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生物转化L-脯氨酸生成反式-4-羟基-L-脯氨酸的定量分析方法
被引量：
2
1
作者
张红蕾
徐志栋
+4 位作者
李玮
杨瑜涛
杜洁
韩孟楠
王烁康
《分析测试学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第9期1181-1184,共4页
以芴甲氧羰酰氯（FMOC-Cl）为柱前衍生剂，四硼酸钠为缓冲溶液，建立了一种柱前衍生反相高效液相色谱（RP-HPLC）测定微生物转化L-脯氨酸生成反式-4-羟基-L-脯氨酸的定量分析方法。优化了衍生反应条件，当衍生反应体系中水和乙腈的比例...
以芴甲氧羰酰氯（FMOC-Cl）为柱前衍生剂，四硼酸钠为缓冲溶液，建立了一种柱前衍生反相高效液相色谱（RP-HPLC）测定微生物转化L-脯氨酸生成反式-4-羟基-L-脯氨酸的定量分析方法。优化了衍生反应条件，当衍生反应体系中水和乙腈的比例为66∶34，pH值为9.9时衍生效果最佳。采用Agilent Extend C-18柱进行分离，以0.1%三氟乙酸水溶液和乙腈作为流动相，梯度洗脱，检测波长263 nm。L-脯氨酸和反式-4-羟基-L-脯氨酸均在0.01~500 mg/mL范围内线性关系良好，相关系数均大于0.999，检出限为5.00~7.00 ng/L，不同浓度下的平均回收率分别为98.9%~102%和97.9%~100%。该方法重现性好，精密度高，为定量分析微生物发酵液中的L-脯氨酸和反式-4-羟基-L-脯氨酸提供了有效方法。
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关键词
柱前衍生
反相高效液相色谱
反式-4-羟基-L-脯氨酸
L-脯氨酸
微生物转化
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职称材料
乳糖诱导脯氨酸羟化酶高效表达研究
被引量：
1
2
作者
马乐辉
李存会
《煤炭与化工》
CAS
2018年第7期130-134,160,共6页
研究了乳糖诱导重组大肠杆菌表达脯氨酸羟化酶与L-脯氨酸生物转化。结果表明,将种子液按1%的比例接种于含有0.8%乳糖发酵培养基中,在28℃、140 r/m条件下,培养约2 h,在分光光度计波长为600 nm,OD值为0.6~0.8条件下,再诱导培养13 h,离心...
研究了乳糖诱导重组大肠杆菌表达脯氨酸羟化酶与L-脯氨酸生物转化。结果表明,将种子液按1%的比例接种于含有0.8%乳糖发酵培养基中,在28℃、140 r/m条件下,培养约2 h,在分光光度计波长为600 nm,OD值为0.6~0.8条件下,再诱导培养13 h,离心收集菌体,按质量体积比1 g∶100 m L(菌体量∶转化液)向菌体中加入转化液,在28℃条件下能高效进行L-脯氨酸转化生成L-羟脯氨酸,转化率达到98.6%。本研究为L-脯氨酸生物转化实现工业化生产奠定了基础。
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关键词
乳糖
脯氨酸羟化酶
诱导
转化率
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职称材料
题名
生物转化L-脯氨酸生成反式-4-羟基-L-脯氨酸的定量分析方法
被引量：
2
1
作者
张红蕾
徐志栋
李玮
杨瑜涛
杜洁
韩孟楠
王烁康
机构
河北
大学化学与环境科学学院
河北博伦特药业有限公司
出处
《分析测试学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第9期1181-1184,共4页
基金
2014年河北省高等学校高层次人才科学研究项目(GCC 2014013)
国家国际科技合作专项项目(2013DFB30190)
文摘
以芴甲氧羰酰氯（FMOC-Cl）为柱前衍生剂，四硼酸钠为缓冲溶液，建立了一种柱前衍生反相高效液相色谱（RP-HPLC）测定微生物转化L-脯氨酸生成反式-4-羟基-L-脯氨酸的定量分析方法。优化了衍生反应条件，当衍生反应体系中水和乙腈的比例为66∶34，pH值为9.9时衍生效果最佳。采用Agilent Extend C-18柱进行分离，以0.1%三氟乙酸水溶液和乙腈作为流动相，梯度洗脱，检测波长263 nm。L-脯氨酸和反式-4-羟基-L-脯氨酸均在0.01~500 mg/mL范围内线性关系良好，相关系数均大于0.999，检出限为5.00~7.00 ng/L，不同浓度下的平均回收率分别为98.9%~102%和97.9%~100%。该方法重现性好，精密度高，为定量分析微生物发酵液中的L-脯氨酸和反式-4-羟基-L-脯氨酸提供了有效方法。
关键词
柱前衍生
反相高效液相色谱
反式-4-羟基-L-脯氨酸
L-脯氨酸
微生物转化
Keywords
pre-column derivation
RP-HPLC
trans-4-hydroxy-L-proline
L-proline
microbial conversion
分类号
O657.72 [理学—分析化学]
O629.71 [理学—有机化学]
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职称材料
题名
乳糖诱导脯氨酸羟化酶高效表达研究
被引量：
1
2
作者
马乐辉
李存会
机构
河北博伦特药业有限公司
出处
《煤炭与化工》
CAS
2018年第7期130-134,160,共6页
文摘
研究了乳糖诱导重组大肠杆菌表达脯氨酸羟化酶与L-脯氨酸生物转化。结果表明,将种子液按1%的比例接种于含有0.8%乳糖发酵培养基中,在28℃、140 r/m条件下,培养约2 h,在分光光度计波长为600 nm,OD值为0.6~0.8条件下,再诱导培养13 h,离心收集菌体,按质量体积比1 g∶100 m L(菌体量∶转化液)向菌体中加入转化液,在28℃条件下能高效进行L-脯氨酸转化生成L-羟脯氨酸,转化率达到98.6%。本研究为L-脯氨酸生物转化实现工业化生产奠定了基础。
关键词
乳糖
脯氨酸羟化酶
诱导
转化率
Keywords
lactose
proline hydroxylase
induction
transformation rate
分类号
R977.3 [医药卫生—药品]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
生物转化L-脯氨酸生成反式-4-羟基-L-脯氨酸的定量分析方法
张红蕾
徐志栋
李玮
杨瑜涛
杜洁
韩孟楠
王烁康
《分析测试学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
2
在线阅读
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职称材料
2
乳糖诱导脯氨酸羟化酶高效表达研究
马乐辉
李存会
《煤炭与化工》
CAS
2018
1
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职称材料
已选择
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引证文献
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