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miR-181a通过调控Smad7对COPD大鼠气道重塑的作用研究
被引量：
8
1
作者
王雅杰
王嘉
+2 位作者
岳洪娟
窦亚平
李娜
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2021年第9期1379-1385,共7页
目的探讨微小RNA-181a(miR-181a)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠肺组织中气道重塑的作用及其可能的机制。方法80只大鼠随机取65只建立COPD模型,建模成功56只,随机分为模型组、mimics组、inhibitors组、NC组各14只,剩余15只为假手术...
目的探讨微小RNA-181a(miR-181a)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠肺组织中气道重塑的作用及其可能的机制。方法80只大鼠随机取65只建立COPD模型,建模成功56只,随机分为模型组、mimics组、inhibitors组、NC组各14只,剩余15只为假手术组。建模2 h后,mimics组、inhibitors组和NC组分别尾静脉注射miR-181a mimics、miR-181a inhibitors和control mimics,假手术组和模型组注射生理盐水。干预24 h后取材,RT-qPCR检测肺组织miR-181a、母亲信号蛋白同源物7(Smad7)mRNA相对表达水平,ELISA法检测肺组织匀浆白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,荧光素酶报告基因分析miR-181a对Smad7的靶向性,HE染色观察大鼠肺组织病理学变化,测量支气管壁及支气管壁胶原纤维厚度,Western blot检测肺组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad7、p-Smad7蛋白相对表达水平。结果与假手术组比较,模型组、NC组和inhibitors组肺组织miR-181a相对表达水平降低,mimics组肺组织miR-181a相对表达水平升高,且mimics组>模型组和NC组>inhibitors组(P<0.05)。与假手术组比较,模型组、NC组、mimics组、inhibitors组肺组织匀浆IL-1β、TNF-α水平升高,且mimics组>模型组和NC组>mimics组(P<0.05)。双荧光素酶报告基因分析系统结果显示,miR-181a可显著抑制野生型Smad7相对荧光素酶活性(P<0.05),而对突变型Smad7相对荧光素酶活性无显著影响(P>0.05)。HE染色显示,假手术组大鼠肺泡细胞正常,模型组、NC组和inhibitors组大鼠肺实质破坏,有炎性细胞浸润和胶原纤维形成。mimics组肺泡细胞趋于正常,炎症减轻,胶原纤维减少,肺泡结构紊乱明显好转。与假手术组比较,模型组、NC组、mimics组、inhibitors组支气管壁和支气管壁胶原纤维厚度增加,且inhibitors组>模型组和NC组>mimics组(P<0.05)。与假手术组比较,模型组、NC组、mimics组和inhibitors组肺组织TGF-β1、MMP-9蛋白相对表达水平升高,p-Smad7蛋白相对表达水平降低,且TGF-β1、MMP-9蛋白相对表达水平inhibitors组>模型组和NC组>mimics组,p-Smad7蛋白相对表达mimics组>模型组和NC组>inhibitors组(P<0.05)。模型组和NC组之间的肺组织miR-181a相对表达水平,IL-1β、TNF-α水平,支气管壁和支气管壁胶原纤维厚度,MMP-9、p-Smad7、TGF-β1蛋白相对表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论miR-181a对COPD模型大鼠肺组织中气道重塑有改善作用,可能通过靶向调控Smad7表达发挥作用。
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关键词
微小RNA-181a
慢性阻塞性肺疾病
气道重塑
SMAD7
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职称材料
题名
miR-181a通过调控Smad7对COPD大鼠气道重塑的作用研究
被引量：
8
1
作者
王雅杰
王嘉
岳洪娟
窦亚平
李娜
机构
河北医科大学第一医院呼吸与危重症医学科
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2021年第9期1379-1385,共7页
基金
河北省卫健委医学科学研究项目(编号:20190042)。
文摘
目的探讨微小RNA-181a(miR-181a)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠肺组织中气道重塑的作用及其可能的机制。方法80只大鼠随机取65只建立COPD模型,建模成功56只,随机分为模型组、mimics组、inhibitors组、NC组各14只,剩余15只为假手术组。建模2 h后,mimics组、inhibitors组和NC组分别尾静脉注射miR-181a mimics、miR-181a inhibitors和control mimics,假手术组和模型组注射生理盐水。干预24 h后取材,RT-qPCR检测肺组织miR-181a、母亲信号蛋白同源物7(Smad7)mRNA相对表达水平,ELISA法检测肺组织匀浆白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,荧光素酶报告基因分析miR-181a对Smad7的靶向性,HE染色观察大鼠肺组织病理学变化,测量支气管壁及支气管壁胶原纤维厚度,Western blot检测肺组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad7、p-Smad7蛋白相对表达水平。结果与假手术组比较,模型组、NC组和inhibitors组肺组织miR-181a相对表达水平降低,mimics组肺组织miR-181a相对表达水平升高,且mimics组>模型组和NC组>inhibitors组(P<0.05)。与假手术组比较,模型组、NC组、mimics组、inhibitors组肺组织匀浆IL-1β、TNF-α水平升高,且mimics组>模型组和NC组>mimics组(P<0.05)。双荧光素酶报告基因分析系统结果显示,miR-181a可显著抑制野生型Smad7相对荧光素酶活性(P<0.05),而对突变型Smad7相对荧光素酶活性无显著影响(P>0.05)。HE染色显示,假手术组大鼠肺泡细胞正常,模型组、NC组和inhibitors组大鼠肺实质破坏,有炎性细胞浸润和胶原纤维形成。mimics组肺泡细胞趋于正常,炎症减轻,胶原纤维减少,肺泡结构紊乱明显好转。与假手术组比较,模型组、NC组、mimics组、inhibitors组支气管壁和支气管壁胶原纤维厚度增加,且inhibitors组>模型组和NC组>mimics组(P<0.05)。与假手术组比较,模型组、NC组、mimics组和inhibitors组肺组织TGF-β1、MMP-9蛋白相对表达水平升高,p-Smad7蛋白相对表达水平降低,且TGF-β1、MMP-9蛋白相对表达水平inhibitors组>模型组和NC组>mimics组,p-Smad7蛋白相对表达mimics组>模型组和NC组>inhibitors组(P<0.05)。模型组和NC组之间的肺组织miR-181a相对表达水平,IL-1β、TNF-α水平,支气管壁和支气管壁胶原纤维厚度,MMP-9、p-Smad7、TGF-β1蛋白相对表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论miR-181a对COPD模型大鼠肺组织中气道重塑有改善作用,可能通过靶向调控Smad7表达发挥作用。
关键词
微小RNA-181a
慢性阻塞性肺疾病
气道重塑
SMAD7
Keywords
microRNA-181a
chronic obstructive pulmonary disease
airway remodeling
Smad7
分类号
R563 [医药卫生—呼吸系统]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
miR-181a通过调控Smad7对COPD大鼠气道重塑的作用研究
王雅杰
王嘉
岳洪娟
窦亚平
李娜
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2021
8
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