目的探讨Hedgehog/Gli促进胃癌AZ521细胞上皮-间质转化(EMT)的肿瘤分子学机制。方法 GANT61处理AZ521细胞24 h后,用实时荧光定量PCR法观察GANT61对Gli1、Gli2、N-cadherin和E-cadherin m RNA表达的影响;用Western blotting观察GANT61对G...目的探讨Hedgehog/Gli促进胃癌AZ521细胞上皮-间质转化(EMT)的肿瘤分子学机制。方法 GANT61处理AZ521细胞24 h后,用实时荧光定量PCR法观察GANT61对Gli1、Gli2、N-cadherin和E-cadherin m RNA表达的影响;用Western blotting观察GANT61对Gli1、Gli2、p-AKT、AKT、N-cadherin和E-cadherin蛋白表达的影响;用侵袭实验观察GANT61对胃癌细胞迁移侵袭能力的影响;同时,应用N-Shh刺激Hedgehog通路观察相应指标的变化。结果与对照组相比,GANT61组胃癌AZ521细胞的Gli1、Gli2、N-cadherin m RNA表达显著下调,E-cadherin m RNA表达上调;Western blotting结果显示GANT61可以下调AZ521的Gli1、Gli2、p-AKT、N-cadherin蛋白表达,上调E-cadherin蛋白表达。侵袭实验结果显示GANT61可以显著抑制AZ521细胞的侵袭能力。应用N-Shh可以显著上调Gli1、Gli2、N-cadherin m RNA和蛋白表达以及p-AKT蛋白表达,下调E-cadherin m RNA及蛋白表达,促进肿瘤细胞侵袭转移。结论 Gli1和Gli2表达下调可以抑制胃癌细胞的侵袭转移,可能与Gli通过PI3K/AKT途径促进EMT有关。展开更多
目的探讨Gli表达下调对食管鳞癌KYSE-30细胞周期分布和上皮-间质转化能力的影响及其分子机制。方法将Gli1和Gli2 si RNA和空白对照si RNA分别转染KYSE-30细胞48 h,实时荧光定量PCR法检测Gli1、Gli2 m RNA表达水平;Western blot法检测KYS...目的探讨Gli表达下调对食管鳞癌KYSE-30细胞周期分布和上皮-间质转化能力的影响及其分子机制。方法将Gli1和Gli2 si RNA和空白对照si RNA分别转染KYSE-30细胞48 h,实时荧光定量PCR法检测Gli1、Gli2 m RNA表达水平;Western blot法检测KYSE-30细胞Gli1、Gli2、Cyclin D1、Cyclin D2、p21、波形蛋白(Vimentin)和β-catenin蛋白的表达;流式细胞术检测KYSE-30细胞周期分布;Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力。结果与空白对照si RNA组相比,Gli1和Gli2 si RNA可明显抑制KYSE-30细胞Gli1、Gli2 m RNA和蛋白表达,下调Cyclin D1、Cyclin D2、Vimentin和β-catenin蛋白的表达和增加p21蛋白表达,将细胞周期阻滞在G0/G1期并降低细胞的侵袭能力,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 Gli蛋白表达可能在食管鳞癌的发生发展中具有重要作用,下调Gli1和Gli2表达可导致食管鳞癌细胞增殖、细胞周期分布和上皮-间质转化能力的改变,这可能与Cyclin D1、Cyclin D2、p21、Vimentin和β-catenin蛋白变化相关。展开更多
文摘目的探讨Hedgehog/Gli促进胃癌AZ521细胞上皮-间质转化(EMT)的肿瘤分子学机制。方法 GANT61处理AZ521细胞24 h后,用实时荧光定量PCR法观察GANT61对Gli1、Gli2、N-cadherin和E-cadherin m RNA表达的影响;用Western blotting观察GANT61对Gli1、Gli2、p-AKT、AKT、N-cadherin和E-cadherin蛋白表达的影响;用侵袭实验观察GANT61对胃癌细胞迁移侵袭能力的影响;同时,应用N-Shh刺激Hedgehog通路观察相应指标的变化。结果与对照组相比,GANT61组胃癌AZ521细胞的Gli1、Gli2、N-cadherin m RNA表达显著下调,E-cadherin m RNA表达上调;Western blotting结果显示GANT61可以下调AZ521的Gli1、Gli2、p-AKT、N-cadherin蛋白表达,上调E-cadherin蛋白表达。侵袭实验结果显示GANT61可以显著抑制AZ521细胞的侵袭能力。应用N-Shh可以显著上调Gli1、Gli2、N-cadherin m RNA和蛋白表达以及p-AKT蛋白表达,下调E-cadherin m RNA及蛋白表达,促进肿瘤细胞侵袭转移。结论 Gli1和Gli2表达下调可以抑制胃癌细胞的侵袭转移,可能与Gli通过PI3K/AKT途径促进EMT有关。
文摘目的探讨Gli表达下调对食管鳞癌KYSE-30细胞周期分布和上皮-间质转化能力的影响及其分子机制。方法将Gli1和Gli2 si RNA和空白对照si RNA分别转染KYSE-30细胞48 h,实时荧光定量PCR法检测Gli1、Gli2 m RNA表达水平;Western blot法检测KYSE-30细胞Gli1、Gli2、Cyclin D1、Cyclin D2、p21、波形蛋白(Vimentin)和β-catenin蛋白的表达;流式细胞术检测KYSE-30细胞周期分布;Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力。结果与空白对照si RNA组相比,Gli1和Gli2 si RNA可明显抑制KYSE-30细胞Gli1、Gli2 m RNA和蛋白表达,下调Cyclin D1、Cyclin D2、Vimentin和β-catenin蛋白的表达和增加p21蛋白表达,将细胞周期阻滞在G0/G1期并降低细胞的侵袭能力,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 Gli蛋白表达可能在食管鳞癌的发生发展中具有重要作用,下调Gli1和Gli2表达可导致食管鳞癌细胞增殖、细胞周期分布和上皮-间质转化能力的改变,这可能与Cyclin D1、Cyclin D2、p21、Vimentin和β-catenin蛋白变化相关。
