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补肾法调控小鼠卵母细胞自噬促进其成熟的分子机制研究
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作者 吴忠玉 刘雪平 +5 位作者 唐思玲 张新苗 郗红燕 何文娟 吴莉园 段彦苍 《世界中医药》 北大核心 2025年第11期1898-1905,共8页
目的:研究补肾法对体外培养小鼠卵母细胞成熟的促进作用及其对丝裂原细胞外信号调节激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路和自噬的影响。方法:150只雌性美国癌症研究所(ICR)小鼠随机分为5组,空白对照组和自噬抑制剂组小鼠蒸馏水灌... 目的:研究补肾法对体外培养小鼠卵母细胞成熟的促进作用及其对丝裂原细胞外信号调节激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路和自噬的影响。方法:150只雌性美国癌症研究所(ICR)小鼠随机分为5组,空白对照组和自噬抑制剂组小鼠蒸馏水灌胃,补肾组、补肾加自噬抑制剂组、补肾加MEK抑制剂组小鼠补肾调经Ⅱ、Ⅲ号方灌胃。剥离卵母细胞复合体(COCs)进行体外培养。定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测卵母细胞微管相关蛋白1轻链3(LC3)、螯合体1(p62)、MEK1/2、ERK1/2 mRNA表达情况;免疫荧光法检测卵母细胞LC3、p62、MEK1/2、ERK1/2、p-MEK1/2、p-ERK1/2蛋白表达情况。结果:与空白对照组比较,补肾组卵母细胞第一极体排出率升高,胞质中皮质颗粒密度降低,卵母细胞中LC3、MEK1/2、ERK1/2 mRNA表达升高,p62 mRNA和蛋白表达降低,LC3、p-MEK1/2、p-ERK1/2蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);自噬抑制剂组卵母细胞第一极体排出率降低,胞质中皮质颗粒密度升高,卵母细胞中LC3 mRNA和蛋白表达降低,p62 mRNA和蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。与自噬抑制剂组比较,补肾加自噬抑制剂组卵母细胞第一极体排出率升高,胞质中皮质颗粒密度降低,LC3 mRNA和蛋白表达升高,p62 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。与补肾组比较,补肾加MEK抑制剂组卵母细胞第一极体排出率降低,胞质中皮质颗粒密度升高,卵母细胞中LC3、MEK、ERK mRNA表达降低,p62 mRNA和蛋白表达升高,LC3、p-MEK1/2、p-ERK1/2蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论:补肾调经系列方可通过激活MEK/ERK信号通路提高卵母细胞自噬水平从而促进小鼠卵母细胞成熟。 展开更多
关键词 补肾调经系列方 小鼠 卵母细胞 自噬 丝裂原细胞外信号调节激酶 细胞外信号调节激酶 信号通路 分子生物学
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依普利酮抑制盐皮质激素受体活化减缓梗阻性肾病细胞自噬的研究 被引量:6
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作者 柴亚男 马雪莲 +4 位作者 郝娟 张雨轩 赵绮悦 高晓萌 许庆友 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期256-260,共5页
目的观察盐皮质激素受体阻断剂依普利酮对梗阻性肾病细胞自噬的作用和机制。方法36只♂Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组和依普利酮组,通过结扎大鼠单侧输尿管制备动物模型。依普利酮组给予依普利酮100 mg·kg^-1·d^-1,10 ... 目的观察盐皮质激素受体阻断剂依普利酮对梗阻性肾病细胞自噬的作用和机制。方法36只♂Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组和依普利酮组,通过结扎大鼠单侧输尿管制备动物模型。依普利酮组给予依普利酮100 mg·kg^-1·d^-1,10 d后摘取梗阻侧肾脏,激光共聚焦显微镜检测NR3C2表达,免疫组化和Western blot检测SGK-1、p-mTOR、Atg5、Beclin-1和LC3的表达。结果激光共聚焦显微镜下显示:NR3C2在假手术组表达于肾小管远端上皮细胞的细胞质,细胞核内未见表达,模型组较假手术组表达明显增强,主要见于细胞核,与模型组相比,依普利酮组NR3C2在细胞核表达明显减弱;免疫组化和Western blot结果显示,与假手术组比,模型组SGK-1、Atg5、Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ表达增强,p-mTOR表达减弱,给予依普利酮治疗后SGK-1、Atg5、Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ表达被下调,p-mTOR被上调。结论依普利酮可以通过抑制盐皮质激素受体活化,减缓梗阻性肾病细胞自噬的表达。 展开更多
关键词 依普利酮 梗阻性肾病 盐皮质激素受体 细胞自噬 NR3C2 SGK-1 P-MTOR
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基于PINK1/MFN2/Parkin通路探讨金雀根和黄芪配伍对糖尿病肾病大鼠的影响 被引量:3
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作者 郭献炳 聂远 +3 位作者 许藏藏 赵阳 林健 丁英钧 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期3620-3628,共9页
目的探讨金雀根和黄芪配伍对糖尿病肾病(DKD)大鼠的影响。方法将SD大鼠随机分为正常组、模型组、恩格列净组、金雀根组、黄芪组、配伍组,每组10只。采用单侧切除肾脏联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)复制DKD大鼠模型,造模成功后灌胃相应剂... 目的探讨金雀根和黄芪配伍对糖尿病肾病(DKD)大鼠的影响。方法将SD大鼠随机分为正常组、模型组、恩格列净组、金雀根组、黄芪组、配伍组,每组10只。采用单侧切除肾脏联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)复制DKD大鼠模型,造模成功后灌胃相应剂量药物8周。第0、4、8周检测24 h尿微量白蛋白(24 h U-mALB);ELISA法检测Scr、BUN、CysC、MDA水平及SOD活性;荧光探针法检测肾组织ROS表达;HE、PAS、Masson、PASM-Masson染色观察肾组织病理结构改变;免疫组织化学法检测肾组织NOX4、Drp1、MFN2、P62表达;Western blot法检测肾组织PINK1、MFN2、Parkin、LC3-Ⅱ/Ⅰ、P62、p-Drp1蛋白表达。结果与模型组比较,各给药组大鼠24 h U-mALB、BUN、Scr、CysC水平均降低(P<0.01),肾组织病理性结构损伤改善;血清和组织MDA水平降低(P<0.01),SOD活性升高(P<0.01);肾组织PINK1、MFN2、Parkin、LC3-Ⅱ/Ⅰ蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),p-Drp1、P62蛋白表达降低(P<0.01),其中配伍组作用优于单用药组(P<0.05,P<0.01)。结论金雀根和黄芪配伍可能是通过调控PINK1/MFN2/Parkin通路改善线粒体动力学,激活线粒体自噬,抑制氧化应激,减轻肾脏病理损伤,改善DKD大鼠肾功能。 展开更多
关键词 金雀根 黄芪 糖尿病肾病 线粒体动力学 线粒体自噬 PINK1/MFN2/Parkin通路
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肾消解毒通络方对糖尿病肾病金黄地鼠肾脏AIM2介导细胞焦亡的影响 被引量:3
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作者 肖郁朋 丁英钧 +6 位作者 丁宝珠 侯树杰 刘思杨 张紫薇 李晓霞 梁文杰 张楠 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期3603-3612,共10页
目的探讨肾消解毒通络方对糖尿病肾病金黄地鼠肾脏AIM2介导细胞焦亡的影响及其作用机制。方法50只SPF级雄性金黄地鼠随机分为对照组和造模组,造模组采用高糖高脂喂养联合腹腔注射STZ构建糖尿病肾病模型,建模成功后随机分为模型组、恩格... 目的探讨肾消解毒通络方对糖尿病肾病金黄地鼠肾脏AIM2介导细胞焦亡的影响及其作用机制。方法50只SPF级雄性金黄地鼠随机分为对照组和造模组,造模组采用高糖高脂喂养联合腹腔注射STZ构建糖尿病肾病模型,建模成功后随机分为模型组、恩格列净组(10 mg/kg)和肾消解毒通络方低、高剂量组(12.8、25.6 g/kg),灌胃给药8周。全自动生化分析仪检测空腹血糖、24 h-UTP和血清TC、LDL-C、Scr、Sur水平,生化法检测血清SOD活性和MDA水平,ELISA法检测血清IL-1β、IL-18、TNF-α水平,HE和PAS染色观察金黄地鼠肾组织病理形态学变化,免疫荧光或免疫组化法检测肾组织ROS、γH2AX蛋白表达,Western blot法及免疫组化法检测肾组织AIM2、caspase-1、GSDMD蛋白表达。结果与对照组比较,模型组金黄地鼠肾小球出现萎缩,肾小球囊腔增大、系膜区增宽,肾小管扩张、水肿伴有坏死,空腹血糖、24 h-UTP、血清TC、LDL-C、Scr、Sur、IL-1β、IL-18、TNF-α、MDA水平和肾组织ROS、γH2AX、AIM2、caspase-1、GSDMD蛋白表达升高(P<0.01),血清SOD活性降低(P<0.01);与模型组比较,肾消解毒通络方高剂量组和恩格列净组肾组织病理学得到改善,空腹血糖、24 h-UTP、血清TC、LDL-C、Scr、Sur、IL-1β、IL-18、TNF-α、MDA水平和肾组织ROS、γH2AX、AIM2、caspase-1、GSDMD蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),血清SOD活性升高(P<0.01)。结论肾消解毒通络方可通过抑制金黄地鼠ROS-dsDNA-AIM2信号通路表达,降低肾组织ROS水平,减少肾脏固有细胞DNA损伤,减少AIM2炎症小体合成,从而抑制AIM2介导的细胞焦亡,减轻肾脏炎症损伤。 展开更多
关键词 肾消解毒通络方 糖尿病肾病 黑色素瘤缺乏因子2(AIM2) 细胞焦亡 炎症
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艾沙利酮抑制妊娠加重梗阻性肾病大鼠淋巴管生成及肾间质纤维化
5
作者 牛洁琪 张淑琛 +5 位作者 许畅 王洪双 方芳 高兰君 王香婷 王筝 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1700-1710,共11页
目的:探讨艾沙利酮抑制妊娠加重梗阻性肾病大鼠淋巴管生成的机制及对肾脏的保护作用。方法:未经产雌性Wistar大鼠40只随机分为假手术组、假手术+妊娠组、模型组和艾沙利酮组,每组10只。将模型组与艾沙利酮组大鼠采用单侧输尿管结扎(unil... 目的:探讨艾沙利酮抑制妊娠加重梗阻性肾病大鼠淋巴管生成的机制及对肾脏的保护作用。方法:未经产雌性Wistar大鼠40只随机分为假手术组、假手术+妊娠组、模型组和艾沙利酮组,每组10只。将模型组与艾沙利酮组大鼠采用单侧输尿管结扎(unilateral ureteral obstruction,UUO)手术造成肾脏损伤,其余两组仅游离输尿管但不结扎。UUO术后第9周将假手术+妊娠组、模型组和艾沙利酮组的雌鼠进行阴道涂片,将处于动情前期或动情期的雌鼠与雄鼠按2∶1比例合笼,并密切观察,将发现阴栓且阴道涂片中含有大量精子细胞确定为妊娠第1天,建立梗阻性肾病妊娠大鼠模型。艾沙利酮组在UUO术后第2天开始给药,给予艾沙利酮1 mg·kg^(−1)·d^(−1)治疗。妊娠后第18天代谢笼留取24 h尿液,次日处死母鼠,留取血清标本,摘取梗阻对侧肾脏。采用常规生化法检测尿素氮(blood urea nitrogen,BUN),计算内生肌酐清除率(creatinine clearance rate,Ccr)。苏木精-伊红(HE)、马松(Masson)和天狼星红(Sirius red)染色观察大鼠肾脏组织病理形态学改变。ELISA法测定血清中醛固酮含量。免疫组化、real-time PCR和Western blot检测盐皮质激素受体(mineralocorticoid receptor,MR)活化、淋巴管生成以及相关信号通路、肾纤维化相关指标的表达。结果:肾功能结果显示模型组大鼠BUN升高,Ccr下降(P<0.01)。肾脏病理显示模型组大鼠肾小管扩张明显,有大量胶原纤维沉积及炎症细胞浸润。ELISA结果显示模型组血清醛固酮含量显著升高(P<0.01)。免疫组化结果显示模型组大鼠肾脏MR活化后入核数量增多。Western blot和real-time PCR结果显示模型组大鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)表达显著升高(P<0.01)。免疫组化结果显示模型组大鼠肾脏血管内皮生长因子C(vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C)和VEGF受体3(VEGF receptor 3,VEGFR3)表达显著增多,主要表达于肾小管间质,real-time PCR检测二者表达显示出相同趋势(P<0.01)。免疫组化结果显示模型组大鼠磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)和蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)信号通路被激活,二者的磷酸化表达明显增强,主要位于肾小管上皮细胞及间质细胞的细胞核,Western blot检测二者表达也显示出相同趋势(P<0.01)。免疫组化结果显示模型组大鼠Ⅲ型胶原(collagen typeⅢ,ColⅢ)表达明显增强,主要表达于肾小管间质,real-time PCR检测其表达也显示出相同趋势(P<0.01)。给予艾沙利酮治疗后可改善肾功能,减轻肾脏病理损伤,抑制醛固酮分泌,下调MR、NGAL、VEGF-C、VEGFR3、p-PI3K、p-Akt和ColⅢ的表达(P<0.01)。结论:艾沙利酮可以阻断醛固酮诱导的MR活化,调控PI3K/Akt信号通路,减轻梗阻性肾脏病妊娠大鼠梗阻对侧肾脏淋巴管生成,减少胶原沉积,延缓肾间质纤维化进展。 展开更多
关键词 淋巴管生成 肾间质纤维化 艾沙利酮 梗阻性肾病 醛固酮
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清消饮对痤疮模型大鼠角质形成细胞凋亡的影响 被引量:2
6
作者 王雨晴 宋晓丹 +3 位作者 成秀梅 梅连敏 薛思思 张晓云 《中成药》 北大核心 2025年第3期937-941,共5页
目的观察清消饮对痤疮模型大鼠角质形成细胞凋亡的影响。方法60只Wistar大鼠随机抽取10只为空白组,其余大鼠均于右耳廓皮内均匀涂抹油酸复制大鼠痤疮模型。造模成功后,50只大鼠随机分为模型组、异维A酸组(3.13 mg/kg)和清消饮低、中、... 目的观察清消饮对痤疮模型大鼠角质形成细胞凋亡的影响。方法60只Wistar大鼠随机抽取10只为空白组,其余大鼠均于右耳廓皮内均匀涂抹油酸复制大鼠痤疮模型。造模成功后,50只大鼠随机分为模型组、异维A酸组(3.13 mg/kg)和清消饮低、中、高剂量组(5.63、11.25、22.5 g/kg),灌胃给予相应药物。给药第14天,观察耳廓外观形态变化并测量厚度,HE染色观察耳廓病理改变,TUNEL法检测耳廓组织角质形成细胞凋亡率,Western blot法和RT-qPCR法检测耳廓组织P53、Bax、Bcl-2、caspase-3蛋白和mRNA表达。结果模型组大鼠耳廓粗糙增厚,颜色暗红,有散在丘疹;病理观察显示表皮、真皮、皮下组织界限模糊,毛囊皮脂腺导管角质形成细胞堆积,毛囊口过度角化,漏斗部呈壶状扩大。与空白组比较,模型组大鼠耳廓厚度增加,角质形成细胞凋亡率降低(P<0.05),耳廓组织P53、Bax、caspase-3蛋白和mRNA表达降低(P<0.05),Bcl-2蛋白和mRNA表达升高(P<0.05);与模型组比较,异维A酸组和清消饮各剂量组大鼠耳廓厚度减少,耳廓组织P53、Bax、caspase-3蛋白和mRNA表达升高(P<0.05),Bcl-2蛋白和mRNA表达降低(P<0.05),并呈剂量依赖性,异维A酸组和清消饮高剂量组大鼠角质形成细胞凋亡率升高(P<0.05)。结论清消饮可通过升高P53、Bax、caspase-3表达,降低Bcl-2表达来促进角质形成细胞凋亡,改善大鼠耳廓毛囊皮脂腺导管的过度角化。 展开更多
关键词 清消饮 痤疮 角质形成细胞 凋亡
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慢性肾脏病对子代鼠生长发育和认知功能的影响及艾沙利酮在其中的作用
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作者 许畅 牛洁琪 +5 位作者 张淑琛 王洪双 方芳 钟艳 王香婷 王筝 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第2期261-267,共7页
目的:观察慢性肾脏病对子代鼠生长发育和认知功能的影响以及艾沙利酮的干预作用。方法:采用单侧输尿管结扎(unilateral ureteral obstruction,UUO)手术制备慢性肾脏病动物模型,将雌性未经产Wistar大鼠30只随机分为假手术+妊娠组、UUO+... 目的:观察慢性肾脏病对子代鼠生长发育和认知功能的影响以及艾沙利酮的干预作用。方法:采用单侧输尿管结扎(unilateral ureteral obstruction,UUO)手术制备慢性肾脏病动物模型,将雌性未经产Wistar大鼠30只随机分为假手术+妊娠组、UUO+妊娠组和UUO+妊娠+艾沙利酮组,每组10只,其中UUO+妊娠组和UUO+妊娠+艾沙利酮组大鼠进行UUO手术,假手术+妊娠组大鼠仅游离输尿管但不结扎剪断。UUO术后第2天开始给药,UUO+妊娠+艾沙利酮组给予艾沙利酮1 mg·kg^(-1)·d^(-1)治疗。UUO术后第8周,对各组大鼠进行阴道涂片,密切观察大鼠动情周期,将处于动情前期或动情期雌鼠和雄鼠按2∶1比例合笼,发现阴道栓以及阴道涂片见大量精子之日确定为妊娠第1天,慢性肾脏病妊娠大鼠模型制备成功。大鼠妊娠21~22 d后产仔,每组随机选取10只子代鼠进行实验,分别为假手术组子代鼠、UUO模型组子代鼠和艾沙利酮治疗组子代鼠,由相应组别的母鼠喂养至第21天,测量每组子代鼠的体重和尾巴长度。采用旷场实验,Y迷宫实验,Morris水迷宫实验检测各组子代鼠的学习记忆能力。采用ELISA方法检测各组子代鼠血清醛固酮、5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)和脑源性神经营养因子(brainderived neurotrophic factor,BDNF)水平;采用常规生化法检测各组子代鼠血清肌酐(serum creatinine,SCr)和血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN);HE染色观察肾脏病理情况。结果:UUO组子代鼠组的体重和尾巴长度低于假手术组子代鼠组(P<0.05),行为学实验结果显示,UUO组子代鼠组的探索能力,记忆能力均低于假手术组子代鼠组(P<0.05),艾沙利酮治疗组子代鼠组的行为发育能力高于UUO组子代鼠组(P<0.05);ELISA结果显示,与假手术组子代鼠组相比,UUO组子代鼠组血清5-HT、BDNF、醛固酮含量降低(P<0.01),而艾沙利酮治疗组子代鼠组血清5-HT、BDNF、醛固酮含量较UUO组子代鼠组升高(P<0.05)。肾功能结果显示,UUO组子代鼠组血清SCr和BUN较假手术组子代鼠组升高(P<0.01),艾沙利酮治疗组子代鼠组血清SCr和BUN降低(P<0.01)。HE染色观察肾脏病理结果显示,UUO组子代鼠组肾小管出现轻微扩张,出现炎性细胞浸润,艾沙利酮治疗组子代鼠组肾小管排列情况较整齐,炎性细胞浸润减少。结论:慢性肾脏病对出生后21 d子代鼠一般发育情况和学习记忆能力以及肾脏功能造成影响,母鼠慢性肾脏病经艾沙利酮干预后,可减轻对子代鼠的生长发育情况和学习记忆能力的影响。 展开更多
关键词 慢性肾脏病 艾沙利酮 子代鼠 行为发育 醛固酮
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慢性肾脏病“肾络瘀阻”理论探讨及机制研究 被引量:28
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作者 王筝 武宁 +5 位作者 何珍 徐贺朋 周文平 冯桃花 许庆友 王香婷 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2021年第2期566-570,共5页
慢性肾脏病本虚标实,病情复杂,赵玉庸教授总结多年临床经验,运用络病理论,提出慢性肾脏病“肾络瘀阻”病机学说,以益气活血通络为法,创立“肾络通”方剂,取得很好临床疗效。文章从理论探讨、方药确立、临床应用及机制研究等角度进行阐述。
关键词 慢性肾脏病 肾络瘀阻 肾络通 益肾活血通络
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白藜芦醇对铁超载大鼠肝星状细胞凋亡的影响 被引量:1
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作者 王华 曲维忠 +4 位作者 王超楠 江川 梁小栋 王媛媛 高永刚 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期451-457,共7页
目的:研究白藜芦醇(RES)对铁超载大鼠肝星状细胞凋亡的影响。方法:体外培养大鼠肝星状细胞细胞系HSC-T6,使用25μmol/L的柠檬酸铁铵(FAC)刺激24 h建立铁超载模型,将细胞分为对照组、铁超载模型组(25μmol/L FAC)、低剂量RES(L-RES)组(3... 目的:研究白藜芦醇(RES)对铁超载大鼠肝星状细胞凋亡的影响。方法:体外培养大鼠肝星状细胞细胞系HSC-T6,使用25μmol/L的柠檬酸铁铵(FAC)刺激24 h建立铁超载模型,将细胞分为对照组、铁超载模型组(25μmol/L FAC)、低剂量RES(L-RES)组(3.12μmol/L RES+25μmol/L FAC)、中剂量RES(M-RES)组(6.25μmol/L RES+25μmol/L FAC)、高剂量RES(H-RES)组(12.5μmol/L RES+25μmol/L FAC)和去铁铵(DFO)组(50μmol/L DFO+25μmol/L FAC)。采用CCK-8法测定HSC-T6细胞活力;采用免疫荧光法测定细胞凋亡及活性氧(ROS)水平;通过普鲁士蓝染色观察HSC-T6细胞中铁含量的变化;通过ELISA法测定各组HSC-T6细胞上清液中金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)和基质金属蛋白酶13(MMP-13)的表达水平;Western blot法检测HSC-T6细胞中I型胶原蛋白(Col-I)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、caspase-3及Bax蛋白的表达水平。结果:CCK-8实验表明RES可抑制铁超载HSC-T6细胞活力(P<0.05)。免疫荧光显示RES可促进HSC-T6细胞凋亡,抑制ROS生成。普鲁士蓝染色显示RES可以减少铁超载HSC-T6细胞铁含量。ELISA结果表明RES可升高铁超载HSC-T6细胞中MMP-13的水平,降低TIMP-1的表达水平(P<0.05)。Western blot结果显示RES降低铁超载HSC-T6细胞中Col-I和α-SMA的表达,并上调caspase-3及Bax蛋白的表达水平(P<0.05)。结论:RES可以上调体外铁超载大鼠HSC-T6细胞中caspase-3及Bax的表达,促进细胞凋亡,抑制该细胞活化。 展开更多
关键词 白藜芦醇 铁超载 肝星状细胞 细胞凋亡
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益气活血通络方调控NR4A1/NF-κB减轻UUO大鼠炎性损伤的机制研究 被引量:1
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作者 徐贺朋 何珍 +6 位作者 王洪双 张孟娟 周文平 许畅 刘佳志 王筝 王香婷 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2023年第1期243-250,共8页
目的观察益气活血通络方通过调控孤核受体4A1(Nuclear receptor subfamily 4 group A member 1,NR4A1)对单侧输尿管结扎(Unilateral uretera obstruction,UUO)大鼠炎性损伤的影响。方法健康雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(Sham)、UUO组... 目的观察益气活血通络方通过调控孤核受体4A1(Nuclear receptor subfamily 4 group A member 1,NR4A1)对单侧输尿管结扎(Unilateral uretera obstruction,UUO)大鼠炎性损伤的影响。方法健康雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(Sham)、UUO组(UUO)、氯沙坦组(LOS)、益气活血通络方组(TCM),每组12只。UUO组、LOS组、TCM组采用单侧输尿管结扎建立肾纤维化模型。TCM组给予益气活血通络方1.92 g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,LOS组给予氯沙坦溶液20 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,其余两组给予生理盐水灌胃,每日1次。术后第14天,处死大鼠,收集梗阻侧肾脏,检测各组大鼠肾功能,免疫组化、蛋白印迹法(Western BLOT)检测NR4A1、核因子κB(Nuclear factor-kappa B,NF-κB)及炎症因子白介素-6(Interleukin-6,Il-6),单核细胞趋化蛋白-1(Monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)的表达,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测NR4A1、NF-κB mRNA的表达。结果与Sham组比较,UUO组大鼠血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平显著升高(P<0.05);经治疗,LOS组、TCM组Scr、BUN水平较UUO组显著降低(P<0.05)。免疫组化结果显示,与Sham组比较,UUO组NF-κB、IL-6、MCP-1表达显著升高(P<0.05),NR4A1表达显著降低(P<0.05);与UUO组比较,LOS组、TCM组大鼠肾组织中NF-κB、IL-6、MCP-1表达显著降低(P<0.05),NR4A1表达明显升高(P<0.05)。Western blot结果显示,与Sham组比较,UUO组NF-κB、IL-6、MCP-1蛋白表达显著升高(P<0.05),NR4A1蛋白表达显著降低(P<0.05);与UUO组比较,LOS组、TCM组大鼠肾组织中NF-κB、IL-6、MCP-1表达显著降低(P<0.05),NR4A1表达显著升高(P<0.05)。qRT-PCR结果显示,与Sham组比较,UUO组NR4A1 mRNA显著降低(P<0.05),NF-κB mRNA显著升高(P<0.05);与UUO组比较,LOS组、TCM组NR4A1 mRNA水平显著升高(P<0.05),NF-κB mRNA显著降低(P<0.05)。结论益气活血通络方可通过调控NR4A1,下调NF-κB、MCP-1与IL-6的表达,减轻UUO大鼠肾脏炎性损伤。 展开更多
关键词 益气活血通络方 慢性肾脏病 NR4A1 炎性损伤
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卵母细胞体内外核质成熟同步研究进展 被引量:2
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作者 吕金梦 耿静然 杜惠兰 《生理科学进展》 2021年第6期471-474,共4页
卵母细胞成熟是一个复杂的过程,包括了细胞核成熟和细胞质成熟。卵母细胞在体内成熟时,由于卵泡对核成熟所提供的抑制影响,使得细胞核与细胞质可以同步成熟;而在体外成熟的卵母细胞,脱离了卵泡的微环境,导致了细胞质成熟滞后于细胞核成... 卵母细胞成熟是一个复杂的过程,包括了细胞核成熟和细胞质成熟。卵母细胞在体内成熟时,由于卵泡对核成熟所提供的抑制影响,使得细胞核与细胞质可以同步成熟;而在体外成熟的卵母细胞,脱离了卵泡的微环境,导致了细胞质成熟滞后于细胞核成熟。目前在治疗方面虽然可以通过卵母细胞成熟抑制剂来促进卵母细胞核质成熟同步和发育能力,但仍有些不理想;中药在促进核质成熟同步方面尚未见相关研究,本文将对此进行综述。 展开更多
关键词 卵母细胞 核质同步 缝隙连接
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恩格列净通过自噬-溶酶体途径改善糖尿病肾病小鼠肾组织损伤 被引量:11
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作者 杨帆 张亚京 +3 位作者 张晓云 刘利飞 黄家安 王月华 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1938-1943,共6页
目的探讨恩格列净对糖尿病肾病(Diabetic kidney disease,DKD)小鼠肾脏保护作用及自噬-溶酶体通路的影响。方法db/m小鼠作为正常组(Control),db/db小鼠随机分为模型组(Model)、恩格列净组(Empagliflozin)。给药8周,检测小鼠24 h尿蛋白定... 目的探讨恩格列净对糖尿病肾病(Diabetic kidney disease,DKD)小鼠肾脏保护作用及自噬-溶酶体通路的影响。方法db/m小鼠作为正常组(Control),db/db小鼠随机分为模型组(Model)、恩格列净组(Empagliflozin)。给药8周,检测小鼠24 h尿蛋白定量(24 h urine protein,24 h-UTP)、血糖(fasting blood glucose,FBG)、糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin,HBA1c)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三脂(triglyceride,TG)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、肌酐(creatinine,Scr)、血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和单核细胞趋化因子-1(monocyte chemokine-1,MCP-1)水平;Western blot检测肾组织p62、LC3B、Beclin1、Agt7、LAMP1、Bcl-2、caspase-3、Bax蛋白表达;光镜观察肾脏病理变化。结果与Control组比较,Model组小鼠肾小球基底膜增厚,系膜基质增多,囊腔变窄,间质炎性细胞浸润及纤维化(P<0.01);FBG、24 h-UTP、HBA1c、TC、TG、BUN、Scr、TNF-α、IL-1β、MCP-1升高(P<0.01);同时,肾组织LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ、Beclin1、LAMP1、Agt7、Bcl-2降低,p62、caspase-3、Bax升高(P<0.01)。恩格列净干预后,小鼠肾脏病理改变减轻;上述指标变化被逆转。结论恩格列净可能通过修复自噬-溶酶体通路,促进自噬底物降解,抑制炎症因子产生,进而抑制细胞凋亡,从而减轻肾脏损伤。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 恩格列净 自噬-溶酶体通路 炎症 凋亡 分子机制
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子宫内膜异位症小鼠模型研究进展 被引量:6
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作者 孟鑫 陈景伟 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期857-863,共7页
子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)是指具有活性的子宫内膜组织出现在宫腔被覆黏膜以外的部位,因其病因、发病机制尚不明确,中、西医诊断与治疗存在困难,使得EMs成为了近年来的研究热点之一。通过动物模型探讨EMs的病因、发病机制及药... 子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)是指具有活性的子宫内膜组织出现在宫腔被覆黏膜以外的部位,因其病因、发病机制尚不明确,中、西医诊断与治疗存在困难,使得EMs成为了近年来的研究热点之一。通过动物模型探讨EMs的病因、发病机制及药物治疗方法是研究EMs的重要手段。本文介绍了EMs小鼠模型的动物选择、构建方法以及各造模方法优缺点,旨在为EMs动物实验研究提供模型选择的参考。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 小鼠 模型 造模方法
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益气活血解毒中药调控VEGF通路抑制单侧输尿管结扎大鼠对侧肾脏淋巴管生成的研究 被引量:3
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作者 高晓萌 赵绮悦 +5 位作者 刘子骞 刘令今 陈格格 郝娟 王香婷 许庆友 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2021年第9期1539-1547,共9页
观察益气活血解毒中药对单侧输尿管结扎大鼠对侧肾脏淋巴管新生的影响及作用机制。将40只Wistar大鼠随机分为假手术组(Sham)、单侧输尿管结扎组(UUO)、依普利酮治疗组(EPL)和中药治疗组(TCM),每组各10只。除假手术组外,其余大鼠结扎单... 观察益气活血解毒中药对单侧输尿管结扎大鼠对侧肾脏淋巴管新生的影响及作用机制。将40只Wistar大鼠随机分为假手术组(Sham)、单侧输尿管结扎组(UUO)、依普利酮治疗组(EPL)和中药治疗组(TCM),每组各10只。除假手术组外,其余大鼠结扎单侧输尿管(UUO)复制肾间质纤维化动物模型。术后10天摘取大鼠对侧肾脏,HE、Masson检测肾脏病理,免疫荧光及组化方法检测NCC、VEGF-C、VEGFR-3、LYVE-1、PDPN、α-SMA、Vimentin的表达。Western blot检测肾组织NCC、VEGF-C、VEGFR-3和α-SMA的蛋白表达。病理结果显示UUO大鼠对侧肾脏小管间质炎性细胞浸润增多并伴局灶胶原纤维沉积;NCC及VEGF-C表达增强;淋巴管生成标志物LYVE-1、VEGFR-3、PDPN表达增强并与肌成纤维细胞标志物α-SMA、Vimentin呈共表达;益气活血解毒中药可抑制NCC表达、淋巴管生成及表型转化。以上结果说明益气活血解毒中药可调控VEGF通路,抑制梗阻性肾病对侧肾脏淋巴管生成及表型转化,减缓肾脏纤维化进展。 展开更多
关键词 益气活血解毒中药 VEGF-C 淋巴管新生 LYVE-1 单侧输尿管结扎
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活血解毒化瘀方通过MR/NLRP3通路抑制UUO 6个月大鼠对侧肾脏血管平滑肌细胞焦亡的机制研究 被引量:1
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作者 羡云倩 韩雨彤 +3 位作者 强盼盼 郝娟 杨帆 许庆友 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2023年第10期3336-3346,共11页
目的观察活血解毒化瘀方对单侧输尿管梗阻(Unilateral ureteral obstruction,UUO)6个月大鼠模型对侧肾脏血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cell,VSMC)焦亡的干预作用,探讨活血解毒化瘀方对慢性肾脏病(Chronic kidney disease,CKD... 目的观察活血解毒化瘀方对单侧输尿管梗阻(Unilateral ureteral obstruction,UUO)6个月大鼠模型对侧肾脏血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cell,VSMC)焦亡的干预作用,探讨活血解毒化瘀方对慢性肾脏病(Chronic kidney disease,CKD)的部分治疗机制。方法40只雄性Wistar大鼠随机分为假手术(Sham)组、单侧输尿管梗阻(UUO)组、依普利酮治疗(EPL)组和活血解毒化瘀方干预(HJHR)组(n=10)。术后EPL组给予依普利酮,HJHR组给予中药。6个月后摘取右侧肾脏。通过HE染色和Masson染色评估对侧肾脏病理改变。免疫组化检测含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(Cysteinyl aspartate specific proteinase1,Caspase-1)、白细胞介素1β(Interleukin-1β,IL-1β),核因子κappa-B,p65(Nuclear Factorκappa-B,NF-κB,p65)和血清和糖皮质激素诱导的激酶1(Serum and glucocorticoid-induced kinase 1,SGK1)的表达。通过TUNEL染色观察肾脏血管平滑肌细胞的DNA损伤情况。体外实验将大鼠血管平滑肌细胞随机分为4组:空白对照(CON)组、醛固酮刺激(ALD)组、醛固酮加依普利酮治疗(EPL)组和醛固酮加活血解毒化瘀方干预(HJHR)组。ALD组给予醛固酮刺激24 h,EPL组和HJHR组在醛固酮刺激前分别给予依普利酮和10%大鼠含中药血清预处理。通过流式细胞术检测细胞凋亡率。通过免疫荧光观察细胞膜中GSDMD蛋白(Gasdermin D,GSDMD)的穿孔和核受体亚家族3C组成员2(Nuclear Receptor subfamily 3 group C member 2,NR3C2)、编码盐皮质激素受体(Mineralocorticoid receptor,MR)的核转位。通过蛋白免疫印迹法检测炎症和细胞焦亡相关信号分子的蛋白质表达。通过实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测细胞焦亡信号通路相关分子的信使RNA(Messenger RNA,mRNA)表达。结果与Sham组比较,UUO组肾脏血管及血管平滑肌细胞的DNA损伤加重,Caspase-1、IL-1β、SGK1、NF-κB的表达增高;与UUO组比较,EPL组和HJHR组肾脏血管及血管平滑肌细胞的DNA损伤有所减轻,Caspase-1、IL-1β、SGK1和NF-κB的表达降低。与CON组比较,ALD组出现大鼠血管平滑肌细胞焦亡及细胞DNA损伤,NR3C2、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(Nod-like receptor protein 3,NLRP3)、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、SGK1、NF-κB的表达上调;与ALD组比较,EPL组和HJHR组细胞焦亡及细胞DNA损伤减轻,NR3C2、NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、SGK1、NF-κB的表达降低。结论活血解毒化瘀方通过抑制MR/NLRP3通路的激活,抑制血管平滑肌细胞焦亡,从而减轻UUO对侧肾脏血管损伤。 展开更多
关键词 活血解毒化瘀方 细胞焦亡 单侧输尿管梗阻 血管平滑肌细胞 依普利酮
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补虚解毒化瘀方通过调控NCC/HIF-1α信号通路对梗阻性肾病大鼠的作用
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作者 赵绮悦 高晓萌 +3 位作者 刘令今 刘子骞 陈格格 许庆友 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期582-586,共5页
目的探究补虚解毒化瘀方对梗阻性肾病大鼠对侧肾脏肾小管上皮细胞表型转化的作用。方法40只大鼠随机分为假手术组、模型组、依普利酮组和中药(补虚解毒化瘀方)组,采用单侧输尿管结扎法制备梗阻性肾病大鼠模型,给予相应药物干预后,采用Ma... 目的探究补虚解毒化瘀方对梗阻性肾病大鼠对侧肾脏肾小管上皮细胞表型转化的作用。方法40只大鼠随机分为假手术组、模型组、依普利酮组和中药(补虚解毒化瘀方)组,采用单侧输尿管结扎法制备梗阻性肾病大鼠模型,给予相应药物干预后,采用Masson染色观察肾脏病理形态,Western blot、免疫组化和免疫荧光法检测血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶-1(SGK-1)、钠氯协同转运蛋白(NCC)、低氧诱导因子(HIF-1α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、波形蛋白(Vimentin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,RT-qPCR法检测SGK-1、TGF-β1 mRNA表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠肾小管间质炎性细胞浸润和局灶性胶原纤维沉积增加(P<0.01),SGK-1、NCC、HIF-1α、TGF-β1、Vimentin、α-SMA蛋白表达和SGK-1、TGF-β1 mRNA表达均升高(P<0.05,P<0.01);给予中药治疗后可改善以上指标(P<0.05,P<0.01)。结论大鼠单侧输尿管梗阻可以上调对侧肾组织NCC表达,刺激HIF-1α表达并诱导小管上皮细胞表型转化,而补虚解毒化瘀方可调控NCC/HIF-1α信号通路抑制细胞表型转化。 展开更多
关键词 补虚解毒化瘀方 梗阻性肾病 单侧输尿管梗阻 肾小管上皮细胞表型转化 钠氯协同转运蛋白(NCC) 低氧诱导因子-1α(HIF-1α)
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金雀根、黄芪及其配伍对糖尿病肾脏疾病大鼠JNK/SAPK信号通路的影响 被引量:1
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作者 林健 聂远 +2 位作者 郭献炳 赵阳 丁英钧 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期2580-2586,共7页
目的探究金雀根、黄芪及其配伍对糖尿病肾脏疾病(DKD)模型大鼠肾脏保护作用及机制。方法将60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、恩格列净组(10 mg/kg)、金雀根组(3.1 g/kg)、黄芪组(3.1 g/kg)、金雀根加黄芪组(6.2 g/kg),除正常组外,各... 目的探究金雀根、黄芪及其配伍对糖尿病肾脏疾病(DKD)模型大鼠肾脏保护作用及机制。方法将60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、恩格列净组(10 mg/kg)、金雀根组(3.1 g/kg)、黄芪组(3.1 g/kg)、金雀根加黄芪组(6.2 g/kg),除正常组外,各组大鼠行左侧肾摘除手术并腹腔注射链脲佐菌素(STZ,35 mg/kg)建立DKD模型,各组分别给予相应药物灌胃8周。期间定期检测FBG、24 h尿微量蛋白(24 h U-mAlb)。给药8周后处死大鼠,检测Scr、BUN、Cystatin C水平,HE、PAS、Masson染色观察肾组织病理改变,免疫组织化学法检测巨噬细胞标志蛋白CD68、iNOS表达,Western blot法检测肾组织JNK/SAPK通路蛋白JNK、p-JNK和TNF-α、IL-1β、ICAM-1表达,ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β、ICAM-1水平。结果与正常组比较,模型组大鼠FBG、24 h U-mAlb、BUN、Scr、Cystatin C水平均升高(P<0.01),肾组织出现病理损伤,肾组织和血清TNF-α、IL-1β、ICAM-1水平升高(P<0.01),肾组织JNK和p-JNK蛋白表达升高(P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠FBG、24 h U-mAlb、BUN、Scr、Cystatin C水平均降低(P<0.05,P<0.01),肾组织病理损伤减轻,肾组织和血清TNF-α、IL-1β、ICAM-1水平降低(P<0.01),肾组织JNK和p-JNK蛋白表达降低(P<0.01);金雀根组与黄芪组比较各指标均无明显变化(P>0.05);与金雀根组或黄芪组比较,金雀根加黄芪组各指标均有不同程度的改善(P<0.05,P<0.01)。结论金雀根、黄芪及其配伍可改善DKD大鼠肾功能,抑制M1型巨噬细胞,减少炎症因子分泌,减轻肾脏病理损伤,其机制可能与抑制JNK/SAPK信号通路激活有关,金雀根与黄芪配伍药效较好。 展开更多
关键词 金雀根 黄芪 糖尿病肾脏疾病 JNK/SAPK信号通路 炎症因子
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资癸益冲方通过调控SIRT1/PGC-1α信号通路对卵巢颗粒细胞线粒体能量代谢的改善作用 被引量:1
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作者 刘雪平 唐思玲 +5 位作者 宿滋 李荣霞 郗红燕 张新苗 吴忠玉 段彦苍 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期3271-3277,共7页
目的探讨资癸益冲方对早发性卵巢功能不全(POI)体外模型线粒体能量代谢的影响。方法应用丙烯醛(ACR)干预人卵巢颗粒细胞KGN构建POI体外模型,给予资癸益冲方含药血清干预,设置对照组、ACR组、资癸益冲方组、EX527(SIRT1抑制剂)组、EX527... 目的探讨资癸益冲方对早发性卵巢功能不全(POI)体外模型线粒体能量代谢的影响。方法应用丙烯醛(ACR)干预人卵巢颗粒细胞KGN构建POI体外模型,给予资癸益冲方含药血清干预,设置对照组、ACR组、资癸益冲方组、EX527(SIRT1抑制剂)组、EX527+资癸益冲方组。流式细胞术检测细胞凋亡率,DCFH-DA法检测细胞ROS水平,Mito-Trakine荧光标记法检测细胞线粒体数量,Seahorse法检测细胞线粒体氧化磷酸化水平,比色法检测细胞ATP水平,RT-qPCR法检测细胞mtDNA拷贝数和SIRT1、PGC-1α、Nrf1、TFAM mRNA表达,Western blot法检测细胞SIRT1、PGC-1α、Ac-PGC-1α、Nrf1、TFAM蛋白表达。结果与对照组比较,ACR组KGN细胞凋亡率和ROS水平升高(P<0.05,P<0.01),线粒体数量和mtDNA拷贝数减少(P<0.01),线粒体有氧呼吸基础值、呼吸最大值、储备值和ATP水平降低(P<0.05,P<0.01),SIRT1、PGC-1α、Nrf1、TFAM mRNA及蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),Ac-PGC-1α蛋白表达升高(P<0.01);与ACR组比较,资癸益冲方组以上指标均改善(P<0.05,P<0.01)。资癸益冲方与EX527联用后,逆转了前者对KGN细胞的上述作用(P<0.05,P<0.01)。结论资癸益冲方可能通过激活SIRT1/PGC-1α信号通路增加线粒体生物合成,改善ACR诱导的KGN细胞线粒体能量代谢障碍。 展开更多
关键词 资癸益冲方 含药血清 卵巢颗粒细胞 线粒体生物合成 线粒体能量代谢 SIRT1/PGC-1α信号通路
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基于网络药理学探讨甘麦大枣汤对ADHD模型大鼠肠道炎症的影响
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作者 薛晨号 羡云倩 +4 位作者 唐丹 王嘉诚 贺亚敏 杨晶晶 高绍芳 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2024年第11期2968-2979,共12页
目的基于网络药理学、蛋白质机理和实验验证探讨甘麦大枣汤在治疗儿童注意缺陷多动障碍(Attention deficit and hyperactive disorder,ADHD)模型大鼠肠道炎症中的作用。方法从网络药理学方法筛选甘麦大枣汤对ADHD模型大鼠肠道炎症的影... 目的基于网络药理学、蛋白质机理和实验验证探讨甘麦大枣汤在治疗儿童注意缺陷多动障碍(Attention deficit and hyperactive disorder,ADHD)模型大鼠肠道炎症中的作用。方法从网络药理学方法筛选甘麦大枣汤对ADHD模型大鼠肠道炎症的影响作用的相关靶点和相关通路,并通过分子对接验证主要成分和靶点的亲和力。将40只自发性高血压大鼠(SHR)随机分为模型组、哌甲酯组和甘麦大枣汤低、中、高剂量组,每组8只,另设Wistar京都大鼠(WKY)8只为正常组。各组大鼠均每日灌胃治疗,持续3周。通过HE染色技术观察小肠病理情况,酶联免疫吸附测定法(ELISA)和蛋白质印迹法(Western blot)检测白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、原癌基因Fos(FOS)表达。结果网络药理学筛选化学成分117个,预测248个有效靶点。分子对接结果显示,异牡荆素(Isovitexin)、β-胡萝卜素(Beta-carotene)、山奈酚(Kaempferol)、木犀草素(Luteolin)、柚皮素(Naringenin)等成分与AKT1、FOS、VEGFA、TNF等靶点有较强亲和能力。动物实验结果显示甘麦大枣汤可以改善ADHD的核心症状,保护肠道正常功能和状态,下调相关IL-1β、TNF-α、FOS因子含量。结论甘麦大枣汤可以通过保护SHR大鼠肠道正常功能,下调炎症因子减轻关于其ADHD的核心症状。 展开更多
关键词 甘麦大枣汤 网络药理学 儿童注意缺陷多动障碍 肠道炎症
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益肾健脾泻浊中药对慢性肾脏病妊娠大鼠肾脏NLRP3/caspase-1/IL-1β信号通路及细胞焦亡的影响 被引量:11
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作者 冯桃花 刘文康 +7 位作者 武宁 何珍 徐贺鹏 周文平 梁文杰 许庆友 王筝 王香婷 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2021年第2期451-461,共11页
目的观察益肾健脾泻浊中药对慢性肾脏病妊娠大鼠肾脏NLRP3/caspase-1/IL-1β信号通路及细胞焦亡的影响。方法将雌性Wistar大鼠随机分为6组,分别为对照组(Sham)、对照组+妊娠组(SP)、单侧输尿管结扎组(UUO)、UUO+妊娠组(UP)、UUO+妊娠+... 目的观察益肾健脾泻浊中药对慢性肾脏病妊娠大鼠肾脏NLRP3/caspase-1/IL-1β信号通路及细胞焦亡的影响。方法将雌性Wistar大鼠随机分为6组,分别为对照组(Sham)、对照组+妊娠组(SP)、单侧输尿管结扎组(UUO)、UUO+妊娠组(UP)、UUO+妊娠+益肾健脾泻浊中药组(TCM)、UUO+妊娠+依普利酮组(EPL)。UUO各组采用结扎单侧输尿管的方法复制慢性肾病模型,治疗组分别给予依普利酮100 mg(⋅kg⋅天)^(-1)和益肾健脾泻浊方3.11 g(⋅kg⋅天)^(-1)治疗。8周后妊娠各组大鼠按动情周期与雄鼠合笼,妊娠第19天处死母鼠。检测各组肾功能,醛固酮含量,采用SABC法及Western blot法检测核因子κB(Nuclear factor-kappa B,NF-κB)、核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白3 NOD[nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3]、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白1[Caspase-1]、白介素1β(Interleukine-1 beta,IL-1β)的表达,TUNEL法检测肾细胞DNA损伤情况。结果与UUO组比较,UP组血清肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)和24 h尿蛋白及醛固酮含量较Sham组显著升高(P<0.05),治疗后,两给药组Scr、BUN、24 h尿蛋白、醛固酮显著降低(P<0.05)。与Sham组比较,SP组大鼠肾组织NF-κB、NLRP3、Caspase-1、IL-1β表达明显升高(P<0.05),TUNEL阳性细胞少量增加(P<0.05)。NLRP3炎症小体主要表达于浸润巨噬细胞及肾小管上皮细胞;Caspase-1和IL-1β主要表达于肾小管上皮细胞胞浆;TUNEL阳性细胞主要见于远端小管上皮细胞。与UUO组比较,UP组大鼠肾组织NF-κB、NLRP3、Pro-caspase-1、Caspase1、Pro-IL-1β、IL-1β指标表达也明显升高(P<0.05),TUNEL阳性细胞明显增多(P<0.05)。与UP组比较,EPL、TCM组大鼠肾组织上述指标表达明显降低(P<0.05),TUNEL阳性细胞明显减少(P<0.05)。两个给药组间各项指标无明显差异。结论益肾健脾泻浊方及依普利酮可缓解慢性肾病妊娠大鼠肾脏炎症损伤,下调肾脏NLRP3炎症小体信号通路分子表达,从而抑制细胞焦亡,减轻肾脏炎症损伤。 展开更多
关键词 益肾健脾泻浊方 NLRP3 妊娠 慢性肾脏病 细胞焦亡
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