目的:探讨萝卜硫素(Sulforaphane,SFN)对胰腺癌PANC-1细胞增殖、周期、转移和凋亡的影响及其机制。方法:将PANC-1细胞随机分为四组:对照组(sh-NC)、SFN组(sh-NC+SFN)、实验组(sh-TP53)和sh-TP53+SFN组,并制备不同浓度的SFN溶液(0、6、8...目的:探讨萝卜硫素(Sulforaphane,SFN)对胰腺癌PANC-1细胞增殖、周期、转移和凋亡的影响及其机制。方法:将PANC-1细胞随机分为四组:对照组(sh-NC)、SFN组(sh-NC+SFN)、实验组(sh-TP53)和sh-TP53+SFN组,并制备不同浓度的SFN溶液(0、6、8、10、16和20μg/mL)。细胞增殖-毒性检测(Cell counting Kit-8,CCK-8)试剂盒检测细胞存活率,划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,流式细胞术用于分析细胞周期和细胞凋亡能力,蛋白免疫印迹法(Western Blot,WB)检测凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(B-cell lymphoma 2 associated X protein,Bax)、B淋巴细胞瘤-2蛋白(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(Cysteinyl aspartate specific proteinase-9,Caspase-9),周期蛋白细胞周期蛋白依赖性激酶1(cyclin-dependent protein kinase 1,CDK1)和细胞周期蛋白B(Cyclin B),转移蛋白基质金属蛋白酶-9(Matrix metallopeptidase-9,MMP-9)和E-钙粘蛋白(E-cadherin),p53信号通路中生长停滞与DNA损伤诱导蛋白45A(growth arrest and DNA damage inducible alpha,GADD45A),细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(cyclin-dependent kinase inhibitors 1A,p21)和肿瘤蛋白p53(Tumor protein p53,TP53)的表达水平,研究SFN对细胞增殖以及p53信号通路的影响。结果:SFN以浓度依赖性的方式抑制PANC-1细胞增殖。与对照组相比,SFN处理后的PANC-1细胞增殖率显著降低(P<0.001);迁移及侵袭能力减弱(P<0.01,P<0.0001);阻滞PANC-1细胞在G2/M期(P<0.0001);同时促进细胞凋亡(P<0.0001);上调Bax、Caspase-3、Caspase-9、E-cadherin、GADD45A、p21和TP53的蛋白水平,下调Bcl-2、CDK1、Cyclin B和MMP-9的蛋白水平(P<0.05,P<0.01,P<0.001,P<0.0001)。与SFN组相比,敲低TP53能显著下调SFN抑制PANC-1细胞增殖、迁移、侵袭和阻滞在G2/M期的能力,显著下调SFN促进PANC-1细胞凋亡的能力,下调Bax、Caspase-3、Caspase-9、E-cadherin、GADD45A、p21和TP53的蛋白水平,上调Bcl-2、CDK1、Cyclin B和MMP-9的蛋白水平(P<0.05,P<0.01,P<0.001,P<0.0001)。结论:SFN抑制胰腺癌PANC-1细胞活性与激活p53信号通路相关。展开更多
文摘为解析槲皮万寿菊素、槲皮素与叶黄素单独处理以及联合处理对急性肺损伤的作用机制,以脂多糖诱导构建RAW264.7细胞炎症模型,以一氧化氮(nitric oxide,NO)相对含量为评价指标,采用联合指数法确定槲皮万寿菊素与叶黄素以及槲皮素与叶黄素的最佳复配比例;分析比较槲皮万寿菊素、槲皮素与叶黄素单独及联合处理对RAW264.7细胞中炎症因子(肿瘤坏死因子-α、白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6)含量、丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性以及谷胱甘肽过氧化物酶活性的影响;采用免疫印迹法测定核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路中p65、p50以及沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)、核因子E2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2 related factor 2,Nrf2)和NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)的相对表达量。结果表明,槲皮万寿菊素与叶黄素高剂量3∶1(30μg/mL+10μg/mL)复配能够最大程度降低RAW264.7细胞中的NO相对含量。二者单独及联合作用均能通过降低炎症因子、丙二醛含量,提高超氧化物歧化酶和谷胱甘肽还原酶活性,下调NF-κB p65、p50以及NLRP3表达水平并上调SIRT1、Nrf2蛋白相对表达量发挥改善急性肺损伤的作用,且联合处理效果优于单独处理组。
文摘目的:探讨萝卜硫素(Sulforaphane,SFN)对胰腺癌PANC-1细胞增殖、周期、转移和凋亡的影响及其机制。方法:将PANC-1细胞随机分为四组:对照组(sh-NC)、SFN组(sh-NC+SFN)、实验组(sh-TP53)和sh-TP53+SFN组,并制备不同浓度的SFN溶液(0、6、8、10、16和20μg/mL)。细胞增殖-毒性检测(Cell counting Kit-8,CCK-8)试剂盒检测细胞存活率,划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,流式细胞术用于分析细胞周期和细胞凋亡能力,蛋白免疫印迹法(Western Blot,WB)检测凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(B-cell lymphoma 2 associated X protein,Bax)、B淋巴细胞瘤-2蛋白(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(Cysteinyl aspartate specific proteinase-9,Caspase-9),周期蛋白细胞周期蛋白依赖性激酶1(cyclin-dependent protein kinase 1,CDK1)和细胞周期蛋白B(Cyclin B),转移蛋白基质金属蛋白酶-9(Matrix metallopeptidase-9,MMP-9)和E-钙粘蛋白(E-cadherin),p53信号通路中生长停滞与DNA损伤诱导蛋白45A(growth arrest and DNA damage inducible alpha,GADD45A),细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(cyclin-dependent kinase inhibitors 1A,p21)和肿瘤蛋白p53(Tumor protein p53,TP53)的表达水平,研究SFN对细胞增殖以及p53信号通路的影响。结果:SFN以浓度依赖性的方式抑制PANC-1细胞增殖。与对照组相比,SFN处理后的PANC-1细胞增殖率显著降低(P<0.001);迁移及侵袭能力减弱(P<0.01,P<0.0001);阻滞PANC-1细胞在G2/M期(P<0.0001);同时促进细胞凋亡(P<0.0001);上调Bax、Caspase-3、Caspase-9、E-cadherin、GADD45A、p21和TP53的蛋白水平,下调Bcl-2、CDK1、Cyclin B和MMP-9的蛋白水平(P<0.05,P<0.01,P<0.001,P<0.0001)。与SFN组相比,敲低TP53能显著下调SFN抑制PANC-1细胞增殖、迁移、侵袭和阻滞在G2/M期的能力,显著下调SFN促进PANC-1细胞凋亡的能力,下调Bax、Caspase-3、Caspase-9、E-cadherin、GADD45A、p21和TP53的蛋白水平,上调Bcl-2、CDK1、Cyclin B和MMP-9的蛋白水平(P<0.05,P<0.01,P<0.001,P<0.0001)。结论:SFN抑制胰腺癌PANC-1细胞活性与激活p53信号通路相关。
