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一种骨桥蛋白小分子肽的原核表达与生物学活性鉴定
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作者 刘颖慧 田文嘉 +2 位作者 郑斌 韩梅 温进坤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期848-852,共5页
目的:用大肠杆菌(E.coli)表达骨桥蛋白13肽(OPN13),经亲和层析纯化后检测其生物学活性。方法:运用基因重组技术,将骨桥蛋白分子中含黏附序列的13肽cDNA片段与携带His编码序列的原核表达载体连接构建融合蛋白表达质粒pET-32c-OPN13。将... 目的:用大肠杆菌(E.coli)表达骨桥蛋白13肽(OPN13),经亲和层析纯化后检测其生物学活性。方法:运用基因重组技术,将骨桥蛋白分子中含黏附序列的13肽cDNA片段与携带His编码序列的原核表达载体连接构建融合蛋白表达质粒pET-32c-OPN13。将重组质粒转化E.coliDH5α宿主菌后,对诱导融合蛋白表达的条件进行优化。表达产物His-OPN13经Ni-NT AHis Bind Resin金属离子螯合层析纯化后,分别检测其对骨桥蛋白诱导的血管平滑肌细胞黏附和迁移的影响。结果:所表达的His-OPN13融合蛋白在宿主菌中以胞浆可溶性的形式存在。经亲和层析可得到高纯度的His-OPN13融合蛋白。产物活性分析表明,His-OPN13融合蛋白能特异性地抑制骨桥蛋白诱导的血管平滑肌细胞的黏附和迁移。结论:OPN13肽可在大肠杆菌中高效表达,并可剂量依赖性地抑制血管平滑肌细胞黏附和迁移活性。 展开更多
关键词 骨桥蛋白 OPN13肽 原核表达 生物学活性
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过氧化物酶体生物发生研究进展 被引量:7
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作者 孙艳 孙雪培 +1 位作者 姜玲玲 石芸 《生物学杂志》 CAS CSCD 2015年第2期83-86,共4页
过氧化物酶体是存在于真核细胞中的一种亚细胞器,主要功能是参与脂肪酸等脂质的代谢过程和氧化应激的调节。近年来研究发现,多种疾病都与过氧化物酶体的生物发生异常有关。过氧化物酶体的生物发生指过氧化物酶体的形成过程,包括从头合... 过氧化物酶体是存在于真核细胞中的一种亚细胞器,主要功能是参与脂肪酸等脂质的代谢过程和氧化应激的调节。近年来研究发现,多种疾病都与过氧化物酶体的生物发生异常有关。过氧化物酶体的生物发生指过氧化物酶体的形成过程,包括从头合成和分裂增殖两条途径。两条途径中,参与过氧化物酶体生物发生的蛋白质,即peroxin(PEX)的基因发生突变,会导致过氧化物酶体生成障碍,引起疾病的发生。因此,就过氧化物酶体生物发生的研究进展进行综述,有助于为相关疾病的诊断和治疗提供参考和依据。 展开更多
关键词 过氧化物酶体 PEROXIN 过氧化物酶体生物发生缺陷病
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南瓜多糖的多重生理效应研究进展 被引量:11
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作者 毕新颖 王建南 +1 位作者 姜玲玲 石芸 《生物学杂志》 CAS CSCD 2014年第1期78-81,共4页
南瓜多糖属于杂化多糖,成分多样。目前,对其研究最多的功用是通过多种机制降低血糖,是公认的降糖活性物质。但随着对南瓜多糖不断深入地研究,人们发现它还具有降血脂、抗氧化、抗肿瘤、免疫增强等多种生理效应。就近年来南瓜多糖的多重... 南瓜多糖属于杂化多糖,成分多样。目前,对其研究最多的功用是通过多种机制降低血糖,是公认的降糖活性物质。但随着对南瓜多糖不断深入地研究,人们发现它还具有降血脂、抗氧化、抗肿瘤、免疫增强等多种生理效应。就近年来南瓜多糖的多重生理效应的研究进展作一综述,为其进一步开发利用提供理论依据。 展开更多
关键词 南瓜多糖 糖尿病 氧化应激 多重生理效应
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三七总皂苷对血管平滑肌细胞迁移的抑制作用及机制探讨 被引量:12
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作者 苏明 温进坤 +5 位作者 郑斌 李会宣 刘莎 付建然 张静 韩梅 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1326-1329,共4页
目的探讨三七总皂苷抑制血管平滑肌细胞迁移的分子机制。方法采用伤口愈合实验分析三七总皂苷抑制血管平滑肌细胞迁移的作用,通过RT-PCR、明胶酶谱分析及Western blot的方法检测迁移相关基因基质金属蛋白酶2、9(matrix metalloproteinas... 目的探讨三七总皂苷抑制血管平滑肌细胞迁移的分子机制。方法采用伤口愈合实验分析三七总皂苷抑制血管平滑肌细胞迁移的作用,通过RT-PCR、明胶酶谱分析及Western blot的方法检测迁移相关基因基质金属蛋白酶2、9(matrix metalloproteinases 2 and 9,MMP-2,MMP-9)及骨桥蛋白(osteopontin,OPN)基因的表达。结果三七总皂苷抑制大鼠血管平滑肌细胞的迁移活性,并抑制迁移相关基因MMP-2、MMP-9及OPN的表达(P<0.05)。结论三七总皂苷抑制血管平滑肌细胞的迁移,该作用与抑制迁移相关蛋白MMP-2、MMP-9和OPN基因的表达有关。 展开更多
关键词 三七总皂苷 血管平滑肌细胞 迁移 基质金属蛋白酶2 基质金属蛋白酶9 骨桥蛋白
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石家庄地区体检人群非酒精性脂肪性肝病患病情况及危险因素分析 被引量:15
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作者 李静 周利霞 +3 位作者 王俊明 帖彦清 翟俊轻 姚敏 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期879-884,共6页
目的分析石家庄地区体检人群非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)的患病情况及其危险因素,为NAFLD的防治提供依据。方法收集2010年1月至12月在河北省人民医院体检中心和石家庄市河东社区卫生服务中心健康体检... 目的分析石家庄地区体检人群非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)的患病情况及其危险因素,为NAFLD的防治提供依据。方法收集2010年1月至12月在河北省人民医院体检中心和石家庄市河东社区卫生服务中心健康体检的体检人员资料,抽取所在单位或社区为石家庄市且居住5年以上、资料完整的健康查体者,共20 922名。统计该人群中NAFLD的患病率,并对其可能的相关危险因素进行单因素及多因素分析。结果目标人群中NAFLD患病率为19.18%(4 013/20 922),男性的总体患病率明显高于女性[23.40%(2 558/10 930)vs 14.56%(1 455/9 992),P<0.001],且存在明显的年龄差异;多因素logistic回归分析显示尿酸(UA)、收缩压(SBP)、体质量指数(BMI)、空腹血糖(FBG)和三酰甘油(TG)是NAFLD的独立危险因素,且其相对危险度依次升高。结论石家庄地区体检人群NAFLD的患病率较高,NAFLD的发生与TG、FBG、BMI、SBP和UA密切相关。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪性肝病 患病率 危险因素
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激活LXR降低脑Aβ与胆固醇及相关基因转录的关系
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作者 石芸 姚敏 +3 位作者 侯连国 李静 杨原 姜玲玲 《生物学杂志》 CAS CSCD 2013年第3期5-8,共4页
探讨了激活肝X受体(liver X receptor,LXR)降低的β-淀粉样蛋白(beta-amyloid peptide,Aβ)与脑胆固醇和相关基因转录的关系。给予成年雄性C57BL/6J小鼠口服7 d对照溶剂或LXR的强激动剂TO901317(20mg/kg/d)后,用RT-PCR法检测ATP盒转运体... 探讨了激活肝X受体(liver X receptor,LXR)降低的β-淀粉样蛋白(beta-amyloid peptide,Aβ)与脑胆固醇和相关基因转录的关系。给予成年雄性C57BL/6J小鼠口服7 d对照溶剂或LXR的强激动剂TO901317(20mg/kg/d)后,用RT-PCR法检测ATP盒转运体A1(ATP binding cassette transporter A1,ABCA1)和胆固醇-24S-羟化酶(cholesterol-24S-hydroxylase,CYP46)的mRNA表达水平;用氧化酶-比色法测定脑总胆固醇含量;用放免法测定Aβ的含量。结果发现,小鼠口服TO901317后,脑组织中总胆固醇和Aβ的含量降低(P<0.05),LXR的靶基因AB-CA1和非靶基因CYP46的mRNA相对表达量明显增高(P<0.01),脑胆固醇的含量分别与Aβ含量呈正相关(r=0.57,P<0.05),与CYP46 mRNA的相对表达量呈负相关(r=-0.87,P<0.01)。表明激活LXR而降低的Aβ水平与负责胆固醇出胞和胆固醇出脑的相关基因转录增加,脑胆固醇水平降低有关。 展开更多
关键词 肝X受体 胆固醇-24S-羟化酶 胆固醇 Β-淀粉样蛋白
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全反式维甲酸通过抑制ERK和激活p38 MAPK信号诱导KLF4基因表达
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作者 马国燕 史建红 +2 位作者 郑斌 陈斯 温进坤 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1025-1031,共7页
全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)诱导细胞分化与上调转录因子Krüppel样因子4(KLF4)表达有关,但目前对ATRA诱导KLF4表达的分子机制尚不清楚.为了研究ATRA在血管平滑肌细胞(VSMC)中诱导KLF4表达的分子机制,本研究观察ATR... 全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)诱导细胞分化与上调转录因子Krüppel样因子4(KLF4)表达有关,但目前对ATRA诱导KLF4表达的分子机制尚不清楚.为了研究ATRA在血管平滑肌细胞(VSMC)中诱导KLF4表达的分子机制,本研究观察ATRA对视黄酸受体α(retinoicacid receptorα,RARα)和KLF4表达的影响及RARα介导ATRA诱导KLF4表达所依赖的信号转导途径.实验结果显示,ATRA可显著诱导RARα和KLF4表达,用RARα拮抗剂Ro 41-5253阻断ATRA与受体相互作用后,ATRA诱导的KLF4表达受到显著抑制.用p38 MAPK、ERK和Akt抑制剂阻断ATRA与RARα相互作用所激活的信号转导途径后,发现阻断p38 MAPK信号途径显著抑制ATRA诱导的KLF4表达,抑制ERK信号途径使ATRA对KLF4表达的诱导作用明显增强,抑制Akt信号途径不影响KLF4基因表达.表明RARα介导ATRA对KLF4表达的诱导作用,ATRA通过抑制ERK和激活p38 MAPK信号途径发挥其对KLF4基因表达的诱导作用. 展开更多
关键词 Krüppel样因子4(KLF4) 视黄酸受体α(RARα) 全反式维甲酸 血管平滑肌细胞 信号通路
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