织(均P<0.05)。RT-qPCR和Western blot结果显示,EHF和CSTB在食管鳞癌细胞中的表达显著低于食管正常鳞状上皮细胞(均P<0.05)。结论:EHF和CSTB基因可能在食管鳞癌的肿瘤免疫及预后中发挥着重要作用,可以为患者免疫治疗和预后判断提供理论依据。 展开更多
关键词 食管鳞癌 EHF基因 CSTB基因 免疫细胞浸润 生存分析
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