目的人参皂苷Rh2能抑制多种恶性肿瘤细胞增殖,但缺少Rh2对多药耐药的肝癌细胞的敏感性研究。文中主要探讨人参皂苷Rh2对人肝癌细胞株HepG2/ADM多药耐药性[盐酸多柔比星(ADM)、5-氟尿嘧啶(5-Fu)、顺铂(DDP)、长春新碱(VCR)]的逆转作用及...目的人参皂苷Rh2能抑制多种恶性肿瘤细胞增殖,但缺少Rh2对多药耐药的肝癌细胞的敏感性研究。文中主要探讨人参皂苷Rh2对人肝癌细胞株HepG2/ADM多药耐药性[盐酸多柔比星(ADM)、5-氟尿嘧啶(5-Fu)、顺铂(DDP)、长春新碱(VCR)]的逆转作用及机制。方法 MTT法检测(0~250μg/m L)Rh2对HepG2/ADM细胞活力的影响;MTT法筛选最佳逆转耐药的Rh2浓度。细胞分为空白对照组、ADM组和ADM+40μg/m LRh2组。空白对照组:不加药物处理;ADM组:给予ADM处理48 h;ADM+40μg/m LRh2组:给予40μg/m L的Rh2预处理30 min后,给予ADM处理48 h。流式细胞术检测Rh2对细胞内Rh-123荧光强度的影响;RT-PCR法检测MDR1基因的表达;Western blot检测P-gp、Bax、Bcl-2、cleved caspase-3蛋白水平。结果与HepG2细胞相比,HepG2/ADM对ADM、DDP、5-FU、VCR 4种化疗药物的耐药指数分别为32.95、4.63、4.20、4.81。经过40μg/m L的Rh2作用HepG2/ADM细胞48 h后,耐药细胞对4种化疗药的敏感性增强且IC50明显下降,其耐药性的逆转倍数分别为3.70、3.53、2.64、2.55倍。耐药细胞内储留的Rh-123的荧光强度通过流式细胞仪检测结果显示,与ADM组比较,加入40μg/m L Rh2后,细胞内Rh-123的荧光强度明显增高(65.83±1.78 vs 78.21±1.26,P<0.01)。RT-PCR结果显示,ADM+40μg/m L Rh2组MDR1表达较ADM组显著降低(0.48±0.02 vs 0.86±0.05,P<0.05)。Western blot结果显示,ADM+40μg/m L Rh2组P-gp蛋白水平亦较ADM组明显降低(0.97±0.04 vs 1.91±0.03,P<0.01);ADM+40μg/m L Rh2组Bax和cleaved caspase-3表达较ADM组明显增加(1.76±0.04 vs 1.25±0.02,38.26±5.45 vs 0.42±0.04,P<0.05),同时发现Bcl-2表达明显减少(1.25±0.05 vs 1.86±0.03,P<0.05)。结论人参皂苷Rh2能有效逆转HepG2/ADM细胞的多药耐药性,其作用机制可能与降低MDR1、P-gp表达、增加细胞内药物积累以及介导Bax/Bcl-2信号通路有关。展开更多
目的通过检测生存素、血管内皮生长因子C(VEGF-C)和增殖细胞核抗原(PCNA)在胆管癌中的表达水平,探讨其在胆管癌侵袭和转移中的作用机制。方法采用免疫组化过氧化物酶标记链霉卵白素法(SP)对42例胆管癌组织及20例正常组织中生存素、VEGF-...目的通过检测生存素、血管内皮生长因子C(VEGF-C)和增殖细胞核抗原(PCNA)在胆管癌中的表达水平,探讨其在胆管癌侵袭和转移中的作用机制。方法采用免疫组化过氧化物酶标记链霉卵白素法(SP)对42例胆管癌组织及20例正常组织中生存素、VEGF-C和PCNA进行检测。采用RT-PCR方法检测42例术中新鲜的胆管癌、17例同个体癌旁胆管黏膜和20例正常胆管组织中生存素、VEGF-C和PCNA的mRNA表达。结果生存素、VEGF-C和PCNA在胆管癌组织中表达的阳性率明显高于正常组织。胆管癌组织、癌旁组织、正常胆管组织中生存素mRNA相对表达量分别为0.624±0.080、0.569±0.044 vs 0.568±0.032(P<0.05);VEGF-C mRNA相对表达量分别为0.693±0.108、0.627±0.066 vs 0.611±0.058(P<0.01);PCNA mRNA相对表达量分别为0.630±0.077、0.569±0.041 vs 0.561±0.033(P<0.01);胆管癌组织、癌旁组织、正常胆管组织中生存素mRNA,VEGF-C mRNA和PCNA mRNA相对表达量在3组之间呈下降趋势(P<0.05)。结论生存素、VEGF-C、PCNA蛋白和mRNA在胆管癌组织中呈高表达,这些基因和蛋白表达的改变可能与胆管癌的发生及侵袭、转移等生物学行为密切相关。展开更多
文摘目的人参皂苷Rh2能抑制多种恶性肿瘤细胞增殖,但缺少Rh2对多药耐药的肝癌细胞的敏感性研究。文中主要探讨人参皂苷Rh2对人肝癌细胞株HepG2/ADM多药耐药性[盐酸多柔比星(ADM)、5-氟尿嘧啶(5-Fu)、顺铂(DDP)、长春新碱(VCR)]的逆转作用及机制。方法 MTT法检测(0~250μg/m L)Rh2对HepG2/ADM细胞活力的影响;MTT法筛选最佳逆转耐药的Rh2浓度。细胞分为空白对照组、ADM组和ADM+40μg/m LRh2组。空白对照组:不加药物处理;ADM组:给予ADM处理48 h;ADM+40μg/m LRh2组:给予40μg/m L的Rh2预处理30 min后,给予ADM处理48 h。流式细胞术检测Rh2对细胞内Rh-123荧光强度的影响;RT-PCR法检测MDR1基因的表达;Western blot检测P-gp、Bax、Bcl-2、cleved caspase-3蛋白水平。结果与HepG2细胞相比,HepG2/ADM对ADM、DDP、5-FU、VCR 4种化疗药物的耐药指数分别为32.95、4.63、4.20、4.81。经过40μg/m L的Rh2作用HepG2/ADM细胞48 h后,耐药细胞对4种化疗药的敏感性增强且IC50明显下降,其耐药性的逆转倍数分别为3.70、3.53、2.64、2.55倍。耐药细胞内储留的Rh-123的荧光强度通过流式细胞仪检测结果显示,与ADM组比较,加入40μg/m L Rh2后,细胞内Rh-123的荧光强度明显增高(65.83±1.78 vs 78.21±1.26,P<0.01)。RT-PCR结果显示,ADM+40μg/m L Rh2组MDR1表达较ADM组显著降低(0.48±0.02 vs 0.86±0.05,P<0.05)。Western blot结果显示,ADM+40μg/m L Rh2组P-gp蛋白水平亦较ADM组明显降低(0.97±0.04 vs 1.91±0.03,P<0.01);ADM+40μg/m L Rh2组Bax和cleaved caspase-3表达较ADM组明显增加(1.76±0.04 vs 1.25±0.02,38.26±5.45 vs 0.42±0.04,P<0.05),同时发现Bcl-2表达明显减少(1.25±0.05 vs 1.86±0.03,P<0.05)。结论人参皂苷Rh2能有效逆转HepG2/ADM细胞的多药耐药性,其作用机制可能与降低MDR1、P-gp表达、增加细胞内药物积累以及介导Bax/Bcl-2信号通路有关。
文摘目的通过检测生存素、血管内皮生长因子C(VEGF-C)和增殖细胞核抗原(PCNA)在胆管癌中的表达水平,探讨其在胆管癌侵袭和转移中的作用机制。方法采用免疫组化过氧化物酶标记链霉卵白素法(SP)对42例胆管癌组织及20例正常组织中生存素、VEGF-C和PCNA进行检测。采用RT-PCR方法检测42例术中新鲜的胆管癌、17例同个体癌旁胆管黏膜和20例正常胆管组织中生存素、VEGF-C和PCNA的mRNA表达。结果生存素、VEGF-C和PCNA在胆管癌组织中表达的阳性率明显高于正常组织。胆管癌组织、癌旁组织、正常胆管组织中生存素mRNA相对表达量分别为0.624±0.080、0.569±0.044 vs 0.568±0.032(P<0.05);VEGF-C mRNA相对表达量分别为0.693±0.108、0.627±0.066 vs 0.611±0.058(P<0.01);PCNA mRNA相对表达量分别为0.630±0.077、0.569±0.041 vs 0.561±0.033(P<0.01);胆管癌组织、癌旁组织、正常胆管组织中生存素mRNA,VEGF-C mRNA和PCNA mRNA相对表达量在3组之间呈下降趋势(P<0.05)。结论生存素、VEGF-C、PCNA蛋白和mRNA在胆管癌组织中呈高表达,这些基因和蛋白表达的改变可能与胆管癌的发生及侵袭、转移等生物学行为密切相关。
