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His-tag不影响RSV重组蛋白G1F/M2的免疫原性 被引量:9
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作者 曾瑞红 王卫华 +3 位作者 房桂珍 龚伟 梅兴国 魏林 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1066-1070,共5页
目的:观察His-tag是否影响RSV重组蛋白G1F/M2的免疫原性。方法:PCR扩增G1和F/M2基因片段,插入表达载体pET-His和pET-DsbA-His中,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,采用Ni+螯合亲和层析法纯化得His-G1F/M2和DsbA-His-G1F/M2,将后者用... 目的:观察His-tag是否影响RSV重组蛋白G1F/M2的免疫原性。方法:PCR扩增G1和F/M2基因片段,插入表达载体pET-His和pET-DsbA-His中,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,采用Ni+螯合亲和层析法纯化得His-G1F/M2和DsbA-His-G1F/M2,将后者用凝血酶消化,再经Ni+螯合亲和层析法纯化得G1F/M2,将His-G1F/M2和G1F/M2免疫BALB/c小鼠,用ELISA测定抗体滴度,MTT法测定细胞毒性T细胞活性(CTL)。结果:两种蛋白在BALB/c小鼠中诱导的RSV特异性抗体和CTL活性无显著差异。结论:His-tag不影响RSV重组蛋白G1F/M2的免疫原性。 展开更多
关键词 呼吸道合胞病毒 HIS-TAG 重组蛋白G1F/M2 免疫原性
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UPLC-MS/MS法同时测定贞芪扶正胶囊中10种成分 被引量:12
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作者 房桂珍 刘笑 +4 位作者 沈云云 莫海莹 刘保霞 李瑞宏 祁金龙 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1398-1402,共5页
目的建立UPLC-MS/MS法同时测定贞芪扶正胶囊(女贞子和黄芪)中腺苷、红景天苷、绿原酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、特女贞苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、槲皮素、芹菜素、黄芪甲苷的含有量。方法该药物甲醇提取液的分析采用Inertsutain C18色谱柱... 目的建立UPLC-MS/MS法同时测定贞芪扶正胶囊(女贞子和黄芪)中腺苷、红景天苷、绿原酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、特女贞苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、槲皮素、芹菜素、黄芪甲苷的含有量。方法该药物甲醇提取液的分析采用Inertsutain C18色谱柱(75 mm×3.0 mm,2μm);流动相乙腈-甲醇-4 mmol/L乙酸铵,梯度洗脱;体积流量0.5 m L/min;柱温40℃。结果 10种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.996 0),平均加样回收率95.1%~104.3%,RSD小于4.20%。结论该方法快速灵敏,专属性强,可用于贞芪扶正胶囊的质量控制。 展开更多
关键词 贞芪扶正胶囊 化学成分 UPLC—MS/MS
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双膦酸盐类药物引起的下颌骨坏死 被引量:10
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作者 房桂珍 李为民 刘东刚 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2007年第18期1069-1071,共3页
随着双膦酸盐药物(bisphosphonates,BPs)日趋广泛的应用,与BPs相关的下颌骨坏死(osteonecrosis of the jaw,ONJ)也逐渐成为广大临床医师和患者关注的焦点。ONJ的发生与BPs药物种类及治疗时间密切相关,其发生率较高,且不能治愈。因此,早... 随着双膦酸盐药物(bisphosphonates,BPs)日趋广泛的应用,与BPs相关的下颌骨坏死(osteonecrosis of the jaw,ONJ)也逐渐成为广大临床医师和患者关注的焦点。ONJ的发生与BPs药物种类及治疗时间密切相关,其发生率较高,且不能治愈。因此,早期诊断和预防ONJ的发生显得尤为重要。本文综述ONJ的发生机理与BPs的关系、临床表现和防治原则。 展开更多
关键词 下颌骨坏死 双膦酸盐 药物不良反应
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伊班膦酸钠治疗141例恶性肿瘤骨痛的随机双盲对照临床研究 被引量:3
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作者 戴广海 焦顺昌 +2 位作者 杨俊兰 姜少灏 刘东刚 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期326-329,333,共5页
目的:评价国产伊班膦酸钠(Ibandronate)治疗恶性肿瘤骨痛的疗效和不良反应。方法:采用随机双盲阳性药物对照临床研究方法,将骨痛患者随机分为静脉滴注伊班膦酸钠4mg(A组68例)、静脉滴注帕米膦酸二钠60mg(B组73例),观察3周内骨痛变化和... 目的:评价国产伊班膦酸钠(Ibandronate)治疗恶性肿瘤骨痛的疗效和不良反应。方法:采用随机双盲阳性药物对照临床研究方法,将骨痛患者随机分为静脉滴注伊班膦酸钠4mg(A组68例)、静脉滴注帕米膦酸二钠60mg(B组73例),观察3周内骨痛变化和不良反应。结果:141例患者入组,可评价疗效136例。A组治疗有效率为72.3%(47/65),B组为63.4%(45/71),两组间无统计学差异。两组不良反应类似。结论:伊班膦酸钠注射液治疗恶性肿瘤骨转移疼痛疗效确切,与帕米膦酸二钠相比疗效和不良反应相似。 展开更多
关键词 骨转移 伊班膦酸钠 帕米膦酸二钠 骨痛
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双膦酸盐类药物的发展 被引量:15
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作者 刘东刚 王杰军 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期678-683,共6页
关键词 双膦酸盐类药物 结构特点 骨疾患者 钙代谢性疾病
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抗HIV-1 p24单克隆抗体的制备、特性鉴定及初步应用 被引量:3
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作者 张红中 王润田 +3 位作者 王蕙芬 张坤娟 王从印 王丽 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期646-647,共2页
目的:制备抗HIV1p24单克隆抗体(mAb)及特性鉴定。方法:采用细胞融合技术制备可稳定分泌抗HIV1p24mAb的杂交瘤细胞。选择高效价、识别不同抗原表位的mAb纯化后,分别包被ELISA板及作为酶标记mAb,建立双mAb夹心ELISA法,检测400份正常人血浆... 目的:制备抗HIV1p24单克隆抗体(mAb)及特性鉴定。方法:采用细胞融合技术制备可稳定分泌抗HIV1p24mAb的杂交瘤细胞。选择高效价、识别不同抗原表位的mAb纯化后,分别包被ELISA板及作为酶标记mAb,建立双mAb夹心ELISA法,检测400份正常人血浆,20份抗HIV抗体阳性(p24抗原阴性)的血浆,20份HIV1感染的细胞培养上清及HIV1p24抗原国家参考品,并同时用进口p24抗原检测试剂盒进行对比检测。结果:经细胞融合、筛选、克隆化,共获得10株可分泌高效价mAb的杂交瘤细胞。纯化的腹水mAb经配对试验,选A值≥2.50的2株mAb建立的双mAb夹心ELISA法,敏感性可达2.5ng/L,且与进口试剂盒检测结果的一致性良好。结论:建立了具有高度敏感性和特异性的双mAb夹心ELISA法,为研制可用于检测HIV1p24抗原的试剂盒奠定了基础。 展开更多
关键词 HIV-1 P24 单克隆抗体 ELISA
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艾本与放疗联合治疗恶性肿瘤骨转移的临床疗效 被引量:2
7
作者 刘东刚 韩春 +1 位作者 李保生 崔慧先 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期398-401,共4页
目的:探讨艾本(伊班膦酸钠)全身用药与局部放疗相结合治疗恶性肿瘤局限性骨转移的临床疗效。方法:80例恶性肿瘤局限性骨转移患者随机分为两组,艾本静脉滴注加局部放疗40例(治疗组);单放组40例,只采用局部放疗(对照组)。结果:治疗组疼痛... 目的:探讨艾本(伊班膦酸钠)全身用药与局部放疗相结合治疗恶性肿瘤局限性骨转移的临床疗效。方法:80例恶性肿瘤局限性骨转移患者随机分为两组,艾本静脉滴注加局部放疗40例(治疗组);单放组40例,只采用局部放疗(对照组)。结果:治疗组疼痛缓解率为92.5%,对照组疼痛缓解率为82.5%,两组间比较无明显差异(P>0.05);溶骨病灶再钙化的有效率治疗组为76.7%,而对照组仅为27.8%,两组比较有显著性差异(P<0.001);治疗组出现第二部位骨转移的机率明显低于对照组(P<0.05);1年生存率治疗组明显高于对照组(P<0.05)。两组患者不良反应的发生率相似,无显著性差异(P>0.05)。结论:艾本联合放疗治疗局限性骨转移,具有止痛快、疗效确切、高效修复溶骨病灶,并能防止新转移灶的发生及较高的生存率等优点。 展开更多
关键词 伊班膦酸钠 放疗 骨转移
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伊班膦酸钠治疗骨质疏松症的临床研究 被引量:2
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作者 张剑 戴芳 刘东刚 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 2009年第A02期128-132,共2页
伊班膦酸钠系含氮的第三代双膦酸盐药物,能强效抑制破骨细胞活性,甚至诱导破骨细胞凋亡,有效增加骨密度,降低骨折的发生率。本文就伊班膦酸钠治疗骨质疏松症相关的临床研究进行了综述。结果表明,伊班膦酸钠能有效地治疗骨质疏松症,其依... 伊班膦酸钠系含氮的第三代双膦酸盐药物,能强效抑制破骨细胞活性,甚至诱导破骨细胞凋亡,有效增加骨密度,降低骨折的发生率。本文就伊班膦酸钠治疗骨质疏松症相关的临床研究进行了综述。结果表明,伊班膦酸钠能有效地治疗骨质疏松症,其依从性和安全性良好。 展开更多
关键词 伊班膦酸钠 骨质疏松 双膦酸盐 骨密度
全文增补中
TERT多表位疫苗的制备及其免疫原性初步研究 被引量:3
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作者 吴丽娜 魏林 +5 位作者 杨建岭 石文凯 霍明山 李彩霞 崔玉秀 曾瑞红 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期885-889,894,共6页
目的:制备端粒酶逆转录酶(TERT)的多表位(meTERT)肽疫苗和DNA疫苗,免疫小鼠,对其免疫原性进行初步研究。方法:用重叠延伸PCR将TERT的多个CD4+和CD8+T细胞表位串联连接,得meTERT的DNA片段;将该片段分别连接到真核表达载体pcDNA3.1及原核... 目的:制备端粒酶逆转录酶(TERT)的多表位(meTERT)肽疫苗和DNA疫苗,免疫小鼠,对其免疫原性进行初步研究。方法:用重叠延伸PCR将TERT的多个CD4+和CD8+T细胞表位串联连接,得meTERT的DNA片段;将该片段分别连接到真核表达载体pcDNA3.1及原核表达载体pGEX-4T中,制备DNA疫苗(PCT),并原核表达多表位肽疫苗(PCG);皮下/肌肉(50μg/100μg)免疫小鼠3次,取脾细胞,用ELISPOT法检测分泌IFN-γ和IL-4的细胞频率;用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测特异性脾细胞杀伤率(抗原刺激的SP2/0细胞为靶细胞)。结果:成功制备meTERT的PCT和PCG疫苗;动物实验表明:PCT+PCG联合免疫诱导的分泌IFN-γ的淋巴细胞数量显著高于其它各组(P<0.01);另外,PCT+PCG诱导的分泌IFN-γ的淋巴细胞数显著高于分泌IL-4的数量;PCT+PCG联合免疫诱导了显著的脾细胞杀伤活性(67.8%)。结论:含多个CD4+和CD8+T细胞表位的meTERT的DNA疫苗PCT和多表位肽疫苗PCG联合免疫能够诱导强烈的Th1和CTL细胞免疫应答。 展开更多
关键词 TERT CD4+T细胞表位 CD8+T细胞表位 meTERT 细胞免疫
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