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芯片技术分析卵巢子宫内膜异位症外泌体microRNA表达差异 被引量:5
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作者 王礼贤 胡月阳 +2 位作者 李琰 吴建华 康山 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期885-890,共6页
目的:探讨卵巢子宫内膜异位症(ovarian endometriosis,OEM)外泌体微小RNA(microRNA,miRNA)的表达谱。方法:采用芯片技术对3例OEM患者及3例健康对照者的在位内膜间质细胞外泌体miRNA进行分析,筛选出组间差异miRNA。结果:获得存在差异表达... 目的:探讨卵巢子宫内膜异位症(ovarian endometriosis,OEM)外泌体微小RNA(microRNA,miRNA)的表达谱。方法:采用芯片技术对3例OEM患者及3例健康对照者的在位内膜间质细胞外泌体miRNA进行分析,筛选出组间差异miRNA。结果:获得存在差异表达miRNA共12条,其中hsa-miR-6829-5p、hsa-miR-5188、hsa-miR-4430、hsa-miR-584-5p、hsa-miR-4485-5p、hsa-miR-4257在实验组表达上调,hsa-miR-188-5p、hsa-miR-4741、hsa-miR-4516、hsa-miR-1229-5p、hsa-miR-7150、hsamiR-5787表达下调。对表达差异较大的外泌体miRNA进行靶基因预测及其基因功能(gene ontology,GO)分析和信号通路(pathway)分析,发现靶基因聚集的生物学功能多数参与生物进展过程的调控。结论:OEM患者与健康对照者的在位内膜间质细胞外泌体miRNA存在着差异性表达。差异性表达的miRNA特异性很高,对进一步阐明该疾病的发病机制和寻找新的诊断标记物具有重要意义。 展开更多
关键词 卵巢子宫内膜异位症 外泌体 微小RNA
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DNA甲基化转移酶DNMTs和甲基化结合蛋白MBDs在卵巢子宫内膜异位症中的表达及相关性研究 被引量:4
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作者 王礼贤 李琰 康山 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期312-317,共6页
目的探讨DNA甲基化转移酶(DNA methyltransferases,DNMTs)和甲基化结合蛋白(methyl-CpG-binding domains,MBDs)在卵巢子宫内膜异位症患者子宫内膜及异位内膜中的mRNA表达水平及其相关性。方法收集20例卵巢子宫内膜异位症患者的在位内膜... 目的探讨DNA甲基化转移酶(DNA methyltransferases,DNMTs)和甲基化结合蛋白(methyl-CpG-binding domains,MBDs)在卵巢子宫内膜异位症患者子宫内膜及异位内膜中的mRNA表达水平及其相关性。方法收集20例卵巢子宫内膜异位症患者的在位内膜、异位内膜及20例因宫颈上皮内瘤变Ⅲ级手术切除子宫的正常子宫内膜,采用qRT-PCR技术检测其中DNMTs和MBDs的mRNA表达水平,并采用Pearson相关分析探讨DNMTs及MBDs mRNA表达水平的相关性。结果①在位内膜和异位内膜中DNMT1、DNMT3A、DNMT3B的mRNA水平均明显低于对照内膜,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01,);而在位内膜和异位内膜之间的差异无统计学意义(均P>0.05)。②各DNMTs mRNA表达水平均呈正相关,相关性系数分别为0.370(DNMT1 vs.DNMT3A,P=0.006)、0.306(DNMT1 vs.DNMT3B,P=0.025)、0.287(DNMT3A vs.DNMT3B,P=0.035)。③异位内膜中MBD1 mRNA表达水平明显低于在位内膜(P=0.027)和对照内膜(P<0.01),在位内膜与对照组内膜之间差异无统计学意义(P=0.540);在位内膜与异位内膜中MBD2与MBD3 mRNA表达水平明显低于对照内膜(均P<0.01),而在位内膜与异位内膜之间的差异无统计学意义(均P>0.05);3组内膜中MBD4的mRNA表达水平无显著差异(P=0.596)。④MBD2与MBD3 mRNA表达水平之间呈正相关,相关性系数为0.326(P=0.011),其余MBDs之间无相关性(均P>0.05)。⑤MBD2与DNMT1、DNMT3A的mRNA表达水平之间均呈正相关,相关性系数分别为0.294(P=0.027)、0.261(P=0.048),其余DNMTs与MBDs的mRNA表达水平之间无相关性(均P>0.05)。结论与正常子宫内膜相比,卵巢子宫内膜异位症患者的在位内膜和异位内膜中DNMTs和MBDs存在mRNA表达水平异常,且各DNMTs之间、MBD2与DNMT1、DNMT3A、MBD3的mRNA表达水平之间均呈正相关,其可能导致DNA甲基化水平的异常,从而参与卵巢子宫内膜异位症的发生。 展开更多
关键词 DNMTs MBDs 卵巢子宫内膜异位症
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子宫内膜间质细胞来源外泌体miRNA表达谱的差异分析 被引量:2
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作者 王礼贤 胡月阳 +2 位作者 李琰 杨漪 康山 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第11期1801-1805,共5页
探究不同来源子宫内膜间质细胞(ESC)外泌体微小RNA(miRNA)表达谱的差异。将40例子宫内膜异位症(EMs)患者(研究组)及40例子宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅲ行子宫手术患者(对照组)ESC原代培养后分离培养基中外泌体,芯片检测两组外泌体miRNA表达谱... 探究不同来源子宫内膜间质细胞(ESC)外泌体微小RNA(miRNA)表达谱的差异。将40例子宫内膜异位症(EMs)患者(研究组)及40例子宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅲ行子宫手术患者(对照组)ESC原代培养后分离培养基中外泌体,芯片检测两组外泌体miRNA表达谱差异,qRT-PCR检测两组外泌体miR-205、miR-542-3p水平;对上调、下调倍数较高miRNA且与EMs相关靶基因进行预测。研究组与对照组ESC外泌体有39种miRNA表达差异有统计学意义(P<0.05),其中上调miRNA有14个,以miR-205上调倍数最高;下调有25个,以miR-542-3p下调倍数最高。qRT-PCR检测ESC外泌体miR-205、miR-542-3p水平与芯片检测倍数差异无统计学意义(P>0.05)。PTEN、FBN1、S100A2等与EMs相关的26种基因被预测为差异表达的miRNA靶基因。EMs患者ESC外泌体中存在多种差异表达的miRNA,且靶向多种EMs相关基因。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 子宫内膜间质细胞 外泌体 微小RNA
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谷胱甘肽硫转移酶mu1基因启动子区异常甲基化与卵巢子宫内膜异位症的关系研究 被引量:2
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作者 王礼贤 李琰 康山 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2021年第24期3082-3086,共5页
背景许多证据表明与正常内膜相比,子宫内膜异位症(EMT)患者的在位内膜和异位内膜中存在许多差异甲基化基因,可能在疾病发生中发挥着重要作用。目的探讨谷胱甘肽硫转移酶mu1(GSTM1)基因启动子区异常甲基化与EMT的关系。方法选取2013年9月... 背景许多证据表明与正常内膜相比,子宫内膜异位症(EMT)患者的在位内膜和异位内膜中存在许多差异甲基化基因,可能在疾病发生中发挥着重要作用。目的探讨谷胱甘肽硫转移酶mu1(GSTM1)基因启动子区异常甲基化与EMT的关系。方法选取2013年9月—2015年12月于河北医科大学第四医院妇科行腹腔镜手术治疗并经病理检查证实为卵巢EMT的患者65例,另选取同期在该院因宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅲ级行全子宫切除术的患者(对照者)53例,术中无菌采集卵巢EMT患者的在位内膜和异位内膜以及对照者的子宫内膜(对照内膜)。采用焦磷酸测序和实时定量荧光聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测内膜组织GSTM1基因启动子区片段一(包含-116、-111、-104、-98 CpG位点)、片段二(包含-40、-23、-16 CpG位点)平均甲基化水平和mRNA表达水平,并分析二者之间的相关性。结果在位内膜和异位内膜片段一平均甲基化水平低于对照内膜(H=2.588,P=0.046;H=6.496,P<0.001),异位内膜片段一平均甲基化水平低于在位内膜(H=4.213,P<0.001)。异位内膜片段二平均甲基化水平低于在位内膜和对照内膜(H=7.693,P<0.001;H=8.257,P<0.001),在位内膜与对照内膜片段二平均甲基化水平比较,差异无统计学意义(H=0.682,P=0.504)。在位内膜和异位内膜mRNA表达水平高于对照内膜(H=6.994,P=0.011;H=3.414,P<0.001),异位内膜mRNA表达水平高于在位内膜(H=3.846,P<0.001)。GSTM1 mRNA表达水平与其启动子区片段一、片段二平均甲基化水平均呈负相关(rs=-0.61,P<0.001;rs=-0.52,P<0.001)。结论卵巢EMT患者的在位内膜和异位内膜呈现GSTM1基因启动子区异常低甲基化和mRNA高表达,提示GSTM1启动子区异常甲基化可能在卵巢EMT的发生和发展中起重要作用。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 GSTM1 甲基化 MRNA表达
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