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黄芪多糖对LPS诱导流产大鼠子宫巨噬细胞的影响及机制研究 被引量:11
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作者 郑燕 王娜 +2 位作者 刘静乔 孟亚丽 冯艳萍 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1174-1177,1182,共5页
目的:探讨黄芪多糖对细菌脂多糖(LPS)诱导流产大鼠子宫巨噬细胞的影响及机制。方法:36只妊娠大鼠根据随机数字法分为对照组、模型组(LPS处理组)和黄芪多糖组(LPS+黄芪多糖处理组),每组12只。采用免疫组织化学染色法测定各组大鼠子宫CD14... 目的:探讨黄芪多糖对细菌脂多糖(LPS)诱导流产大鼠子宫巨噬细胞的影响及机制。方法:36只妊娠大鼠根据随机数字法分为对照组、模型组(LPS处理组)和黄芪多糖组(LPS+黄芪多糖处理组),每组12只。采用免疫组织化学染色法测定各组大鼠子宫CD14+巨噬细胞,采用酶组织化学法测定子宫非特异性酯酶阳性(α-NAE+)细胞,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定子宫单核细胞趋化蛋白(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果:对照组、模型组、黄芪多糖组大鼠胚胎吸收率和流产率比较差异有统计学意义(P<0.05),模型组和黄芪多糖组大鼠胚胎吸收率和流产率高于对照组,黄芪多糖组大鼠胚胎吸收率和流产率低于模型组。模型组和黄芪多糖组大鼠环肌外层、环肌内层和功能层CD14+巨噬细胞和α-NAE+巨噬细胞高于对照组(P<0.05),黄芪多糖组大鼠环肌外层、环肌内层和功能层CD14+巨噬细胞和α-NAE+巨噬细胞低于模型组(P<0.05)。模型组和黄芪多糖组大鼠MCP-1、TNF-α含量高于对照组(P<0.05),黄芪多糖组大鼠MCP-1、TNF-α含量低于模型组(P<0.05)。结论:黄芪多糖通过影响子宫巨噬细胞对LPS诱导的大鼠流产具有保护作用,其机制可能为黄芪多糖抑制MCP-1生成,MCP-1调节巨噬细胞的分布和数量,阻止TNF-α过量生成,从而对子宫局部免疫微环境发挥调节作用。 展开更多
关键词 黄芪多糖 细菌脂多糖 流产 大鼠 巨噬细胞
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宫颈癌HeLa细胞外泌体对细胞迁移和侵袭的影响及其Wnt/β-catenin信号通路机制 被引量:3
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作者 刘晶 王景 +5 位作者 葛静 冯艳萍 房桂英 王旭 杨艳红 李林 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期798-803,I0006,共7页
目的:探讨宫颈癌HeLa细胞外泌体对细胞迁移、侵袭及Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的影响,阐明其外泌体在宫颈癌发生发展过程中的可能作用机制。方法:取对数生长期宫颈癌HeLa细胞,采用超速离心法分离宫颈癌HeLa细胞外泌体,透射电... 目的:探讨宫颈癌HeLa细胞外泌体对细胞迁移、侵袭及Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的影响,阐明其外泌体在宫颈癌发生发展过程中的可能作用机制。方法:取对数生长期宫颈癌HeLa细胞,采用超速离心法分离宫颈癌HeLa细胞外泌体,透射电镜下观察外泌体形态表现,Western blotting法检测外泌体标志蛋白CD63和CD81的表达,鉴定分离出来的外泌体。将HeLa细胞分为外泌体组(Exo组)和对照组,2组细胞分别用含和不含HeLa细胞外泌体的培养基培养。共聚焦显微镜下观察HeLa细胞摄取外泌体情况,其中外泌体采用PKH26荧光标记,HeLa细胞用DAPI荧光进行核染色,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,细胞划痕实验测定细胞迁移能力,Western blotting法检测细胞中Wnt1、β-catenin和T细胞因子4(TCF4)蛋白表达水平。结果:透射电镜下观察,HeLa细胞中分离的外泌体为是圆形或椭圆形、直径为40~100 nm的囊泡状小体,且富含CD63和CD81蛋白。共聚焦显微镜下观察,Exo组HeLa细胞膜表面有外泌体附着,而对照组HeLa细胞膜表面无外泌体附着。Transwell小室实验,Exo组HeLa细胞中侵袭细胞数明显高于对照组(t=17.894,P<0.01)。细胞划痕实验,Exo组HeLa细胞迁移距离明显长于对照组(t=9.689,P<0.01)。Western blotting法检测,与对照组比较,Exo组HeLa细胞中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白Wnt1、β-catenin和TCF4蛋白表达水平均明显升高(t=13.159,P<0.01;t=15.478,P<0.01;t=7.734,P<0.01)。结论:宫颈癌HeLa细胞来源的外泌体可促进宫颈癌细胞的侵袭和迁移能力,其机制可能与HeLa细胞来源外泌体可促进Wnt/β-catenin信号通路的激活及下游TCF4基因的表达有关。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 外泌体 细胞迁移 细胞侵袭 Wnt/β-连环蛋白信号通路 T细胞因子4
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LncRNA CCAT1在子宫内膜癌组织的表达意义以及雷公藤甲素的干预作用 被引量:6
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作者 李林 魏旭静 +2 位作者 代丽丽 路素双 刘晶(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第15期1853-1857,共5页
目的:观察雷公藤甲素对子宫内膜癌组织中长链非编码RNA结肠癌相关转录子1(LncRNA-CCAT1)表达的影响,探讨其在子宫内膜癌组织中的表达意义。方法:C57BL/6小鼠接种子宫内膜癌瘤HEC-1A细胞制备荷子宫内膜癌小鼠模型,成瘤后取40只小鼠随机... 目的:观察雷公藤甲素对子宫内膜癌组织中长链非编码RNA结肠癌相关转录子1(LncRNA-CCAT1)表达的影响,探讨其在子宫内膜癌组织中的表达意义。方法:C57BL/6小鼠接种子宫内膜癌瘤HEC-1A细胞制备荷子宫内膜癌小鼠模型,成瘤后取40只小鼠随机分为模型组、低剂量雷公藤甲素组(25μg/kg)、中剂量雷公藤甲素组(50μg/kg)和高剂量雷公藤甲素组(100μg/kg)。给药15 d后取小鼠肿瘤组织称重,计算抑瘤率;HE染色观察肿瘤组织形态;TUNEL染色观察肿瘤组织细胞凋亡情况;免疫组织化学法检测肿瘤组织caspase-3蛋白表达水平,定量聚合酶链反应(qPCR)检测肿瘤组织LncRNA CCAT1表达水平。结果:模型组肿瘤组织血管丰富,细胞生长密集,排列不规则;低、中、高剂量雷公藤甲素组小鼠肿瘤组织内血管减少,结构破坏,细胞出现不同程度坏死。与模型组比较,低、中、高剂量雷公藤甲素组小鼠肿瘤组织质量均明显减轻(P<0.05),抑瘤率均明显升高(P<0.05),凋亡细胞数均明显增加(P<0.05),肿瘤组织caspase-3蛋白表达水平均明显升高(P<0.05),LncRNA CCAT1表达水平均明显降低(P<0.05),呈剂量依赖性。结论:雷公藤甲素可通过降低LncRNA-CCAT1表达,下调caspase-3蛋白表达,促进肿瘤细胞凋亡,对荷子宫内膜癌小鼠移植瘤生长起抑制作用。 展开更多
关键词 LncRNA-CCAT1 子宫内膜癌 雷公藤甲素 细胞凋亡
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miR-19通过靶向PTEN调节PI3K-Akt通路促进子宫内膜癌KLE细胞的侵袭和迁移 被引量:3
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作者 代丽丽 陈丽娜 +3 位作者 蔡丽娜 葛静 刘晶 陈然 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1107-1112,共6页
目的:分析miR-19对PTEN及PI3K-Akt通路的调节作用,揭示miR-19和PTEN对子宫内膜癌KLE细胞侵袭、迁移的影响及其机制。方法:收集2017年5月至2020年8月河北医科大学第一医院收治的74例子宫内膜癌患者经手术切除(术前未接受放化疗等治疗)且... 目的:分析miR-19对PTEN及PI3K-Akt通路的调节作用,揭示miR-19和PTEN对子宫内膜癌KLE细胞侵袭、迁移的影响及其机制。方法:收集2017年5月至2020年8月河北医科大学第一医院收治的74例子宫内膜癌患者经手术切除(术前未接受放化疗等治疗)且病理确诊为子宫内膜癌的肿瘤组织及对应癌旁组织,采用qPCR和WB法检测PTEN在子宫内膜癌组织中的表达水平以及转染miR-19模拟物或抑制物对KLE细胞中PTEN表达的影响。通过TargetScan及双荧光素酶报告基因实验预测并验证PTEN是否为miR-19的靶基因,将KLE细胞随机分为对照(NC)组、miR-19模拟物组和miR-19+PTEN组,分别转染阴性对照片段(miR-NC)、miR-19模拟物或共转染miR-19模拟物+PTEN过表达载体,采用Transwell和细胞划痕实验检测miR-19和PTEN对KLE细胞迁移和侵袭能力的影响,WB法检测对PI3K-Akt通路相关蛋白表达的影响。结果:子宫内膜癌组织中PTEN的mRNA和蛋白表达水平均明显低于癌旁组织(均P<0.01)。miR-19能与PTEN mRNA的3’-UTR特异性结合,上调miR-19的表达能抑制PTEN的mRNA和蛋白的表达,下调miR-19的表达则出现相反的结果(均P<0.01)。与miR-NC组相比,miR-19模拟物组的迁移、侵袭细胞数以及划痕愈合率均显著升高(均P<0.01),而miR-19+PTEN组的细胞迁移和侵袭能力以及划痕愈合率较miR-19摸拟物组则明显降低(均P<0.01);与miR-NC组相比,miR-19模拟物组中PTEN蛋白的表达明显降低,而p-Akt 308和p-Akt 473蛋白的表达明显升高,Akt蛋白的表达无明显变化(均P<0.01);而在miR-19+PTEN组中,p-Akt 308和p-Akt 473蛋白的表达均明显低于miR-19模拟物组(均P<0.01)。结论:miR-19可能通过抑制PTEN的表达从而活化PI3K-Akt通路,进而促进子宫内膜癌KLE细胞的迁移和侵袭。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 miR-19 PTEN KLE细胞 PI3K-Akt通路
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LncRNA CCAT1通过PI3K/AKT信号通路影响子宫内膜癌细胞的增殖和凋亡 被引量:8
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作者 李林 刘晶 +1 位作者 王景 杨睿 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第22期2737-2741,共5页
目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)CCAT1对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路影响,阐明CCAT1在子宫内膜癌生长中的作用及可能机制。方法:将HEC-1-A细胞分为空白对照组(BC)、阴性对照组(NC)和CCAT1... 目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)CCAT1对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路影响,阐明CCAT1在子宫内膜癌生长中的作用及可能机制。方法:将HEC-1-A细胞分为空白对照组(BC)、阴性对照组(NC)和CCAT1-siRNA组,CCAT1-siRNA组细胞转染CCAT1-siRNA,NC组转染阴性对照siRNA,BC组不转染。RT-PCR测定细胞中CCAT1水平。CCK8测定HEC-1-A细胞增殖情况。流式细胞术测定HEC-1-A细胞凋亡。Western blot测定HEC-1-A细胞PCNA、活化的cleaved caspase 3、Bax、Bcl-2、PI3K、AKT、p-AKT蛋白水平。结果:HEC-1-A细胞中CCAT1水平(2.15±0.24)高于T-HESC细胞(1.00±0.13)(t=11.147,P<0.001)。与BC组和NC组相比,CCAT1-siRNA组HEC-1-A细胞中CCAT1水平降低(P<0.001),细胞增殖率降低(P<0.001),细胞凋亡率降低(F=112.080,P<0.001),PCNA和Bcl-2蛋白水平降低(P<0.001),cleaved caspase 3和Bax蛋白水平升高(P<0.001),PI3K和p-AKT蛋白水平降低(P<0.001)。BC组和NC组HEC-1-A细胞中各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:沉默子宫内膜癌细胞中CCAT1可抑制细胞增殖、促进细胞凋亡,其机制可能与沉默CCAT1可抑制PI3K/AKT信号通路有关。 展开更多
关键词 长链非编码RNA CCAT1 子宫内膜癌 增殖 凋亡 磷脂酰肌醇3-激酶 蛋白激酶B
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整合素连接激酶在子宫内膜癌组织中的表达及其对细胞迁移和侵袭能力的影响 被引量:2
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作者 葛静 谢磊 +3 位作者 李林 魏旭静 陈然 王娜 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期1011-1015,I0005,共6页
目的:观察子宫内膜癌患者癌组织中整合素连接激酶(ILK)的表达水平,通过体外细胞实验探讨其对子宫内膜癌细胞迁移和侵袭能力的影响,并阐明其作用机制。方法:采用免疫组织化学SP法检测29例子宫内膜癌患者癌组织和癌旁组织细胞中ILK阳性表... 目的:观察子宫内膜癌患者癌组织中整合素连接激酶(ILK)的表达水平,通过体外细胞实验探讨其对子宫内膜癌细胞迁移和侵袭能力的影响,并阐明其作用机制。方法:采用免疫组织化学SP法检测29例子宫内膜癌患者癌组织和癌旁组织细胞中ILK阳性表达率。分别将ILK siRNA和siRNA control转染至子宫内膜癌HEC-1B细胞作为干扰组和空载组,以不作处理的细胞作为对照组;采用Western blotting法检测HEC-1B细胞中ILK、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)和磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β)蛋白表达水平,细胞划痕实验检测细胞迁移距离,Transwell小室法检测侵袭细胞数。结果:29例子宫内膜癌患者癌组织中ILK阳性表达率为79.3%,癌旁组织中ILK阳性表达率为10.3%,子宫内膜癌组织中ILK阳性表达率明显高于癌旁组织(P<0.05)。与对照组和空载组比较,干扰组HEC-1B细胞中ILK、p-Akt和p-GSK-3β蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Akt和GSK-3β蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05);细胞划痕实验,与对照组和空载组比较,干扰组HEC-1B细胞迁移距离明显缩短(P<0.05),侵袭细胞数明显减少(P<0.05)。结论:ILK在子宫内膜癌组织中呈高水平表达,干扰ILK表达能够降低子宫内膜癌细胞的迁移和侵袭能力,其作用机制可能与其抑制Akt和GSK-3β蛋白磷酸化有关。 展开更多
关键词 整合素连接激酶 子宫内膜癌 细胞迁移 细胞侵袭
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LncRNA CCAT1通过MAPK/ERK通路影响子宫内膜癌细胞的侵袭转移 被引量:5
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作者 李林 魏旭静 +1 位作者 路素双 刘晶 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1477-1481,共5页
目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)CCAT1对子宫内膜癌细胞侵袭迁移和丝裂原活化激酶/胞外信号调节激酶(MAPK/ERK)信号通路影响,阐明CCAT1在子宫内膜癌侵袭迁移中的作用及可能机制。方法:将KLE细胞分为空白对照组(BC组)、阴性对照组(NC组)... 目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)CCAT1对子宫内膜癌细胞侵袭迁移和丝裂原活化激酶/胞外信号调节激酶(MAPK/ERK)信号通路影响,阐明CCAT1在子宫内膜癌侵袭迁移中的作用及可能机制。方法:将KLE细胞分为空白对照组(BC组)、阴性对照组(NC组)、CCAT1-siRNA组和CCAT1-siRNA+EGF组,CCAT1-siRNA组转染CCAT1-siRNA,CCAT1-siR-NA+EGF组转染CCAT1-si RNA并加入30 ng/ml EGF处理,NC组转染阴性对照si RNA,BC组不转染。实时荧光RT-PCR测定细胞中CCAT1水平,采用Transwell测定KLE细胞侵袭能力,采用划痕实验测定KLE细胞迁移能力,采用Western blot测定各组KLE细胞上皮钙黏蛋白(E-cadhrein)、波纹蛋白(Vimentin)、锌指蛋白转录因子(Snail)、扭曲蛋白(Twist)、ERK和磷酸化ERK(p-ERK)蛋白水平。结果:KLE细胞中CCAT1水平(1.83±0.17)高于T-HESC细胞(1.00±0.09)(t=11.416,P<0.001)。与BC组(1.00±0.11)和NC组(0.98±0.09)比较,CCAT1-si RNA组KLE细胞中CCAT1水平(0.37±0.08)降低(F=101.237,P<0.001)。与BC组和NC组比较,CCAT1-si RNA组KLE细胞侵袭细胞数降低(P<0.05),细胞迁移距离降低(P<0.05),E-cadhrein蛋白水平升高(P<0.05),Vimentin、Snail、Twist和p-ERK蛋白水平降低(P<0.05)。与CCAT1-si RNA组比较,CCAT1-si RNA+EGF组KLE细胞侵袭细胞数升高(P<0.05),细胞迁移距离升高(P<0.05),E-cadhrein蛋白水平降低(P<0.05),Vimentin、Snail、Twist和p-ERK蛋白水平升高(P<0.05),BC组和NC组KLE细胞各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:沉默CCAT1可抑制子宫内膜癌细胞侵袭和迁移,其机制可能与沉默CCAT1可抑制MAPK/ERK信号通路有关。 展开更多
关键词 长链非编码RNA CCAT1 子宫内膜癌 侵袭 迁移 丝裂原活化激酶 胞外信号调节激酶
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miR-218-5p靶向VEGFA基因促进宫颈癌HeLa细胞凋亡并抑制迁移 被引量:7
8
作者 王旭 徐静 +1 位作者 王笑笑 杜亚飞 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第15期1878-1883,共6页
目的探究miR-218-5p靶向VEGFA基因对宫颈癌HeLa细胞凋亡和迁移的影响。方法培养宫颈癌细胞HeLa,细胞分为miR-NC组、miR-218-5p组、si-NC组、si-VEGFA组、miR-NC+pcDNA-VEGFA组、miR-218-5p+pcDNA-VEGFA组。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测... 目的探究miR-218-5p靶向VEGFA基因对宫颈癌HeLa细胞凋亡和迁移的影响。方法培养宫颈癌细胞HeLa,细胞分为miR-NC组、miR-218-5p组、si-NC组、si-VEGFA组、miR-NC+pcDNA-VEGFA组、miR-218-5p+pcDNA-VEGFA组。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-218-5p和VEGFA mRNA表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡;Transwell检测细胞迁移;蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bax、基质金属蛋白酶(MMP2)、MMP9蛋白表达;双荧光素酶报告实验检测miR-218-5p和VEGFA的靶向关系。结果与正常宫颈上皮细胞NC104比较,宫颈癌细胞HeLa、CaSki、C33A、SiHa中miR-218-5p表达降低,VEGFA mRNA表达升高(P<0.05)。与miR-NC组比较,细胞凋亡率升高,细胞迁移数降低(P<0.05)。与si-NC组比较,si-VEGFA组细胞凋亡率升高,细胞迁移数降低(P<0.05)。miR-218-5p靶向调控VEGFA表达,上调VEGFA表达可以逆转miR-218-5p过表达对宫颈癌细胞凋亡和迁移的影响(P<0.05)。结论miR-218-5p靶向VEGFA基因促进宫颈癌HeLa细胞凋亡并抑制迁移。 展开更多
关键词 miR-218-5p VEGFA 宫颈癌 凋亡 迁移
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胎儿肱骨头皮下软组织厚度、胎盘重量、新生儿脐血瘦素水平与体重的相关性研究
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作者 王玲 张霞 +1 位作者 邓彦东 张红真 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期1213-1214,1217,共3页
目的研究足月胎儿肱骨头皮下软组织厚度(HSTT)、胎盘重量、新生儿脐血瘦素水平与新生儿体重的关系。方法取51例正常妊娠妇女,根据其新生儿出生体重分为大于胎龄儿(LGA)15例、适于胎龄儿(AGA)26例和小于胎龄儿(SGA)10例。产前行B超测量... 目的研究足月胎儿肱骨头皮下软组织厚度(HSTT)、胎盘重量、新生儿脐血瘦素水平与新生儿体重的关系。方法取51例正常妊娠妇女,根据其新生儿出生体重分为大于胎龄儿(LGA)15例、适于胎龄儿(AGA)26例和小于胎龄儿(SGA)10例。产前行B超测量足月胎儿HSTT;产后采用放射免疫法检测脐血瘦素水平,同时测量胎盘重量、新生儿体重等4项指标。结果(1)同AGA组相比,LGA组和SGA组的足月胎儿HSTT和脐血瘦素水平均明显增厚(升高)和变薄(降低),除AGA组与SGA组的脐血瘦素水平无统计学差异(P>0.05)外,余指标3组间两两比较均有统计学差别(P<0.01)。(2)足月胎儿HSTT、胎盘重量、新生儿脐血瘦素水平与新生儿体重4项指标间均呈明显正相关。结论B超测定足月胎儿HSTT可预测新生儿体重;足月胎儿HSTT、胎盘重量、新生儿脐血瘦素水平与新生儿体重4项指标间均存在明显正相关。 展开更多
关键词 肱骨头 皮下软组织厚度 胎盘 瘦素 新生儿 体重 B超
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微波子宫内膜去除术治疗月经过多的临床应用
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作者 张霞 王惠兰 +2 位作者 陈素琴 杨玉风 孙秀芝 《中国微创外科杂志》 CSCD 2004年第2期119-120,共2页
目的 评价微波子宫内膜去除术 (microwaveandometrialablation ,MEA)治疗月经过多的临床疗效、安全性。 方法  5 7例绝经前无生育要求的良性疾患所致月经过多患者行MEA治疗。 结果 手术时间 119~ 4 2 0s,平均 2 96 7s。半年闭... 目的 评价微波子宫内膜去除术 (microwaveandometrialablation ,MEA)治疗月经过多的临床疗效、安全性。 方法  5 7例绝经前无生育要求的良性疾患所致月经过多患者行MEA治疗。 结果 手术时间 119~ 4 2 0s,平均 2 96 7s。半年闭经率为 5 6 1% (32 / 5 7) ,经期由术前的 (13 5± 8 1)d降到术后的 (2 3± 4 1)d(t=12 6 88,P <0 0 1) ;血红蛋白术前 (84 8± 2 1 9)g/L ,术后 3个月升至 (115 1± 19 1)g/L(t=- 10 331,P <0 0 1)。 结论 MEA治疗月经过多操作简单 ,无须麻醉 ,疗效显著 ,并发症少 ,尤其对伴有严重内科疾病者能替代传统的子宫切除术。 展开更多
关键词 微波子宫内膜去除术 月经过多 术前内膜薄化 刮宫
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盐酸小檗碱对宫颈癌HeLa细胞外泌体的影响及其机制 被引量:6
11
作者 王景 葛静 +3 位作者 王旭 房桂英 代丽丽 刘晶 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期779-785,I0005,共8页
目的:观察盐酸小檗碱对宫颈癌HeLa细胞释放外泌体的干预作用,探讨其对癌细胞增殖和转移能力的影响。方法:将HeLa细胞分为对照组和低、中、高剂量盐酸小檗碱组,分别采用0、10、20和40 mg·L-1盐酸小檗碱干预HeLa细胞24 h,高速离心提... 目的:观察盐酸小檗碱对宫颈癌HeLa细胞释放外泌体的干预作用,探讨其对癌细胞增殖和转移能力的影响。方法:将HeLa细胞分为对照组和低、中、高剂量盐酸小檗碱组,分别采用0、10、20和40 mg·L-1盐酸小檗碱干预HeLa细胞24 h,高速离心提取外泌体,Western blotting法检测外泌体标志物CD81和CD63及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(Akt)信号通路相关蛋白表达水平,MTT比色法检测细胞体外生长抑制率,划痕实验检测细胞迁移率,Transwell小室实验检测穿膜细胞数。结果:与对照组比较,低、中和高剂量盐酸小檗碱组细胞外泌体中外泌体标志物CD81和CD63蛋白表达水平明显降低(P<0.05),细胞生长抑制率明显升高(P<0.05),细胞迁移率和穿膜细胞数明显降低(P<0.05),细胞中PI3K、Akt和磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。与低剂量盐酸小檗碱组比较,中和高剂量盐酸小檗碱组细胞外泌体中CD81和CD63蛋白表达水平明显降低(P<0.05),细胞生长抑制率明显升高(P<0.05),细胞迁移率和穿膜细胞数明显降低(P<0.05),细胞中PI3K、Akt和p-Akt蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。与中剂量盐酸小檗碱组比较,高剂量盐酸小檗碱组细胞外泌体中CD81和CD63蛋白表达水平明显降低(P<0.05),细胞生长抑制率明显升高(P<0.05),细胞迁移率和穿膜细胞数明显降低(P<0.05),细胞中PI3K、Akt和p-Akt蛋白表达水平明显降低(P<0.05),具有浓度依赖性。结论:盐酸小檗碱能够抑制宫颈癌细胞外泌体分泌和癌细胞增殖,降低癌细胞的侵袭和转移能力,其作用机制可能与下调PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达有关。 展开更多
关键词 盐酸小檗碱 外泌体 宫颈肿瘤 磷脂酰肌醇3-激酶 蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶 信号通路
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冬凌草甲素对子宫内膜癌HEC-1B细胞增殖、迁移和侵袭及lncRNA CCAT1表达的影响 被引量:4
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作者 王景 刘晶 +3 位作者 魏旭静 杜亚飞 房桂英 李林 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期384-389,共6页
目的:探讨冬凌草甲素对子宫内膜癌HEC-1B细胞增殖、迁移和侵袭的影响,阐明其可能机制。方法:取对数生长期的子宫内膜癌HEC-1B细胞分为对照组(DMSO培养液)、阳性对照组(2.5 mg·L~(-1)顺铂)、低剂量(10μmol·L~(-1))冬凌草甲素... 目的:探讨冬凌草甲素对子宫内膜癌HEC-1B细胞增殖、迁移和侵袭的影响,阐明其可能机制。方法:取对数生长期的子宫内膜癌HEC-1B细胞分为对照组(DMSO培养液)、阳性对照组(2.5 mg·L~(-1)顺铂)、低剂量(10μmol·L~(-1))冬凌草甲素组、中剂量(20μmol·L~(-1))冬凌草甲素组和高剂量(40μmol·L~(-1))冬凌草甲素组。采用MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell小室实验检测HEC-1B细胞侵袭能力,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测各组HEC-1B细胞中长链非编码RNA (lncRNA)结肠癌相关转录因子1 (CCAT1)表达水平。结果:与对照组比较,阳性对照组和低、中及高剂量冬凌草甲素组HEC-1B细胞凋亡率明显升高(P<0.05);细胞划痕愈合率和穿膜细胞数均明显降低(P<0.05);HEC-1B细胞中lncRNA CCAT1表达水平明显降低(P<0.05)。与低剂量冬凌草甲素组比较,中和高剂量冬凌草甲素组HEC-1B细胞凋亡率明显升高(P<0.05),细胞划痕愈合率和穿膜细胞数均明显降低(P<0.05),HEC-1B细胞中lncRNA CCAT1表达水平明显降低(P<0.05)。与中剂量冬凌草甲素组比较,高剂量冬凌草甲素组HEC-1B细胞凋亡率明显升高(P<0.05),细胞划痕愈合率和穿膜细胞数均明显降低(P<0.05),HEC-1B细胞中lncRNA CCAT1表达水平明显降低(P<0.05)。结结论论:冬凌草甲素可以抑制癌细胞增殖、迁移和侵袭,促进子宫内膜癌HEC-1B细胞凋亡,其作用机制可能与下调lncRNA CCAT1表达水平有关。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 lncRNA CCAT1 子宫内膜癌 细胞迁移 细胞侵袭
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