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补肾中药通过AMPK-mTOR通路提高肾精亏虚大鼠睾丸间质细胞自噬能力
1
作者 李朝英 李思睿 +4 位作者 张伟 马昊飞 牛双 段豫磊 牛嗣云 《河北大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2024年第6期633-642,共10页
为了探究补肾中药提高肾精亏虚大鼠睾丸间质细胞自噬能力的机制,采用单因素电刺激法建立肾精亏虚大鼠模型,免疫组化及Western blot检测各组睾丸细胞自噬标志蛋白Beclin1、p62、LC3B表达水平以及AMPK和mTOR表达变化.基于肾精亏虚与衰老... 为了探究补肾中药提高肾精亏虚大鼠睾丸间质细胞自噬能力的机制,采用单因素电刺激法建立肾精亏虚大鼠模型,免疫组化及Western blot检测各组睾丸细胞自噬标志蛋白Beclin1、p62、LC3B表达水平以及AMPK和mTOR表达变化.基于肾精亏虚与衰老的密切联系,通过自由基氧化损伤法建立睾丸间质细胞(Leydig细胞)衰老模型,联合AMPK抑制剂,探究何首乌饮激活细胞自噬的分子机制.结果显示:何首乌饮可上调睾丸组织Beclin1蛋白、LC3B表达,下调p62蛋白表达,促进AMPK磷酸化并抑制mTOR激活(P<0.05);细胞实验表明,何首乌饮可通过激活AMPK-mTOR信号通路提高Leydig细胞自噬能力(P<0.05),促进肾精亏虚大鼠睾丸Leydig细胞自噬进程. 展开更多
关键词 何首乌饮 肾精亏虚 睾丸组织 自噬 AMPK-mTOR
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二苯乙烯苷调控胰岛素/IGF-1信号通路延缓大鼠睾丸间质细胞衰老的作用机制 被引量：6
2
作者 李少华 姜丽萍 +3 位作者 牛佳瑶 王乐 牛嗣云 齐峰 《河北大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2021年第3期297-303,共7页
采用自由基损伤的方法建立大鼠睾丸间质细胞衰老模型,用流式细胞术检测各组细胞周期的变化;应用RT-qPCR、免疫荧光和Western blot技术检测睾丸间质细胞胰岛素/IGF-1信号传导通路关键基因的表达水平.结果显示:与正常组相比,衰老组β-半... 采用自由基损伤的方法建立大鼠睾丸间质细胞衰老模型,用流式细胞术检测各组细胞周期的变化;应用RT-qPCR、免疫荧光和Western blot技术检测睾丸间质细胞胰岛素/IGF-1信号传导通路关键基因的表达水平.结果显示:与正常组相比,衰老组β-半乳糖苷酶阳性细胞率可达60%以上(P<0.05),G1期所占比重明显增加,S期所占比重明显减少(P<0.05).胰岛素/IGF-1信号传导通路关键基因表达变化:IRS1、IGF-1、IRS2、INSR在衰老组的表达水平明显低于正常组(P<0.05),IGFBP3在衰老组的mRNA表达水平明显高于正常组(P<0.05),二苯乙烯苷可逆转上述现象,上调IGF-1、INSR、IRS1、IRS2表达,下调IGFBP3的mRNA表达.结果表明二苯乙烯苷通过调控胰岛素/IGF-1信号传导通路延缓睾丸间质细胞衰老. 展开更多
关键词 二苯乙烯苷 睾丸间质细胞 延缓衰老 胰岛素/IGF-1信号传导通路 大鼠
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齐墩果酸对衰老大鼠睾丸间质细胞胰岛素/IGF1通路关键基因表达的影响 被引量：3
3
作者 李少华 牛双 +2 位作者 董子怡 宋邑诚 牛嗣云 《河北大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2022年第4期403-410,共8页
为了探讨齐墩果酸对衰老大鼠睾丸间质细胞的作用,采用MTT法确定齐墩果酸最适药物浓度,氧化应激创建大鼠睾丸间质细胞衰老模型,RT-qPCR、免疫荧光和免疫印迹检测胰岛素/胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor 1,IGF1)信号通路关... 为了探讨齐墩果酸对衰老大鼠睾丸间质细胞的作用,采用MTT法确定齐墩果酸最适药物浓度,氧化应激创建大鼠睾丸间质细胞衰老模型,RT-qPCR、免疫荧光和免疫印迹检测胰岛素/胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor 1,IGF1)信号通路关键基因转录情况和蛋白翻译情况,采用INSR抑制剂处理细胞,流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果显示:与正常组相比,INSR、IRS1、IRS2、IGF1的mRNA转录水平和蛋白翻译水平显著下降(P<0.05);IGFBP3的mRNA转录水平显著提高(P<0.05),免疫荧光和免疫印迹均未检测到此基因表达;与衰老组相比,齐墩果酸组明显逆转此现象(P<0.05);齐墩果酸能明显抑制衰老组细胞的凋亡(P<0.05),INSR抑制剂处理后,细胞凋亡率明显高于齐墩果酸组(P<0.05).综上可知,齐墩果酸通过调控胰岛素/IGF1信号通路关键基因的转录和翻译延缓Leydig细胞衰老. 展开更多
关键词 齐墩果酸 胰岛素/IGF1 衰老 睾丸间质细胞 RT-QPCR
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