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逆转录病毒介导的小鼠IL-23基因在小鼠结肠癌细胞中的表达及其抗肿瘤活性 被引量:1
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作者 郝京生 单保恩 +2 位作者 李巧霞 李启亮 付小梅 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期226-228,232,共4页
 目的: 获得表达小鼠IL -23 (mIL- 23 )基因的小鼠结肠癌细胞株。方法: 应用逆转录病毒载体, 将mIL -23基因导入小鼠结肠癌细胞株Colon26, 经G418筛选后获得表达mIL 23的阳性细胞克隆(Colon26 /IL- 23)。用PCR和RT -PCR检测目的基因的...  目的: 获得表达小鼠IL -23 (mIL- 23 )基因的小鼠结肠癌细胞株。方法: 应用逆转录病毒载体, 将mIL -23基因导入小鼠结肠癌细胞株Colon26, 经G418筛选后获得表达mIL 23的阳性细胞克隆(Colon26 /IL- 23)。用PCR和RT -PCR检测目的基因的表达, 用ELISA法检测mIL -23的产生及mIL- 23诱导的小鼠脾细胞IFN -γ的产生, 用MTT比色法检测Co lon26 /IL -23细胞和Colon26细胞的体外增殖。将Colon26 /IL- 23细胞接种于BALB/c小鼠的右侧背部皮下, 观察其致瘤性。结果: 建立了可表达mIL -23基因的小鼠结肠癌细胞株。分泌至培养上清中的IL -23, 可诱导小鼠脾细胞产生IFN- γ。在体外Colon26 /IL- 23细胞的生长与Colon26细胞无明显不同, 但其在体内的致瘤性下降, 具有抗瘤作用。结论: Colon26 /IL- 23细胞可分泌IL -23并证明其具有抗瘤活性。 展开更多
关键词 IL-23 逆转录病毒载体 基因表达 小鼠结肠癌细胞
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syk基因真核表达载体的构建及其对乳腺癌细胞侵袭性抑制作用的体外研究 被引量:3
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作者 宋小天 单保恩 +4 位作者 胡洁 齐义新 宋小珍 周艳 李润青 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期698-702,共5页
目的:构建非受体型蛋白酪氨酸激酶Syk的真核表达载体,转染人乳腺癌细胞,使其在乳腺癌细胞中稳定表达,为进一步探讨Syk抑制肿瘤细胞侵袭转移的具体机制奠定基础。方法:构建syk基因的真核表达载体pcDNA3.1D/V5-His-TOPO/syk,以脂质体介导... 目的:构建非受体型蛋白酪氨酸激酶Syk的真核表达载体,转染人乳腺癌细胞,使其在乳腺癌细胞中稳定表达,为进一步探讨Syk抑制肿瘤细胞侵袭转移的具体机制奠定基础。方法:构建syk基因的真核表达载体pcDNA3.1D/V5-His-TOPO/syk,以脂质体介导法转染Syk表达缺失的MDA-MB-231细胞,经G418筛选,获得syk基因稳定表达的MDA-MB-231/syk细胞。通过流式细胞术和RT-PCR技术检测转染细胞MMP-9的表达变化,用体外迁移和侵袭力实验测定转染细胞的迁移和侵袭能力。结果:构建了syk基因的真核表达载体pcDNA3.1D/V5-His-TOPO/syk,并在MDA-MB-231细胞中获得稳定表达。与野生型MDA-MB-231细胞相比,MDA-MB-231/syk细胞表达MMP-9的水平明显降低(P<0.01),并且该细胞的迁移和侵袭能力也明显降低(P<0.01)。结论:候选抑癌基因syk通过脂质体可有效转染MDA-MB-231细胞,MDA-MB-231/syk细胞迁移和侵袭能力明显降低,这为进一步研究Syk在体内的抑瘤作用和乳腺癌基因治疗奠定了基础。 展开更多
关键词 乳腺癌 SYK 真核表达载体 迁移 侵袭
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