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TGF-β1调控Cdk5表达在人肾系膜细胞外基质沉积中的作用
被引量：
2
1
作者
周毅
杨亚坤
+4 位作者
康平
柳丹
夏顺杰
张悦
刘巍
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第12期1688-1693,共6页
目的研究TGF-β1调控Cdk5表达在人肾系膜细胞外基质沉积中的作用。方法10μg·L^(-1)的TGF-β1刺激体外培养的人肾小球系膜细胞(HMC),检测其对系膜细胞Cdk5、p35/p25表达的影响;转染Cdk5过表达质粒,Western blot、免疫荧光检测胶原...
目的研究TGF-β1调控Cdk5表达在人肾系膜细胞外基质沉积中的作用。方法10μg·L^(-1)的TGF-β1刺激体外培养的人肾小球系膜细胞(HMC),检测其对系膜细胞Cdk5、p35/p25表达的影响;转染Cdk5过表达质粒,Western blot、免疫荧光检测胶原蛋白FN、CollagenⅣ表达的变化;应用Cdk5激酶活性抑制剂Roscovitine或转染Cdk5干扰质粒,Western blot、Real time-PCR、免疫荧光检测抑制Cdk5对TGF-β1刺激HMC后FN、CollagenⅣ蛋白及mRNA表达的影响。结果TGF-β1作用于HMC后,Cdk5、p35/p25蛋白及mRNA表达均呈时间依赖性增高;与正常对照组相比,转染Cdk5过表达质粒,FN、CollagenⅣ蛋白表达增加,FN(绿色荧光)、CollagenⅣ(红色荧光)增强;与TGF-β1刺激组相比,加用10μmol·L^(-1)的Roscovitine或转染Cdk5干扰质粒,FN、CollagenⅣ蛋白及mRNA表达均减少,FN(绿色荧光)、CollagenⅣ(红色荧光)减弱,而空质粒转染组没有明显变化。结论一定浓度的TGF-β1可诱导系膜细胞内Cdk5表达增加,抑制Cdk5可降低系膜细胞外基质沉积。
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关键词
TGF-Β1
CDK5
系膜细胞
肾纤维化
基质沉积
ROSCOVITINE
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职称材料
促肾上腺皮质激素释放激素受体1拮抗剂CP154526对大鼠海马神经元凋亡的影响
被引量：
2
2
作者
周毅
刘巍
张悦
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第4期504-509,共6页
目的观察促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)受体1拮抗剂CP154526对海马神经元凋亡的影响。方法原代培养大鼠海马神经元,噻唑蓝(MTT)法测定细胞存活率,然后分为4组:正常对照组(Con)、CRH刺激组(CRH)、CRH和CP154526共同刺激组(CRH+CP)、CP15...
目的观察促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)受体1拮抗剂CP154526对海马神经元凋亡的影响。方法原代培养大鼠海马神经元,噻唑蓝(MTT)法测定细胞存活率,然后分为4组:正常对照组(Con)、CRH刺激组(CRH)、CRH和CP154526共同刺激组(CRH+CP)、CP154526刺激组(CP)。TUNEL、流式细胞术AnnexinⅤ-PI法检测神经元凋亡率;Western blot检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2、caspase-3表达水平。结果 10-8mol·L-1的CRH作用于海马神经元后,细胞存活率下降(P<0.05);50 mmol·L-1的CP154526可明显提升神经元存活率(P<0.05)。与正常对照组相比,CRH刺激后神经元凋亡率增加,Bax/Bcl-2比值增高,caspase-3表达增加;加用CP154526可明显降低神经元凋亡率、Bax/Bcl-2比值及caspase-3表达水平;而单独应用CP154526对凋亡没有明显影响。结论一定浓度的CRH可诱导海马神经元细胞凋亡,其受体1拮抗剂CP154526可有效减轻细胞凋亡,发挥神经保护作用。
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关键词
促肾上腺皮质激素释放激素
CP154526
海马
神经元
凋亡
原代培养
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职称材料
糖皮质激素诱导大鼠原代培养杏仁核神经元的凋亡
被引量：
3
3
作者
许光明
张晓静
+3 位作者
刘艺
张悦
文迪
丛斌
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第12期1688-1694,共7页
目的探讨糖皮质激素(GC)对大鼠杏仁核神经元凋亡的影响。方法原代培养大鼠杏仁核神经元,首先采用免疫荧光技术对培养的原代神经元及其是否存在丰富的糖皮质激素受体分别进行了鉴定,并用流式细胞术检测不同浓度的人工合成糖皮质激素地塞...
目的探讨糖皮质激素(GC)对大鼠杏仁核神经元凋亡的影响。方法原代培养大鼠杏仁核神经元,首先采用免疫荧光技术对培养的原代神经元及其是否存在丰富的糖皮质激素受体分别进行了鉴定,并用流式细胞术检测不同浓度的人工合成糖皮质激素地塞米松(10^(-9)~10^(-6)mol·L^(-1))对杏仁核神经元细胞凋亡的影响。然后将实验分为4组:对照组(CON)、地塞米松(DEX)刺激组、地塞米松和米非司酮(受体抑制剂)共同刺激组(DEX+MIF)、米非司酮刺激组(MIF)。用TUNEL原位技术检测各组的凋亡情况,并用RTPCR技术检测各组Bax mRNA的表达变化。结果 (1)与CON组相比,不同浓度的DEX作用于神经元后,神经元凋亡率明显升高(P<0.05),且呈浓度依赖性;(2)TUNEL染色结果显示,DEX组细胞凋亡率明显高于CON组(P<0.05),而与DEX组相比,DEX+MIF组凋亡率明显降低(P<0.05),MIF组与CON组相比无明显差异(P>0.05);(3)与CON组相比,DEX组Bax mRNA的表达量明显升高(P<0.05),而与DEX组相比,DEX+MIF组的Bax mRNA的表达量明显降低(P<0.05),MIF组与CON组相比无明显差异(P>0.05)。结论糖皮质激素可以通过其受体诱导大鼠原代培养杏仁核神经元的凋亡。
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关键词
应激
糖皮质激素
杏仁核
神经元
凋亡
原代培养
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职称材料
题名
TGF-β1调控Cdk5表达在人肾系膜细胞外基质沉积中的作用
被引量：
2
1
作者
周毅
杨亚坤
康平
柳丹
夏顺杰
张悦
刘巍
机构
河北医科大学
第二医院
河北医科大学
病理
学
教研室
河北医科大学诊断学教研室
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第12期1688-1693,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(No 81770720)
河北省自然科学基金杰出青年科学基金(No H2019206550)
+1 种基金
河北省自然科学基金面上项目(No H2019206549)
河北省科技厅重点研发计划项目(No 19277784D)。
文摘
目的研究TGF-β1调控Cdk5表达在人肾系膜细胞外基质沉积中的作用。方法10μg·L^(-1)的TGF-β1刺激体外培养的人肾小球系膜细胞(HMC),检测其对系膜细胞Cdk5、p35/p25表达的影响;转染Cdk5过表达质粒,Western blot、免疫荧光检测胶原蛋白FN、CollagenⅣ表达的变化;应用Cdk5激酶活性抑制剂Roscovitine或转染Cdk5干扰质粒,Western blot、Real time-PCR、免疫荧光检测抑制Cdk5对TGF-β1刺激HMC后FN、CollagenⅣ蛋白及mRNA表达的影响。结果TGF-β1作用于HMC后,Cdk5、p35/p25蛋白及mRNA表达均呈时间依赖性增高;与正常对照组相比,转染Cdk5过表达质粒,FN、CollagenⅣ蛋白表达增加,FN(绿色荧光)、CollagenⅣ(红色荧光)增强;与TGF-β1刺激组相比,加用10μmol·L^(-1)的Roscovitine或转染Cdk5干扰质粒,FN、CollagenⅣ蛋白及mRNA表达均减少,FN(绿色荧光)、CollagenⅣ(红色荧光)减弱,而空质粒转染组没有明显变化。结论一定浓度的TGF-β1可诱导系膜细胞内Cdk5表达增加,抑制Cdk5可降低系膜细胞外基质沉积。
关键词
TGF-Β1
CDK5
系膜细胞
肾纤维化
基质沉积
ROSCOVITINE
Keywords
TGF-β1
Cdk5
mesangial cells
renal fibrosis
matrix deposition
Roscovitine
分类号
R322.61 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
R329.24 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
促肾上腺皮质激素释放激素受体1拮抗剂CP154526对大鼠海马神经元凋亡的影响
被引量：
2
2
作者
周毅
刘巍
张悦
机构
河北医科大学
第二医院神经内科
河北医科大学
病理
学
教研室
河北医科大学
临床
诊断
学
教研室
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第4期504-509,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(No 81302625)
河北省高等学校科学技术研究优秀青年基金项目(No Y2012001)
文摘
目的观察促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)受体1拮抗剂CP154526对海马神经元凋亡的影响。方法原代培养大鼠海马神经元,噻唑蓝(MTT)法测定细胞存活率,然后分为4组:正常对照组(Con)、CRH刺激组(CRH)、CRH和CP154526共同刺激组(CRH+CP)、CP154526刺激组(CP)。TUNEL、流式细胞术AnnexinⅤ-PI法检测神经元凋亡率;Western blot检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2、caspase-3表达水平。结果 10-8mol·L-1的CRH作用于海马神经元后,细胞存活率下降(P<0.05);50 mmol·L-1的CP154526可明显提升神经元存活率(P<0.05)。与正常对照组相比,CRH刺激后神经元凋亡率增加,Bax/Bcl-2比值增高,caspase-3表达增加;加用CP154526可明显降低神经元凋亡率、Bax/Bcl-2比值及caspase-3表达水平;而单独应用CP154526对凋亡没有明显影响。结论一定浓度的CRH可诱导海马神经元细胞凋亡,其受体1拮抗剂CP154526可有效减轻细胞凋亡,发挥神经保护作用。
关键词
促肾上腺皮质激素释放激素
CP154526
海马
神经元
凋亡
原代培养
Keywords
CRH
CP154526
hippocampus
neu-ron
apoptosis
primary culture
分类号
R714.21 [医药卫生—妇产科学]
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职称材料
题名
糖皮质激素诱导大鼠原代培养杏仁核神经元的凋亡
被引量：
3
3
作者
许光明
张晓静
刘艺
张悦
文迪
丛斌
机构
河北医科大学
基础医
学
院法医
学
系
河北医科大学
临床
诊断
学
教研室
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第12期1688-1694,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(No 81430047)
文摘
目的探讨糖皮质激素(GC)对大鼠杏仁核神经元凋亡的影响。方法原代培养大鼠杏仁核神经元,首先采用免疫荧光技术对培养的原代神经元及其是否存在丰富的糖皮质激素受体分别进行了鉴定,并用流式细胞术检测不同浓度的人工合成糖皮质激素地塞米松(10^(-9)~10^(-6)mol·L^(-1))对杏仁核神经元细胞凋亡的影响。然后将实验分为4组:对照组(CON)、地塞米松(DEX)刺激组、地塞米松和米非司酮(受体抑制剂)共同刺激组(DEX+MIF)、米非司酮刺激组(MIF)。用TUNEL原位技术检测各组的凋亡情况,并用RTPCR技术检测各组Bax mRNA的表达变化。结果 (1)与CON组相比,不同浓度的DEX作用于神经元后,神经元凋亡率明显升高(P<0.05),且呈浓度依赖性;(2)TUNEL染色结果显示,DEX组细胞凋亡率明显高于CON组(P<0.05),而与DEX组相比,DEX+MIF组凋亡率明显降低(P<0.05),MIF组与CON组相比无明显差异(P>0.05);(3)与CON组相比,DEX组Bax mRNA的表达量明显升高(P<0.05),而与DEX组相比,DEX+MIF组的Bax mRNA的表达量明显降低(P<0.05),MIF组与CON组相比无明显差异(P>0.05)。结论糖皮质激素可以通过其受体诱导大鼠原代培养杏仁核神经元的凋亡。
关键词
应激
糖皮质激素
杏仁核
神经元
凋亡
原代培养
Keywords
stress
glucocorticoid
amygdala
neuron
apoptosis
primary culture
分类号
R-332 [医药卫生]
R322.81 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
TGF-β1调控Cdk5表达在人肾系膜细胞外基质沉积中的作用
周毅
杨亚坤
康平
柳丹
夏顺杰
张悦
刘巍
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2021
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
促肾上腺皮质激素释放激素受体1拮抗剂CP154526对大鼠海马神经元凋亡的影响
周毅
刘巍
张悦
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
糖皮质激素诱导大鼠原代培养杏仁核神经元的凋亡
许光明
张晓静
刘艺
张悦
文迪
丛斌
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
3
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职称材料
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