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吲哚美辛多单元结肠靶向迷你片的制备及体内外评价
被引量：
2
1
作者
党云洁
敖惠
+3 位作者
王勇
孙梦娟
曹德英
杜青
《医药导报》
CAS
2017年第2期196-201,共6页
目的制备酶触发型多单元吲哚美辛结肠靶向迷你片,提高吲哚美辛治疗结肠疾病的靶向性。方法筛选不同比例肠溶层和壳聚糖层优化处方,采用直接压片法制备结肠靶向迷你片,考察制剂在不同释放液中的释药行为;采用大鼠模型考察其在体内的组织...
目的制备酶触发型多单元吲哚美辛结肠靶向迷你片,提高吲哚美辛治疗结肠疾病的靶向性。方法筛选不同比例肠溶层和壳聚糖层优化处方,采用直接压片法制备结肠靶向迷你片,考察制剂在不同释放液中的释药行为;采用大鼠模型考察其在体内的组织分布情况,并以比格犬为动物模型进行药动学研究和生物利用度评价。结果优选壳聚糖层处方:包衣液浓度为2%,增塑剂柠檬酸三乙酯(TEC)用量为15%,抗黏剂滑石粉用量为30%,包衣增重为5%;肠溶层处方:包衣液固含量20%,增塑剂TEC用量为5%,抗黏剂滑石粉用量为40%,包衣增重为3%。壳聚糖多单元结肠靶向制剂在大鼠胃、小肠中均无释放,在结肠处缓慢释放,比格犬体内药动学:Cmax=(3.25±0.672)mg·L^(-1),tmax=(2.00±0.014)h,AUC(0-∞)=(10.2±0.871)mg·L^(-1)·h,MRT(0-∞)=(2.82±0.180)h,CL=(2.46±0.202)L·h-1·kg^(-1),自制结肠靶向迷你片的释药时间显著延长,血药浓度平稳。结论制备的吲哚美辛酶触发型多单元结肠靶向迷你片具有较好的结肠靶向性和缓释效果,可为吲哚美辛治疗结肠疾病的制剂开发提供重要参考。
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关键词
吲哚美辛
结肠靶向迷你片
壳聚糖
p
H值依赖
酶触发
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职称材料
人钠泵α2亚基M4～M5区片段的克隆、原核表达与纯化
2
作者
刘志文
连易水
+4 位作者
张玥
王永利
王伟
赵兴茹
崔京霞
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第19期2058-2061,共4页
目的构建钠泵α2亚基第4跨膜区与第5跨膜区之间的蛋白结构域M4～M5的原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达和纯化。方法通过PCR反应和酶切技术,构建表达载体pET28b(+)-M4-5,并于大肠杆菌E.coliRosetta2进行表达,用6mol/L盐酸胍对表达形...
目的构建钠泵α2亚基第4跨膜区与第5跨膜区之间的蛋白结构域M4～M5的原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达和纯化。方法通过PCR反应和酶切技术,构建表达载体pET28b(+)-M4-5,并于大肠杆菌E.coliRosetta2进行表达,用6mol/L盐酸胍对表达形成的不溶包涵体进行变性,梯度稀释复性后,用Ni-NTA亲和柱进行纯化,得到目的蛋白,用Westernblot分析表达产物,并采用无机磷法测定其ATP酶活性。结果重组表达载体pET28b(+)-M4-5经酶切与测序鉴定证实构建成功;导入大肠杆菌Rosetta2进行表达,表达产物相对分子质量为52×103左右,与预期值相符,表达量占细胞全蛋白的30%左右;SDS-PAGE分析表明,表达产物主要以包涵体形式存在,亲和柱纯化后,目的蛋白的纯度在95%以上;Westernblot分析表明表达产物与抗His抗体特异性结合;重组蛋白的ATP酶活性为(15.3±1.8)mmol·(g·h)-1。结论构建了原核表达载体pET28b(+)-M4-5,并在大肠杆菌Rosetta2中成功表达,亲和纯化获得较高纯度的M4～M5融合蛋白。
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关键词
钠泵α2亚基
表达纯化
包涵体
复性
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职称材料
题名
吲哚美辛多单元结肠靶向迷你片的制备及体内外评价
被引量：
2
1
作者
党云洁
敖惠
王勇
孙梦娟
曹德英
杜青
机构
河北医科大学药学院药剂教研室
出处
《医药导报》
CAS
2017年第2期196-201,共6页
基金
国家科技重大专项(2014ZX09507001)
河北省高等学校科学技术研究项目(QN20131011)
+1 种基金
河北自然科学基金(H2016206584)
河北省2015大学生创新实验计划项目(USIP201559A)
文摘
目的制备酶触发型多单元吲哚美辛结肠靶向迷你片,提高吲哚美辛治疗结肠疾病的靶向性。方法筛选不同比例肠溶层和壳聚糖层优化处方,采用直接压片法制备结肠靶向迷你片,考察制剂在不同释放液中的释药行为;采用大鼠模型考察其在体内的组织分布情况,并以比格犬为动物模型进行药动学研究和生物利用度评价。结果优选壳聚糖层处方:包衣液浓度为2%,增塑剂柠檬酸三乙酯(TEC)用量为15%,抗黏剂滑石粉用量为30%,包衣增重为5%;肠溶层处方:包衣液固含量20%,增塑剂TEC用量为5%,抗黏剂滑石粉用量为40%,包衣增重为3%。壳聚糖多单元结肠靶向制剂在大鼠胃、小肠中均无释放,在结肠处缓慢释放,比格犬体内药动学:Cmax=(3.25±0.672)mg·L^(-1),tmax=(2.00±0.014)h,AUC(0-∞)=(10.2±0.871)mg·L^(-1)·h,MRT(0-∞)=(2.82±0.180)h,CL=(2.46±0.202)L·h-1·kg^(-1),自制结肠靶向迷你片的释药时间显著延长,血药浓度平稳。结论制备的吲哚美辛酶触发型多单元结肠靶向迷你片具有较好的结肠靶向性和缓释效果,可为吲哚美辛治疗结肠疾病的制剂开发提供重要参考。
关键词
吲哚美辛
结肠靶向迷你片
壳聚糖
p
H值依赖
酶触发
Keywords
Indomethacin
Colon targeting mini tablets
Chitosan
pH dependency
Enzyme triggered
分类号
R971.1 [医药卫生—药品]
TQ460.6 [化学工程—制药化工]
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职称材料
题名
人钠泵α2亚基M4～M5区片段的克隆、原核表达与纯化
2
作者
刘志文
连易水
张玥
王永利
王伟
赵兴茹
崔京霞
机构
河北医科大学药学院药剂教研室
河北医科大学
基础医
学院
药理
教研室
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第19期2058-2061,共4页
基金
国家自然科学基金(30700324)
河北省自然科学基金(C2008001070)~~
文摘
目的构建钠泵α2亚基第4跨膜区与第5跨膜区之间的蛋白结构域M4～M5的原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达和纯化。方法通过PCR反应和酶切技术,构建表达载体pET28b(+)-M4-5,并于大肠杆菌E.coliRosetta2进行表达,用6mol/L盐酸胍对表达形成的不溶包涵体进行变性,梯度稀释复性后,用Ni-NTA亲和柱进行纯化,得到目的蛋白,用Westernblot分析表达产物,并采用无机磷法测定其ATP酶活性。结果重组表达载体pET28b(+)-M4-5经酶切与测序鉴定证实构建成功;导入大肠杆菌Rosetta2进行表达,表达产物相对分子质量为52×103左右,与预期值相符,表达量占细胞全蛋白的30%左右;SDS-PAGE分析表明,表达产物主要以包涵体形式存在,亲和柱纯化后,目的蛋白的纯度在95%以上;Westernblot分析表明表达产物与抗His抗体特异性结合;重组蛋白的ATP酶活性为(15.3±1.8)mmol·(g·h)-1。结论构建了原核表达载体pET28b(+)-M4-5,并在大肠杆菌Rosetta2中成功表达,亲和纯化获得较高纯度的M4～M5融合蛋白。
关键词
钠泵α2亚基
表达纯化
包涵体
复性
Keywords
Na＋-pumpα2 isoform
expression and purification
inclusion body
refolding
分类号
R394.33 [医药卫生—医学遗传学]
R394.3 [医药卫生—医学遗传学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
吲哚美辛多单元结肠靶向迷你片的制备及体内外评价
党云洁
敖惠
王勇
孙梦娟
曹德英
杜青
《医药导报》
CAS
2017
2
在线阅读
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职称材料
2
人钠泵α2亚基M4～M5区片段的克隆、原核表达与纯化
刘志文
连易水
张玥
王永利
王伟
赵兴茹
崔京霞
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
0
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