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千层纸素A通过PI3K/AKT信号通路诱导子宫内膜癌Ishikawa细胞株凋亡
1
作者 赵焕焕 焦煜茜 +9 位作者 乔若琪 白雪 王娜 田芸婕 范文玲 李利 苏素文 付炎 张辉 杨红芳 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第3期555-560,共6页
目的研究千层纸素A(oroxylin A,OA)对子宫内膜癌(endometrial cancer,EC)Ishikawa细胞凋亡的影响及其机制。方法用不同浓度的OA(0、4、8、10、12、20 mol·L^(-1))处理Ishikawa细胞,CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,Wes... 目的研究千层纸素A(oroxylin A,OA)对子宫内膜癌(endometrial cancer,EC)Ishikawa细胞凋亡的影响及其机制。方法用不同浓度的OA(0、4、8、10、12、20 mol·L^(-1))处理Ishikawa细胞,CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot技术检测B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、与Bcl-2同源的水溶性相关蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)、PI3K/AKT、细胞色素P450家族成员1B1(recombinant cytochrome P4501B1,CYP1B1)、儿茶酚-O-甲基转移酶(catechol-O-methyltransferase,COMT)相关蛋白的表达水平。结果OA以剂量和时间依赖性方式抑制Ishikawa细胞的增殖;与空白对照组相比,随着OA浓度的升高,Bax蛋白表达明显增加,Bcl-2蛋白表达明显下降,COMT蛋白表达明显增加,CYP1B1蛋白表达明显下降。PI3K/AKT:补充IGF-1(PI3K激动剂)后出现逆转作用,COMT蛋白表达明显下降,CYP1B1蛋白表达明显增加。结论OA可抑制Ishikawa细胞的增殖,其机制与抑制P13K/AKT信号通路介导的凋亡有关。 展开更多
关键词 子宫内膜癌Ishikawa细胞 千层纸素A 凋亡 P13K/AKT CYP1B1 COMT
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动态观察不同的药理性阻断剂对膜磷脂PtdIns(4,5)P_2的代谢过程的影响特征 被引量：1
2
作者 王川 贾庆忠 +1 位作者 杜肖娜 张海林 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期27-32,共6页
目的　时空观察PtdIns(4, 5)P2 在细胞内水解及再合成的动态变化过程,并比较渥曼青霉素 (wortmannin)、氯化锂(LiCl)、U73122和新霉素四种阻断剂对PtdIns(4, 5)P2 代谢过程的影响。方法　利用绿色荧光蛋白 (GFP)与磷脂酶Cδ1 (PLCδ1 )P... 目的　时空观察PtdIns(4, 5)P2 在细胞内水解及再合成的动态变化过程,并比较渥曼青霉素 (wortmannin)、氯化锂(LiCl)、U73122和新霉素四种阻断剂对PtdIns(4, 5)P2 代谢过程的影响。方法　利用绿色荧光蛋白 (GFP)与磷脂酶Cδ1 (PLCδ1 )PH区 (PLCδ1PH)的融合体 (PLCδ1PH GFP)作为标记PtdIns(4, 5)P2 的特异性荧光探针,使用激光扫描共聚焦显微镜技术动态观察及测量PtdIns( 4, 5 )P2 位置的变化。结果　在CHO细胞,用ATP刺激内源性表达的P2Y受体,可引起PLCδ1PH GFP荧光转位可恢复性的变化;渥曼青霉素和LiCl不影响PLC激活所介导的PLCδ1PH GFP荧光由胞膜到胞浆的转位变化,但可阻断此转位的恢复;U73122可以阻断PLC激活所介导的PLCδ1PH GFP荧光由胞膜到胞浆的转位变化; 新霉素对PLCδ1PH GFP的转位无影响,但可抑制未表达PLCδ1PH GFP的细胞中PLC激活后水解PtdIns(4,5)P2 的作用。结论　PLCδ1PH GFP可作为一种有价值的荧光探针来标记PtdIns( 4, 5 )P2 的动态变化;渥曼青霉素、LiCl、U73122和新霉素四种阻断剂对PtdIns(4, 5)P2 代谢过程有不同的影响;PLCδ1PH GFP可阻断新霉素发挥其抑制PLC水解PtdIns(4, 5)P2 的作用。 展开更多
关键词 磷脂酰肌醇4 5二磷酸 绿色荧光蛋白 磷脂酶C PH区结构域 新霉素 受体 激光扫描共聚焦显微镜
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KCNQ钾离子通道开放剂的筛选及抗癫痫活性观察 被引量：1
3
作者 李佳 王远 +2 位作者 宋超 贾庆忠 祁金龙 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1744-1752,共9页
目的筛选KCNQ通道开放活性化合物并进一步评价其抗癫痫作用。方法利用铷流出高通量筛选技术初筛,对优选化合物QO-72,复制多个动物模型,通过行为学以及脑电图(EEG)分析,结合一般药理学实验,对其有效性安全性进行初步评价,并探讨作用机制... 目的筛选KCNQ通道开放活性化合物并进一步评价其抗癫痫作用。方法利用铷流出高通量筛选技术初筛,对优选化合物QO-72,复制多个动物模型,通过行为学以及脑电图(EEG)分析,结合一般药理学实验,对其有效性安全性进行初步评价,并探讨作用机制。结果得到3个系列活性化合物共51个。化合物QO-72在MES和PTZ急性实验中,灌胃和腹腔注射可明显提高抗惊厥保护率(P<0.05,0.01),延长癫痫大发作阈值(P<0.01)。在PTZ点燃慢性癫痫模型中,QO-72腹腔注射不同剂量均可降低癫痫发作等级(P<0.01),缩短癫痫发作持续时间(P<0.01),大剂量明显提高发作保护率(P<0.01);QO-72治疗组EEG癫痫波时程明显缩短、振幅明显降低、波功率谱密度明显下降(P<0.05,0.01)。QO-72灌胃给药治疗剂量16倍或腹腔注射8倍,对小鼠协调运动、自主活动、戊巴比妥钠协同睡眠无明显影响。QO-72给药组海马区脑脊液GABA含量可明显增加(P<0.01),Glu没有明显变化(P>0.05)。结论化合物QO-72在电刺激和化学诱导的急、慢性癫痫模型上,均表现出良好抗癫痫作用,其机制除开放KCNQ通道外,可能还与增加脑内抑制性神经递质GABA含量有关。 展开更多
关键词 癫痫 KCNQ开放剂 高通量筛选 戊四唑 脑电图 一般药理学
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生理病理状态下PI4KⅢβ的调控机制
4
作者 朱甜甜 张玉 +5 位作者 桑雨琪 李黎 尤霜竹 祁金龙 黄东阳 张海林 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1025-1030,共6页
磷脂酰肌醇4激酶是磷脂酰肌醇信号通路的起始和关键分子。其中,Ⅲ型磷脂酰肌醇4-激酶β亚型(PI4KⅢβ)参与合成高尔基体PI4P库,在众多生理过程中发挥重要作用;同时,该酶是介导一些致病性RNA病毒复制的重要宿主因子,也参与了细菌感染以... 磷脂酰肌醇4激酶是磷脂酰肌醇信号通路的起始和关键分子。其中,Ⅲ型磷脂酰肌醇4-激酶β亚型(PI4KⅢβ)参与合成高尔基体PI4P库,在众多生理过程中发挥重要作用;同时,该酶是介导一些致病性RNA病毒复制的重要宿主因子,也参与了细菌感染以及疟疾等病理过程。研究表明,PI4KⅢβ的功能受众多因素调控,包括宿主和病毒蛋白结合伴侣等。该综述将对PI4KⅢβ的结构及其生理病理调控机制进行探讨。 展开更多
关键词 PI4KⅢβ 磷脂酰肌醇4-磷酸 膜募集 病毒感染 细菌感染 疟疾 神经系统疾病
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大鼠心肌细胞分离方法的改进 被引量：13
5
作者 石晓路 柳絮 +5 位作者 郭会彩 张丽男 勾向博 熊晨 苏倩 王永利 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期687-690,共4页
目的介绍一种易于判断酶解终点的分离大鼠心肌细胞的方法。方法成年SD大鼠麻醉后开胸取出心脏,分别采用传统的Langendorff灌流装置和本实验室改进的Langen-dorff灌流装置,于恒温37℃灌流消化液(含0.6%胶原酶B,0.6%BSA,30μmol.L-1Ca2+... 目的介绍一种易于判断酶解终点的分离大鼠心肌细胞的方法。方法成年SD大鼠麻醉后开胸取出心脏,分别采用传统的Langendorff灌流装置和本实验室改进的Langen-dorff灌流装置,于恒温37℃灌流消化液(含0.6%胶原酶B,0.6%BSA,30μmol.L-1Ca2+的台氏液)分离细胞,并采用IonOptix单细胞动缘检测系统检测细胞功能。结果传统的Langendorff灌流装置分离细胞,酶解时间约13～16min,但此法终点难以判断,每次分离的细胞质量差别较大,且不耐钙,收缩的稳定性较差。而以改进的Langendorff灌流装置分离细胞易于确定消化终点,细胞成活率大于80%,在含1.8mmol.L-1Ca2+的台氏液中存活率也高达50%。给予电压15V、频率1Hz、波宽4ms的持续电刺激时,其在1000s内收缩舒张功能稳定。结论经改造的Langendorff灌流装置分离的心肌细胞成活率高,可控性强,结果稳定,能够更好地用于检测细胞收缩舒张功能的实验。 展开更多
关键词 LANGENDORFF 心肌细胞 细胞分离 终点判断 动缘检测 收缩
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硫化氢对大鼠内毒素性急性肺损伤的影响 被引量：17
6
作者 王平 张建新 +2 位作者 李兰芳 金普乐 丁翠敏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1232-1236,共5页
目的观察硫化氢(H2S)对脂多糖(LPS)所致大鼠内毒素性急性肺损伤(ALI)的影响,探讨其对肺脏的作用机制。方法♂SD大鼠共64只,随机分为8组,每组8只:Ⅰ:3h空白对照组;Ⅱ:LPS3h组;Ⅲ:6h空白对照组;Ⅳ:LPS6h组;Ⅴ:LPS+NaHS低剂量组;Ⅵ:LPS+NaH... 目的观察硫化氢(H2S)对脂多糖(LPS)所致大鼠内毒素性急性肺损伤(ALI)的影响,探讨其对肺脏的作用机制。方法♂SD大鼠共64只,随机分为8组,每组8只:Ⅰ:3h空白对照组;Ⅱ:LPS3h组;Ⅲ:6h空白对照组;Ⅳ:LPS6h组;Ⅴ:LPS+NaHS低剂量组;Ⅵ:LPS+NaHS中剂量组;Ⅶ:LPS+NaHS高剂量组;Ⅷ:LPS+PPG组。LPS3h和LPS6h组给予LPS,其相应空白对照组给予生理盐水,分别在3h或6h时处死大鼠;LPS+NaHS低、中、高剂量组和LPS+PPG组分别在给LPS3h时腹腔注射低、中、高剂量氢硫化钠(NaHS)或炔丙基甘氨酸(PPG),再观察3h后处死大鼠。光、电镜下观察肺组织形态学改变,检测肺系数、肺湿/干重比(W/D)、血浆中H2S含量、肺组织胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)活性,以及肺组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的变化。结果LPS3h和LPS6h组与相应的空白对照组比较,光、电镜下肺组织明显受损,超微结构明显改变,肺系数、肺湿/干重比和肺组织MDA含量升高,血浆中H2S的含量、肺组织CSE以及SOD、GSH-Px活性降低。LPS+NaHS低、中、高剂量组与LPS6h组比较,光、电镜下肺组织受损情况均有不同程度改善,肺系数、肺湿/干重比和肺组织MDA含量降低,血浆H2S含量、肺组织CSE以及SOD、GSH-Px活性升高。LPS+PPG组与LPS6h组比较,光、电镜下肺组织损伤无改善,肺系数、肺湿/干重比和肺组织MDA含量升高,血浆中H2S的含量、肺组织CSE和SOD活性降低,肺组织GSH-Px活性无明显变化。结论CSE/H2S体系可能参与内毒素性ALI的病理生理过程,外源性补充H2S可减轻内毒素性ALI。 展开更多
关键词 硫化氢 急性肺损伤 丙二醛 超氧化物歧化酶 谷胱甘肽过氧化物酶
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杏花雨注射液对大鼠血液流变学和血液凝固的影响 被引量：12
7
作者 郭芳 赵松 +2 位作者 黄海龙 王永利 张海林 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期602-606,共5页
目的观察杏花雨注射液对大鼠血液流变学和血液凝固的影响,以探讨其抗缺血的机制。方法采用血淤模型测定大鼠血液流变学指标、PT、FIB、APTT及血小板聚集率和解聚时间。结果杏花雨注射液14、21mg·kg-1可使血浆粘度、全血粘度、红细... 目的观察杏花雨注射液对大鼠血液流变学和血液凝固的影响,以探讨其抗缺血的机制。方法采用血淤模型测定大鼠血液流变学指标、PT、FIB、APTT及血小板聚集率和解聚时间。结果杏花雨注射液14、21mg·kg-1可使血浆粘度、全血粘度、红细胞压积、红细胞聚集指数、红细胞刚性指数、血沉方程K值明显下降(P<0.05或P<0.01)。17.5、35和70mg·kg-1可使PT时间明显延长和FIB降低(P<0.01或P<0.05),70mg·kg-1可使APTT缩短(P<0.05)。17.5、35和70mg·kg-1血小板最大聚集率降低和血小板开始解聚的时间缩短(P<0.01),且作用呈剂量依赖性。结论杏花雨注射液对血液流变学指标和血液凝固有明显的影响,可改善血液的高凝状态,对缺血性疾病有一定的预防作用。 展开更多
关键词 血液流变学 血小板聚集 血液凝固 杏花雨注射液 金纳多
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Apelin/APJ系统在脂多糖诱导大鼠肺微血管内皮细胞损伤中的变化及其作用研究 被引量：10
8
作者 刘焕龙 朱忠宁 +3 位作者 江平 韩雨 苏素文 陈雪彦 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1152-1158,共7页
目的 探讨Apelin/APJ系统在脂多糖诱导大鼠肺微血管内皮细胞（PMVECs）损伤中的变化,并研究Apelin的作用及机制。方法 采用植块法培养大鼠PMVECs,Ⅷ因子相关抗原免疫细胞化学染色进行鉴定。噻唑蓝（MTT）比色法测定PMVECs活力;RT-PCR法... 目的 探讨Apelin/APJ系统在脂多糖诱导大鼠肺微血管内皮细胞（PMVECs）损伤中的变化,并研究Apelin的作用及机制。方法 采用植块法培养大鼠PMVECs,Ⅷ因子相关抗原免疫细胞化学染色进行鉴定。噻唑蓝（MTT）比色法测定PMVECs活力;RT-PCR法检测Apelin、APJmRNA表达的变化;Westernblot法检测大鼠PASMCs中PCNA蛋白表达及Akt的磷酸化水平。结果 LPS在短时间内能够使Apelin、APJmRNA表达水平呈代偿性上升（P〈0.01）,但随着作用时间延长,基因表达受到明显抑制,低于对照组（P〈0.05或P〈0.01）,提示Apelin/APJ系统可能参与了LPS诱导的大鼠PMVECs损伤。MTT结果表明,10-9~10-6mol·L-1的Apelin明显促进了大鼠PMVECs增殖（P〈0.05或P〈0.01）,且具有一定的浓度和时间依赖性。而且,Apelin还不同程度地改善了LPS诱导的PMVECs细胞损伤（P〈0.05或P〈0.01）。另外,Westernblot结果显示,Apelin还明显逆转了LPS诱导的PCNA蛋白表达和Akt磷酸化水平的降低（P〈0.05或P〈0.01）。结论 Apelin/APJ系统参与了LPS诱导的大鼠PMVECs损伤。Apelin对于维护肺微血管内皮细胞功能,干预LPS诱导的PMVECs损伤起着重要作用,可能与其激活Akt磷酸化通路有关。 展开更多
关键词 APELIN APJ 脂多糖 肺微血管内皮细胞 增殖 Akt 增殖细胞核抗原(PCNA)
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雷公藤多甙抑制小鼠腹腔巨噬细胞产生一氧化氮 被引量：15
9
作者 张永健 谢彦华 +3 位作者 苏素文 武占军 王永利 吕占军 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期75-76,共2页
雷公藤多甙（ｐｏｌｙｇｌｙｃｏｓｉｄｅｏｆＴｒｉｐｔｅｒｙｇｉｕｍｗｉｌｆｏｒｄｉＨｏｏｋ．ｆ．，ＴＷＰ）临床广泛用于治疗类风湿性关节炎等多种自身免疫性疾病，既可抑制细胞免疫又可抑制体液免疫［１］．但其在免疫抑制过程... 雷公藤多甙（ｐｏｌｙｇｌｙｃｏｓｉｄｅｏｆＴｒｉｐｔｅｒｙｇｉｕｍｗｉｌｆｏｒｄｉＨｏｏｋ．ｆ．，ＴＷＰ）临床广泛用于治疗类风湿性关节炎等多种自身免疫性疾病，既可抑制细胞免疫又可抑制体液免疫［１］．但其在免疫抑制过程中对一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的影响却... 展开更多
关键词 雷公藤多甙 腹腔巨噬细胞 一氧化氮
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灵芝发酵液对衰老大鼠抗氧化作用及其性功能的研究 被引量：11
10
作者 郭芳 齐亚娟 +1 位作者 张永健 王永利 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第15期1564-1568,共5页
目的观察灵芝发酵液对衰老大鼠、D-半乳糖所致衰老大鼠的自由基相关酶和代谢产物、大脑皮层超微结构、红细胞膜及性功能的影响。方法①选取24月龄SD大鼠,测定不同剂量灵芝发酵液对血和/或脑组织总抗氧化活力、维生素C、丙二醛、谷胱甘... 目的观察灵芝发酵液对衰老大鼠、D-半乳糖所致衰老大鼠的自由基相关酶和代谢产物、大脑皮层超微结构、红细胞膜及性功能的影响。方法①选取24月龄SD大鼠,测定不同剂量灵芝发酵液对血和/或脑组织总抗氧化活力、维生素C、丙二醛、谷胱甘肽的活性或含量的影响。②SD大鼠,随机分6组,分别为空白对照组、模型对照组、灵芝发酵液(0.3、0.6、1.2 g/kg)、维生素E 0.8 g/kg组,除空白对照组外,各组均皮下注射D-半乳糖50 mg.kg-1.d-1,测定血和脑组织中SOD、MDA、GSH-Px、MAO、LPF的活性或含量,并通过透射电镜观察大脑神经元超微结构的变化。③观察灵芝发酵液对红细胞膜上丙二醛含量的影响。④观察灵芝发酵液对阴茎勃起潜伏期、扑捉潜伏期、扑捉次数、射精次数、射精潜伏期的影响。结果①灵芝发酵液1.2 g/kg可明显提高总抗氧化活力和抗坏血酸的含量,降低MDA含量,而对谷胱甘肽无明显影响。②灵芝发酵液0.3 g/kg可升高GSH-Px的活性,降低MDA、LPF的含量,而对其它相关酶及代谢产物无明显影响;0.6 g/kg组可降低LPF、MDA的含量,增加血清中SOD的活性;1.2 g/kg可使SOD、GSH-Px活性的升高,降低MDA和LPF含量,也可抑制MAO的活性。灵芝发酵液可剂量依赖性的减轻D-半乳糖引起的神经元变性。③灵芝发酵液0.6、1.2 g/kg组可使红细胞膜MDA含量明显降低,0.3 g/kg组则无明显影响。④灵芝发酵液1.2 g/kg可缩短阴茎勃起潜伏期,0.6 g/kg明显增加扑捉次数和射精次数,缩短扑捉潜伏期和射精潜伏期,0.3 g/kg组只缩短扑捉潜伏期。结论灵芝发酵液能通过抑制脂质过氧化物的形成和/或提高抗氧化酶的活性,改善D-半乳糖导致脑超微结构变化,具有显著的抗氧化作用,且对性功能有一定的影响。 展开更多
关键词 自由基 抗氧化 灵芝发酵液 D-半乳糖 脂质过氧化 超微结构 性功能
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双苯氟嗪对血管紧张素Ⅱ诱导新生大鼠心肌成纤维细胞增殖和胶原合成的影响及其机制研究 被引量：12
11
作者 张伟 杨涛 +3 位作者 苏彦欣 苗庆峰 张永健 王永利 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期207-212,共6页
目的研究双苯氟嗪(d ipfluzine,D ip)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的新生大鼠心肌成纤维细胞(card iac fibrob lasts,CFB)增殖和胶原合成的影响,并探讨其抑制心肌纤维化的机制。方法用消化法培养新生SD大鼠CFB,建立AngⅡ诱... 目的研究双苯氟嗪(d ipfluzine,D ip)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的新生大鼠心肌成纤维细胞(card iac fibrob lasts,CFB)增殖和胶原合成的影响,并探讨其抑制心肌纤维化的机制。方法用消化法培养新生SD大鼠CFB,建立AngⅡ诱导新生大鼠CFB纤维化模型。采用MTT法检测D ip对CFB增殖的影响;羟脯氨酸测定检测CFB胶原含量;流式细胞分析仪技术检测细胞周期及增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达;RT-PCR检测Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白和转化生长因子β1(TGF-β1)的基因表达;免疫组织化学染色方法,观察心肌成纤维细胞经典型蛋白激酶Cα亚型(cPKCα)和细胞外信号调节蛋白激酶(ERK1)蛋白的表达。结果①在一定浓度范围内,D ip能明显抑制AngⅡ诱导CFB的增殖和胶原合成(P<0.05或P<0.01)。②CFB细胞G0/G1期百分率随D ip浓度增加而增加,S期、G2/M期百分率和增殖指数随D ip浓度增加而减少,与AngⅡ组相比差异有显著性(P<0.05或P<0.01)。③D ip能降低PCNA蛋白表达,与AngⅡ组相比差异有显著性(P<0.01)。④D ip能够明显降低Ⅰ型、Ⅲ型胶原和TGF-β1mRNA的表达(P<0.05或P<0.01)。⑤免疫组化结果显示D ip(10、100μmol.L-1)组ERK1和cPKCα阳性表达低于AngⅡ组(P<0.05或P<0.01)。结论D ip通过抑制AngⅡ诱导的CFB增殖和胶原的增加而起到了抗心肌纤维化的作用,其抗纤维化作用与其降低TGF-β1基因表达以及抑制cPKCα、ERK1通路有关。 展开更多
关键词 双苯氟嗪 心肌成纤维细胞 血管紧张素Ⅱ 胶原
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戊地昔布对人胃癌细胞生长的抑制作用 被引量：8
12
作者 李军霞 苏素文 +2 位作者 梅和珊 王永利 王川 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期458-462,共5页
目的　探讨选择性环氧化酶 2 (COX 2 )抑制剂戊地昔布对人胃癌BGC 82 3细胞的作用及其作用机制。方法　用MTT法检测戊地昔布对人胃癌BGC 82 3细胞生长的作用 ,用流氏细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期分布 ,用激光共聚焦显微镜、透射电镜和... 目的　探讨选择性环氧化酶 2 (COX 2 )抑制剂戊地昔布对人胃癌BGC 82 3细胞的作用及其作用机制。方法　用MTT法检测戊地昔布对人胃癌BGC 82 3细胞生长的作用 ,用流氏细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期分布 ,用激光共聚焦显微镜、透射电镜和DNA片段进一步检测细胞凋亡 ,用乳酸脱氢酶 (LDH)试剂盒测定BGC 82 3细胞的LDH含量。结果　戊地昔布 (2 5～ 4 0 0 μmol·L-1 )可时间和浓度依赖性抑制人胃癌BGC 82 3细胞的生长 ,作用 72h后 ,对细胞生长抑制率可达 2 4 0 %～ 92 0 % ,凋亡率由 (2 6± 0 7) %增加到 (7 6±1 5 ) %～ (1 6 5± 1 5 ) %。 1 0 0～ 4 0 0 μmol·L-1 也降低增殖指数 ,减少细胞周期S期细胞 ,增加G0 /G1 期细胞。随浓度增加 ,戊地昔布引起的LDH释放率有增加趋势 ,但只有 4 0 0μmol·L-1 戊地昔布可显著增加LDH释放率。结论　戊地昔布可通过诱导凋亡和细胞周期停滞而抑制人胃癌BGC 82 3细胞生长 ,4 0 0 μmol·L-1 戊地昔布抑制BGC 82 展开更多
关键词 戊地昔布 环氧化酶-2 人胃癌BGC 823细胞 凋亡
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硫化氢对大鼠急性心肌缺血损伤后心功能的影响 被引量：8
13
作者 刘芳 张建新 +2 位作者 李兰芳 丁艳艳 张新艳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1334-1338,共5页
目的探讨硫化氢(H2S)/胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)体系在大鼠急性心肌缺血中的变化及对心功能的影响。方法♂SD大鼠48只随机分为假手术组、缺血组、缺血+硫氢化钠(NaHS)低、中、高剂量组和缺血+炔丙基甘氨酸(PPG)组,每组8只。通过结扎大鼠左... 目的探讨硫化氢(H2S)/胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)体系在大鼠急性心肌缺血中的变化及对心功能的影响。方法♂SD大鼠48只随机分为假手术组、缺血组、缺血+硫氢化钠(NaHS)低、中、高剂量组和缺血+炔丙基甘氨酸(PPG)组,每组8只。通过结扎大鼠左冠状动脉前降支建立急性心肌缺血模型。缺血组、缺血+NaHS低、中、高剂量组和缺血+PPG组大鼠分别于缺血3h时腹腔注射生理盐水,低、中、高剂量NaHS及PPG,假手术组只在大鼠左冠状动脉前降支下穿线但不结扎,各组大鼠均于术后6h时处死并取材。取材前Powerlab/8s多导生理仪记录各组大鼠心率(HR)、左室发展压(LVDP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室压力变化速率(±dp/dtmax)等心功能指标;检测血浆中H2S含量、心肌组织CSE活性。结果与假手术组比较,缺血组大鼠心功能指标HR、LVDP、±dp/dtmax明显降低,LVEDP明显升高,血浆中H2S含量和心肌组织CSE活性降低(P<0.01)。与缺血组比较,缺血+NaHS中、高剂量组大鼠心功能指标HR、LVDP、±dp/dtmax明显升高,LVEDP明显降低,心功能改善随NaHS剂量升高有增高趋势;缺血+NaHS低、中、高剂量组大鼠血浆中H2S含量和心肌组织CSE活性升高,且随NaHS剂量升高而增高;缺血+PPG组大鼠心功能指标HR、LVDP、±dp/dtmax明显降低,LVEDP明显升高,血浆中H2S含量和心肌组织CSE活性降低(P<0.05或P<0.01)。结论大鼠急性心肌缺血时H2S/CSE体系可能参与急性心肌缺血的病理生理过程,给予外源性H2S可明显减轻急性缺血所致的心肌损伤,改善心功能,起到心肌保护作用。 展开更多
关键词 硫化氢 气体信号分子 胱硫醚-Γ-裂解酶 急性心肌缺血 心功能 大鼠
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Aβ_(25-35)对大鼠大脑皮质神经元神经甾体水平的影响 被引量：8
14
作者 于洋 薛改 +2 位作者 吴红海 李莎莎 侯艳宁 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期783-786,共4页
目的研究Aβ25-35对大鼠大脑皮质神经元合成神经甾体的影响。方法采用Aβ25-35(1μmol·L-1)处理原代培养的大鼠大脑皮质神经元,固相萃取结合高效液相色谱-质谱联用法测定细胞培养液中神经甾体的浓度,四甲基偶氮唑(MTT)法检测细胞... 目的研究Aβ25-35对大鼠大脑皮质神经元合成神经甾体的影响。方法采用Aβ25-35(1μmol·L-1)处理原代培养的大鼠大脑皮质神经元,固相萃取结合高效液相色谱-质谱联用法测定细胞培养液中神经甾体的浓度,四甲基偶氮唑(MTT)法检测细胞活性。结果与对照组相比,Aβ25-35处理后神经元存活率降低约50%(P<0.01),胆固醇处理组神经元存活率未见改变(P>0.05),但Aβ+胆固醇组的神经元存活率明显高于Aβ处理组(P<0.01)。与胆固醇组相比,Aβ25-35处理后神经甾体PREG水平略有降低(P>0.05),PROG水平明显下降(P<0.01),AP水平明显增高(P<0.01)。结论神经甾体PREG-PROG-AP代谢通路在Aβ25-35引起的大鼠大脑皮质神经元损伤时发生明显改变,并能部分地对抗Aβ的神经毒性作用。 展开更多
关键词 Β-淀粉样蛋白 神经甾体发生 液相色谱-质联用法 皮质神经元 神经毒性 阿尔采末病
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豚鼠心衰时心肌细胞收缩和钙瞬变的变化 被引量：6
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作者 齐亚娟 郭芳 +4 位作者 李吉和 刘雪莉 李树民 郭会彩 王永利 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第18期1850-1853,共4页
目的探讨慢性心衰时豚鼠心肌细胞收缩及钙瞬变的变化。方法以降主动脉缩窄法及异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)法建立豚鼠慢性心衰模型成功后,以酶解法急性分离左室心肌细胞,然后同步检测两种心衰时心肌细胞收缩和钙瞬变的变化。结果... 目的探讨慢性心衰时豚鼠心肌细胞收缩及钙瞬变的变化。方法以降主动脉缩窄法及异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)法建立豚鼠慢性心衰模型成功后,以酶解法急性分离左室心肌细胞,然后同步检测两种心衰时心肌细胞收缩和钙瞬变的变化。结果降主动脉缩窄8周后,70%豚鼠出现呼吸困难(BPC组),而给予ISO 8周后的豚鼠(ISO组)未见明显呼吸困难,BPC组及ISO组豚鼠的左室收缩压及舒张末压显著增高,左室压上升和下降最大速率显著降低;左心室质量与体质量比值、肺质量与体质量比值及室壁厚度明显增高,均呈现明显的心衰特点。而缩窄8周后未见呼吸困难的豚鼠(BWPC组)仅左心室质量与体质量比值增加,心脏功能尚处于代偿期。两种心衰心肌细胞收缩幅度、收缩和舒张速度均明显减弱,且BPC组收缩幅度、舒张速度比ISO组减弱更明显;BWPC组的心肌细胞收缩幅度、收缩和舒张速度却明显增高。BPC组心肌细胞内舒张期钙升高,钙瞬变幅度减小,舒张期钙减少50%所需时间(T50DCa)延长;而BW-PC组心肌细胞内钙无明显变化;ISO组心肌细胞内舒张期钙和收缩期钙均降低,钙瞬变幅度也减小,T50DCa却无明显改变。结论降主动脉缩窄或给予ISO 8周后,均可造成豚鼠心衰。心衰后心肌细胞收缩功能减弱,钙瞬变幅度减小。 展开更多
关键词 豚鼠 慢性心衰 缩窄 异丙肾上腺素 细胞收缩 钙瞬变
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可视化动缘探测系统同步检测慢性心衰对豚鼠心肌细胞舒、缩功能和钙瞬变的影响 被引量：6
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作者 齐亚娟 郭芳 +4 位作者 李吉和 李树民 刘雪莉 郭会彩 王永利 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期333-337,共5页
目的建立豚鼠慢性充血性心力衰竭(CHF)模型,采用可视化动缘探测系统同步检测慢性心衰对豚鼠心肌细胞舒缩功能及钙瞬变的影响。方法采用有无呼吸困难、左心室质量与体质量比值、肺质量与体质量比值、室壁厚度及血流动力学指标判断,以降... 目的建立豚鼠慢性充血性心力衰竭(CHF)模型,采用可视化动缘探测系统同步检测慢性心衰对豚鼠心肌细胞舒缩功能及钙瞬变的影响。方法采用有无呼吸困难、左心室质量与体质量比值、肺质量与体质量比值、室壁厚度及血流动力学指标判断,以降主动脉缩窄法建立豚鼠CHF模型成功后,以酶解法急性分离其左室心肌细胞,用可视化动缘探测系统同步检测慢性心衰豚鼠心肌细胞收缩力和钙瞬变的变化,并与正常豚鼠心肌细胞进行比较。结果降主动脉缩窄8 wk后,出现呼吸困难的豚鼠,其左室收缩压及舒张末压显著性增高,左室压上升和下降最大速率降低;左心室质量与体质量比值、肺质量与体质量比值及室壁厚度明显增高,呈现明显的心衰指征;心衰心肌细胞与正常细胞相比,其收缩幅度、收缩和舒张速度均明显减弱;舒张期细胞内钙升高,钙瞬变幅度减小,舒张期钙减少50%所需时间延长,但收缩期钙及细胞内钙达峰时间无明显改变。结论降主动脉缩窄8 wk后,豚鼠呼吸困难是判断CHF模型形成的指标;慢性心衰可使心肌细胞收缩力下降,钙瞬变幅度减小,这为探讨慢性心衰的发生机制提供了实验依据。 展开更多
关键词 豚鼠 慢性充血性心力衰竭 收缩 钙瞬变 心肌细胞
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雷公藤多苷对大鼠佐剂性关节炎的治疗作用与NO的关系 被引量：7
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作者 苏素文 张永健 +4 位作者 谢彦华 张连珊 王永利 杨天祝 郭兰英 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期60-62,共3页
目的探讨雷公藤多苷对大鼠佐剂性关节炎（ＡＡ）的治疗作用与ＮＯ的关系。方法采用镉还原柱层析和Ｇｒｉｅｓｓ比色法，测定ＡＡ模型大鼠血中ＮＯ－２／ＮＯ－３的水平，并结合病理组织学检查和ＮＡＤＰＨ－α组化观察关节处的变化。于... 目的探讨雷公藤多苷对大鼠佐剂性关节炎（ＡＡ）的治疗作用与ＮＯ的关系。方法采用镉还原柱层析和Ｇｒｉｅｓｓ比色法，测定ＡＡ模型大鼠血中ＮＯ－２／ＮＯ－３的水平，并结合病理组织学检查和ＮＡＤＰＨ－α组化观察关节处的变化。于致炎后ｄ１９起，每日给予雷公藤多苷２、８和３２ｍｇ·ｋｇ－１。结果雷公藤多苷８和３２ｍｇ·ｋｇ－１组左、右两侧足跖的继发性肿胀度均于给药后ｄ４即明显较给药前小。而且给药后ｄ８，这两组在减轻足跖肿胀的同时，均可显著降低血清中ＮＯ含量。踝关节病理显示：模型对照组关节滑膜组织内有大量炎性细胞（主要是淋巴细胞、巨噬细胞）浸润，关节面不完整，关节腔内可见退化、脱落的滑膜组织碎片，ＮＡＤＰＨ－α组化显示：膝关节滑膜下结缔组织中有散在的蓝黑色ＮＯＳ阳性细胞；而给予雷公藤多苷８和３２ｍｇ·ｋｇ－１后，关节病理观察结果显示：滑膜组织内淋巴细胞、巨噬细胞明显减少，且３２ｍｇ·ｋｇ－１组作用更明显，滑膜下结缔组织中ＮＯＳ阳性细胞消失。结论在大鼠佐剂性关节炎病理过程中有ＮＯ参与。 展开更多
关键词 雷公藤多苷 佐剂性关节炎 药物疗法 一氧化氮
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双苯氟嗪对局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用(英文) 被引量：5
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作者 梅和珊 苏素文 +2 位作者 李军霞 李海芳 王永利 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期333-337,共5页
目的　评价双苯氟嗪 (Dip)和氟桂利嗪 (Flu)在大鼠局灶性脑缺血再灌注模型中的神经保护作用。方法　将内皮素 1(ET 1)灌注到大脑中动脉附近制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型 ,并于灌注ET 1后 30min和 4 .5h腹腔注射溶剂、Dip 10 ,2 0和4... 目的　评价双苯氟嗪 (Dip)和氟桂利嗪 (Flu)在大鼠局灶性脑缺血再灌注模型中的神经保护作用。方法　将内皮素 1(ET 1)灌注到大脑中动脉附近制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型 ,并于灌注ET 1后 30min和 4 .5h腹腔注射溶剂、Dip 10 ,2 0和4 0mg·kg- 1和Flu 2 0mg·kg- 1,采用氢清除法监测灌注ET 1前、后纹状体血流变化 ,并对缺血后 2 4h脑梗塞面积、血清中超氧化物歧化酶 (SOD)活性和丙二醛 (MDA)含量的变化进行了测定。结果　Dip 2 0和 4 0mg·kg- 1于灌注ET 1后 70和 10 0min明显改善缺血侧纹状体血流量下降 ;Flu 2 0mg·kg- 1的作用较弱 ,仅于灌注ET 1后 10 0min明显改善缺血侧纹状体血流量 ;Dip可以剂量依赖性的降低脑梗塞面积 (r =0 .9797,P <0 .0 1) ,同剂量Flu可产生相似的作用 ;各剂量组Dip和Flu均可增加血清中SOD活性、降低MDA含量。结论　Dip和Flu对脑缺血再灌注损伤有明显的保护作用 ,Dip改善脑血流的作用略强于Flu ,其保护作用的机制与改善脑血流和抗氧化作用有关。 展开更多
关键词 钙通道阻滞剂 双苯氟嗪 氟桂利嗪 内皮素-1 脑缺血 自由基类 氢清除法
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脑缺血时谷氨酸释放机制 被引量：38
19
作者 梅和珊 王永利 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期393-396,共4页
谷氨酸是中枢神经系统主要的兴奋性神经递质,在脑缺血造成的神经元损伤过程中发挥重要作用。脑缺血时多种机制参与了谷氨酸释放的的调节,如Ca2+依赖性的出胞式释放、谷氨酸转运体调节的释放、水肿诱发的释放和受体调节的释放等。本文根... 谷氨酸是中枢神经系统主要的兴奋性神经递质,在脑缺血造成的神经元损伤过程中发挥重要作用。脑缺血时多种机制参与了谷氨酸释放的的调节,如Ca2+依赖性的出胞式释放、谷氨酸转运体调节的释放、水肿诱发的释放和受体调节的释放等。本文根据现有的文献资料,综述了脑缺血时谷氨酸释放机制。 展开更多
关键词 脑缺血 谷氨酸 Γ-氨基丁酸受体 谷氨酸转运体 代 谢型谷氨酸受体 胱氨酸-谷氨酸转运体
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神经干细胞研究进展 被引量：12
20
作者 王娜 刘砚星 +1 位作者 连易水 熊晨 《生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第1期55-58,共4页
神经干细胞研究是当今生命科学研究的热点之一。神经干细胞是神经系统发育过程中保留下来的具有自我更新和多分化潜能的原始细胞。随着对神经干细胞认识的不断深入,其临床应用前景与价值得到了越来越多研究者的肯定。从神经干细胞的生... 神经干细胞研究是当今生命科学研究的热点之一。神经干细胞是神经系统发育过程中保留下来的具有自我更新和多分化潜能的原始细胞。随着对神经干细胞认识的不断深入,其临床应用前景与价值得到了越来越多研究者的肯定。从神经干细胞的生物学特征、来源、培养鉴定、分化及应用等几个方面对目前的研究做一概述。 展开更多
关键词 神经干细胞 分化 基因调控
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