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1型糖尿病、2型糖尿病及2型糖尿病伴动脉硬化患者外周血白细胞端粒长度的研究 被引量:11
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作者 王建飞 董旭 +7 位作者 张毅 曹丽 曹若琼 孙阳阳 王建国 钟理 王君 边志颖 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1066-1070,共5页
目的:检测1型糖尿病(T1DM)、2型糖尿病(T2DM)、2型糖尿病伴动脉硬化(DAS)患者外周血白细胞端粒长度,分析糖尿病患者端粒长度变化的因素。方法:选择T1DM患者30例、T2DM患者60例、DAS患者40例和健康对照(NC组)40例,分别提取外周血白细胞,... 目的:检测1型糖尿病(T1DM)、2型糖尿病(T2DM)、2型糖尿病伴动脉硬化(DAS)患者外周血白细胞端粒长度,分析糖尿病患者端粒长度变化的因素。方法:选择T1DM患者30例、T2DM患者60例、DAS患者40例和健康对照(NC组)40例,分别提取外周血白细胞,然后提取基因组DNA进行real-time PCR检测端粒长度。利用多元线性回归分析影响端粒长度变化的因素。结果:T1DM组、T2DM组和DAS组的端粒长度均小于NC组(P<0.05);T1DM组端粒长度短于T2DM组和DAS组;DAS组较T2DM组更短。多元线性回归分析显示,T1DM组中,年龄与端粒长度呈负相关(P<0.05);T2DM组中,年龄、体重指数(BMI)与端粒长度呈负相关(P<0.05);DAS组中,患病时间、BMI与端粒长度呈负相关(P<0.05)。结论:糖尿病患者的外周血白细胞端粒长度明显短于正常人,并且T1DM患者端粒长度短于T2DM;在2型糖尿病的对比中,DAS患者的端粒长度明显短于T2DM。患者的年龄、患病时间、BMI与端粒长度的缩短有密切的关系。 展开更多
关键词 端粒长度 糖尿病 动脉硬化
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肺癌个体化治疗的现状及展望 被引量:13
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作者 李昊 钟理 +1 位作者 丁浩 沈志高 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期196-199,共4页
肺癌是人类最常见的恶性肿瘤之一,其发病率和病死率近年呈上升趋势。肿瘤的临床医学经历了经验治疗、循证医学规范化治疗,目前正在向个体化治疗模式迈进。该文将对肺癌的个体化治疗现状作一综述,并展望肺癌的个体化治疗趋势。
关键词 肺癌 分子标志物 个体化 治疗 文献综述
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干扰素膜蛋白Tet-on系统稳定细胞系的建立及对CA16病毒的抑制作用 被引量:4
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作者 张磊 钟理 +1 位作者 张玮 武智勇 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期489-495,共7页
通过Tet-on调控系统,构建受多西环素诱导表达干扰素诱导的跨膜蛋白(interferon-induced transmembrane proteins 1/2/3,IFITM1/2/3)基因的HeLa细胞系,并初步探索了IFITM蛋白对柯萨奇病毒A16(CA16)的抑制作用.首先将调控质粒pTet-on转染... 通过Tet-on调控系统,构建受多西环素诱导表达干扰素诱导的跨膜蛋白(interferon-induced transmembrane proteins 1/2/3,IFITM1/2/3)基因的HeLa细胞系,并初步探索了IFITM蛋白对柯萨奇病毒A16(CA16)的抑制作用.首先将调控质粒pTet-on转染进入HeLa细胞,通过G418筛选出阳性克隆细胞系,在此细胞系基础上共同转染反应质粒pTRE2-IFITM1/2/3和伴侣质粒pTK-Hyg,通过潮霉素筛选出单克隆细胞系,加入多西环素后利用Western印迹筛选出可诱导表达IFITM1/2/3蛋白的单克隆细胞系.使用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测发现,多西环素诱导表达的IFITM蛋白对不同感染复数(multiplicity of infection,MOI)的CA16具有明显的抑制作用,其中IFITM 3对CA16的抑制效果最为明显.Tet调控IFITM1/2/3基因表达HeLa细胞系的成功建立,为进一步研究IFITM基因的功能及其抗病毒机理提供了一个理想的细胞模型. 展开更多
关键词 干扰素诱导膜蛋白 细胞系 柯萨奇病毒A16
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血浆中多基因联合甲基化检测在肺癌诊断中的应用 被引量:2
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作者 丁浩 沈志高 +4 位作者 李昊 邱宇 郝晓宁 祖金池 钟理 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期2128-2134,共7页
目的:探究血浆中CDH13、RASSF13A、DLEC13、SEPT13、RUNX13等抑癌基因启动子甲基化及其联合检测在肺癌诊断中的价值。从中选出诊断效能高的组合。方法:采用巢式甲基化特异性PCR(nest methylation specific PCR,n MSP)法,检测106例健康... 目的:探究血浆中CDH13、RASSF13A、DLEC13、SEPT13、RUNX13等抑癌基因启动子甲基化及其联合检测在肺癌诊断中的价值。从中选出诊断效能高的组合。方法:采用巢式甲基化特异性PCR(nest methylation specific PCR,n MSP)法,检测106例健康人血浆样本、106例肺癌组织和癌旁组织以及其对应的106例术前血浆样本、中基因启动子区的甲基化状态。对血浆基因组DNA修饰后进行多重置换扩增(multiple displacement amplification,MDA),以解决血浆DNA模板不足的问题。结果:肺癌组织样本中的CDH13、RASSF13A、DLEC13、SEPT13、RUNX13基因启动子甲基化率分别为51.9%、44.3%、54.7%、36.8%、24.5%。对应的血浆样本中的CDH13、RASSF1A、DLEC1、SEPT9、RUNX3基因启动子甲基化率分别为46.2%、41.5%、50.9%、31.1%、19.8%。Kappa一致性检验结果表明肺癌组织与血浆的甲基化检出率一致。CDH13、DLEC1、RASSF1A、SEPT9组合对肺癌的诊断效能明显高于其它组,准确度ACC为82.08%,Youden指数为0.6415(灵敏度为79.49%,特异度为81.13%)。结论:血浆多基因联合甲基化检测有望应用于肺癌早期诊断。 展开更多
关键词 肺肿瘤 血浆 组织 甲基化
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应用改进的多聚组氨酸标签T7表达载体构建肺癌cDNA文库 被引量:1
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作者 董晓民 钟理 +1 位作者 樊江平 张旭朏 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期475-481,共7页
应用噬菌体C端展示系统构建的cDNA文库缺乏开放阅读框筛选机制,文库中多数噬菌体克隆展示框外非天然短肽,给后期蛋白质的筛选带来了不便.为实现噬菌体的ORF筛选功能,利用PCR技术对已有载体T7Select10-3b进行改造,在MCS处外源cDNA插入位... 应用噬菌体C端展示系统构建的cDNA文库缺乏开放阅读框筛选机制,文库中多数噬菌体克隆展示框外非天然短肽,给后期蛋白质的筛选带来了不便.为实现噬菌体的ORF筛选功能,利用PCR技术对已有载体T7Select10-3b进行改造,在MCS处外源cDNA插入位点的3'端引入6聚组氨酸筛选标签,经包装后挑取成功表达的单克隆构建肺癌cDNA文库.经镍柱亲和层析后,收集文库中表达组氨酸的克隆,利用化学发光免疫试验进行筛选效果鉴定.结果显示,改造的新型载体可成功表达组氨酸标签,以此构建的肺癌cDNA文库经筛选后,含ORF插入的克隆由筛前的6%提高至70%,本研究为提高cDNA文库的质量提供了一种简便可行的方法. 展开更多
关键词 组氨酸标签 T7噬菌体展示文库 开放阅读框
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