实验动物皮肤病原真菌DNA快速少量提取法 被引量：1

1

作者 刘福英 《中国比较医学杂志》 CAS 2010年第9期1-2,共2页

PCR技术应用于实验动物皮肤病原真菌检测,方法简单、省时。但是,真菌的DNA提取较为困难。本文推荐一种既简单又经济快速的提取皮肤真菌DNA的方法,并能成功用于实验动物皮肤病原真菌质量检测研究。

关键词 实验动物 皮肤病原真菌 DNA提取

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HFJ和Wistar大鼠脂肪肝及胰岛素抵抗动物模型的比较 被引量：1

2

作者 郑龙 连伟光 +5 位作者 李建辉 张焕铃 王俊霞 刘军须 蔡月花 刘福英 《四川动物》 CSCD 北大核心 2012年第1期143-146,F0004,共5页

目的建立近交系HFJ大鼠和封闭群Wistar大鼠脂肪肝胰岛素抵抗动物模型及比较其生物学特性。方法雄性HFJ大鼠和Wistar大鼠,分别随机分为模型组和正常组,模型组喂养高脂饮食,正常组喂养普通饮食,两组脂肪分别占摄入能量的44.2%和19.2%,共饲... 目的建立近交系HFJ大鼠和封闭群Wistar大鼠脂肪肝胰岛素抵抗动物模型及比较其生物学特性。方法雄性HFJ大鼠和Wistar大鼠,分别随机分为模型组和正常组,模型组喂养高脂饮食,正常组喂养普通饮食,两组脂肪分别占摄入能量的44.2%和19.2%,共饲养12周。每周称体质量,测定血糖、甘油三酯、胆固醇、ALT、AST、HDLC、LDLC和血胰岛素水平。实验期末处死动物摘取肝脏并称质量,计算肝指数;鼠肝脏用10%甲醛固定,石蜡包埋切片,HE染色,光镜下评估肝脂肪变性和炎症活动情况。结果镜下可见,HFJ和Wistar大鼠模型组肝细胞均呈现弥漫性脂肪变性,小叶内可见炎症细胞浸润,HFJ比Wistar脂肪变性较重,对照组肝脏均未见异常。两种动物的模型组ALT、AST、肝指数、HOMA-IR指数均显著高于其正常组,HFJ和Wistar种系间各指标的差异无显著性;HFJ大鼠模型组体重和正常组体重具有显著性差异(P<0.01),而Wistar大鼠模型组体重与正常组体重间无显著差异(P>0.05);HFJ大鼠TG和TC含量均显著高于Wistar大鼠。结论通过高脂饮食喂养成功建立了HFJ大鼠和Wistar大鼠脂肪肝与胰岛素抵抗疾病动物模型,与Wistar大鼠比较,HFJ大鼠具有自发性高血脂特征,造模更易成功,可为胰岛素抵抗和脂肪肝的发病机制研究、防治高血脂药物筛选提供一种新的实验动物。 展开更多

关键词 近交系HFJ大鼠 封闭群Wistar大鼠 胰岛素抵抗 脂肪肝 动物模型

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肿瘤骨转移动物模型研究进展 被引量：9

3

作者 刘福英 《中国比较医学杂志》 CAS 2010年第7期1-4,共4页

骨转移是乳腺癌、前列腺癌及肺癌等肿瘤的常见并发症,是预后不良的独立危险因素。肿瘤骨转移动物模型是研究骨转移发生机制及评价治疗策略的重要工具。现对骨转移动物模型的研究进展进行综述。

关键词 肿瘤 骨转移 模型 动物

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HFJ大鼠与Wistar大鼠用于动脉粥样硬化造模的比较研究 被引量：6

4

作者 连伟光 郑龙 +4 位作者 尤红煜 刘健敏 张东明 刘福英 王俊霞 《四川动物》 CSCD 北大核心 2013年第4期588-594,共7页

目的通过高脂喂养和免疫损伤结合的方法,建立HFJ近交系大鼠和Wistar封闭群大鼠动脉粥样硬化动物模型并进行比较分析。方法选择HFJ近交系和Wistar封闭群大鼠,分别随机分为模型组和正常组,正常组给予基础饲料饲喂,模型组给予高脂饲料饲喂... 目的通过高脂喂养和免疫损伤结合的方法,建立HFJ近交系大鼠和Wistar封闭群大鼠动脉粥样硬化动物模型并进行比较分析。方法选择HFJ近交系和Wistar封闭群大鼠,分别随机分为模型组和正常组,正常组给予基础饲料饲喂,模型组给予高脂饲料饲喂,并采用牛血清白蛋白(40mg/kg)和卵清白蛋白(2.5mg/kg)进行免疫损伤,并辅以维生素D3(25万U/kg)灌胃,饲养90d后测定血脂水平、血液生化指标、观察病理变化和血管内皮生长因子(VEGF)免疫组化情况。结果 (1)HFJ和Wistar大鼠正常组相比较,前者TG、TC和LDL-C水平高于后者(P<0.05),HFJ大鼠模型组LDL-C含量明显高于Wistar大鼠(P<0.05);(2)心肌损伤指标,HFJ和Wistar大鼠模型组均较正常组心肌激酶(CK)、心肌激酶同工酶(CK-Mb)明显升高;(3)HE染色发现与Wistar大鼠模型组相比,HFJ近交系大鼠斑块形成更为明显,明显处于动脉粥样硬化病理Ⅲ期,可见纤维帽形成,纤维帽下具有典型的胆固醇结晶裂隙和泡沫细胞,中层平滑肌排列紊乱;(4)免疫组化法测定主动脉弓VEGF蛋白的表达,HFJ大鼠模型组较Wistar大鼠表达升高(P<0.05)。结论成功建立了HFJ大鼠动脉粥样硬化疾病动物模型,与Wistar大鼠相比HFJ大鼠模型特点更为显著,可为动脉粥样硬化研究提供一新的实验动物品系。 展开更多

关键词 动脉粥样硬化 动物模型 免疫损伤 HFJ大鼠

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骨形成蛋白7对大鼠不同部位脂肪源干细胞分化成棕色样脂肪细胞的影响 被引量：3

5

作者 郑龙 刘健敏 +4 位作者 王俊霞 李敏芝 连伟光 谢鹏 刘树锋 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期654-659,共6页

目的探讨骨形成蛋白7对大鼠不同部位脂肪组织脂肪源间充质干细胞(AD-MSCs)诱导分化成棕色样脂肪细胞的影响。方法分离大鼠背部肩胛间区棕色脂肪组织(i BAT)、双侧下肢腹股沟皮下白色脂肪组织(s WAT)和附睾白色脂肪组织(e WAT),分别提取... 目的探讨骨形成蛋白7对大鼠不同部位脂肪组织脂肪源间充质干细胞(AD-MSCs)诱导分化成棕色样脂肪细胞的影响。方法分离大鼠背部肩胛间区棕色脂肪组织(i BAT)、双侧下肢腹股沟皮下白色脂肪组织(s WAT)和附睾白色脂肪组织(e WAT),分别提取脂肪源间充质干细胞培养,用骨形成蛋白7诱导干细胞分化。细胞免疫荧光染色、油红O染色鉴定棕色样脂肪细胞,PCR法检测棕色脂肪相关基因表达。结果 i BAT和s WAT组诱导细胞中出现成簇聚集的空泡状细胞,空泡状细胞油红O染色为红色,解偶联蛋白1免疫荧光染色阳性。e WAT组仅有散在的空泡状细胞,解偶联蛋白1免疫荧光染色阴性。反转录PCR显示i BAT和s WAT组细胞高表达解偶联蛋白1基因,未检测到e WAT组细胞表达解偶联蛋白1基因。结论大鼠体内不同部位脂肪组织源干细胞的基因表达及分化潜能不同。 展开更多

关键词 棕色样脂肪细胞 骨形成蛋白7 解偶联蛋白1 分化

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微卫星DNA标记在近交系大鼠HFJ和MIJ遗传监测中的应用 被引量：4

6

作者 郑龙 李建辉 +4 位作者 王俊霞 刘军须 蔡月花 连伟光 刘福英 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2012年第2期32-36,共5页

目的用24对引物对近交系HFJ和MIJ大鼠的微卫星位点进行多态性分析,并选用近交系Lewis和F344大鼠作为对照,进行比较分析。方法用传统的酚-氯仿法分别提取4个近交系大鼠MIJ、HFJ、Lewis和F344的基因组DNA,选取大鼠24个微卫星位点,通过PCR... 目的用24对引物对近交系HFJ和MIJ大鼠的微卫星位点进行多态性分析,并选用近交系Lewis和F344大鼠作为对照,进行比较分析。方法用传统的酚-氯仿法分别提取4个近交系大鼠MIJ、HFJ、Lewis和F344的基因组DNA,选取大鼠24个微卫星位点,通过PCR扩增,扩增产物经过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染,根据电泳结果,比较分析4种品系近交系大鼠之间微卫星多态性。结果 4种品系及品系内不同个体的近交系大鼠在24个微卫星位点上的扩增产物均出现一个条带,MIJ和HFJ大鼠在品系间和品系内均表现为单态性,同Lewis和F344的扩增结果比较,14个位点显示多态性,有10个位点显示单态性。结论两个近交系大鼠品系MIJ和HFJ符合近交系要求,筛选出的14个多态性微卫星位点可用于有关近交系大鼠的遗传背景监测。 展开更多

关键词 HFJ大鼠 MIJ大鼠 微卫星DNA 遗传监测

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近交系MIJ和HFJ大鼠生化标记基因的测定 被引量：3

7

作者 刘军须 蔡月花 +5 位作者 王瑜 冯旭 王莉 史荣珍 林德森 刘福英 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2011年第5期428-430,共3页

目的观察MIJ和HFJ大鼠的基因纯合度和遗传稳定性。方法 MIJ大鼠7只,取自F22代基础群中3对种鼠和F22代雄性生殖缺陷鼠1只。HFJ大鼠6只,取自HFJ大鼠F25代基础群中的3对种鼠。按照中华人民共和国国家标准GB/T14927.1-2001实验动物近交系小... 目的观察MIJ和HFJ大鼠的基因纯合度和遗传稳定性。方法 MIJ大鼠7只,取自F22代基础群中3对种鼠和F22代雄性生殖缺陷鼠1只。HFJ大鼠6只,取自HFJ大鼠F25代基础群中的3对种鼠。按照中华人民共和国国家标准GB/T14927.1-2001实验动物近交系小鼠、大鼠生化标记检测方法测定。结果 MIJ和HFJ近交系大鼠的11个生化标记基因位点均为完全纯合,且两个品系大鼠的生化遗传概貌完全一致,生化位点基因型分别为,Akp1为a,Cs1为a,Es1为b,Es3为d,Es4为b,Es6为a,Es8为b,Es9为a,Es10为a,Hbb为a,Alp1为b。两个品系大鼠生化标记基因遗传概貌与目前常用的近交系大鼠比较,未发现与其生化遗传概貌完全相同的品系。结论 MIJ和HFJ近交系大鼠符合近交系动物标准,且具有独特的生化遗传概貌。 展开更多

关键词 大鼠 近交系 生化标记基因 检测

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MIJ和HFJ近交系大鼠心电图表现 被引量：1

8

作者 陈贵良 刘军须 +4 位作者 陈则永 蔡月花 曹福源 高丽萍 刘福英 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2012年第1期55-59,共5页

目的测定近交系MIJ、HFJ大鼠心电图,并与Wistar大鼠比较分析,观察MIJ和HFJ大鼠心电图表现。方法大鼠麻醉后,仰卧位固定于大鼠固定板上,用短针电极刺入皮下2～3 mm位置,麻醉5 min后,用福田青岛FX-102B心电图机做心电图,并对心电图进行分... 目的测定近交系MIJ、HFJ大鼠心电图,并与Wistar大鼠比较分析,观察MIJ和HFJ大鼠心电图表现。方法大鼠麻醉后,仰卧位固定于大鼠固定板上,用短针电极刺入皮下2～3 mm位置,麻醉5 min后,用福田青岛FX-102B心电图机做心电图,并对心电图进行分析。结果三种大鼠均为窦性心律,心律齐整,雄性HFJ、MIJ心率均高于同性别Wistar。HFJ和MIJ品系、性别间心率差异均无显著性。HFJ和MIJ心电轴与Wistar相同,主要在0°～90°间。三种大鼠的P波方向及QRS波群基本相同,但各波振幅和各波时限,在不同品系和性别之间存在较明显的差异。结论近交系MIJ和HFJ大鼠各有其独特的心电图表现。 展开更多

关键词 HFJ和MIJ近交系大鼠 心电图 特征 观察

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近交系MIJ和HFJ大鼠部分生理数据测定和分析 被引量：1

9

作者 陈贵良 刘军须 +5 位作者 刘惠茹 蔡月花 曹福源 郑龙 姚林 刘福英 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2011年第6期539-543,共5页

目的测定近交系大鼠MIJ、HFJ和封闭群Wistar大鼠的脏器系数、体温、呼吸频率、肠管长度,观察两个近交系大鼠的生理表型。方法 采用常规方法对大鼠脏器系数、体温、呼吸频率及肠管长度进行测定,并对HFJ、MIJ、Wistar大鼠三者间进行比较... 目的测定近交系大鼠MIJ、HFJ和封闭群Wistar大鼠的脏器系数、体温、呼吸频率、肠管长度,观察两个近交系大鼠的生理表型。方法 采用常规方法对大鼠脏器系数、体温、呼吸频率及肠管长度进行测定,并对HFJ、MIJ、Wistar大鼠三者间进行比较。结果①体重:HFJ、MIJ、Wistar大鼠同性别间比较差异无显著性。②脏器系数:HFJ与Wistar大鼠雄性间心脏、肺,雌性间子宫、肝;MIJ与Wistar大鼠雄性间肺、脾,雌性间脑、脾,差异均有显著性。HFJ与MIJ大鼠雄性间脑,雌性间脑和脾差异有显著性。HFJ大鼠不同性别间肝、脑、眼球差异有显著性。MIJ大鼠不同性别间,脑、心脏、肾、肺、脾和眼球差异均有显著性。③体温:HFJ雌性大鼠明显高于Wistar雌性,雄性间差异无显著性。HFJ大鼠雌性高于雄性,差异有显著性。④呼吸频率:HFJ雌性大鼠低于同性Wistar大鼠,MIJ大鼠雌性和雄性均高于同性别Wistar大鼠,差异有显著性。⑤肠管长度:HFJ与Wistar同性别间比较,肠管总长和小肠差异有显著性。MIJ与Wistar大鼠雄性间肠管总长、大肠、小肠、盲肠差异均有显著性,雌性间肠管总长、小肠、盲肠差异有显著性。HFJ与MIJ大鼠同性别间差异均无显著性,不同性别的HFJ和MIJ的肠管总长、大肠和小肠差异有显著性。结论 MIJ和HFJ近交系大鼠的脏器系数、体温、呼吸频率、肠管长度都各有其独特的生理概貌。 展开更多

关键词 近交系HFJ大鼠 近交系MIJ大鼠 生理数据测定 观察分析

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过表达Baff转基因斑马鱼的构建 被引量：2

10

作者 张力 谢英 刘树锋 《中国比较医学杂志》 CAS 2012年第11期46-49,I0004,共5页

目的体外克隆斑马鱼baff基因并分别构建pEGFP-C1-baff、pEGFP-N1-baff、pIRES2-EGFP-baff重组质粒,通过胚胎显微注射获得过表达baff的转基因斑马鱼,以探讨其作为人类SLE模型和用于SLE药物筛选的意义。方法通过RT-PCR法由斑马鱼脾脏克隆... 目的体外克隆斑马鱼baff基因并分别构建pEGFP-C1-baff、pEGFP-N1-baff、pIRES2-EGFP-baff重组质粒,通过胚胎显微注射获得过表达baff的转基因斑马鱼,以探讨其作为人类SLE模型和用于SLE药物筛选的意义。方法通过RT-PCR法由斑马鱼脾脏克隆出斑马鱼baff基因全长807 bp蛋白编码区域,分别构建baff过表达载体pEGFP-C1-baff,pEGFP-N1-baff及pIRES2-EGFP-baff重组质粒,体外细胞转染并通过免疫印迹法验证蛋白表达后,通过胚胎显微注射过表达载体,GFP荧光跟踪并筛选阳性鱼。结果通过体外细胞转染实验与免疫印迹法验证了pEGFP-C1-baff,pEGFP-N1-baff转染后细胞Baff-GFP融合蛋白的成功表达,通过胚胎显微注射与GFP荧光筛选,成功获得过表达baff的转基因斑马鱼。结论本研究所构建pEGFP-C1-baff、pEGFP-N1-baff、pIRES2-EGFP-baff重组质粒均可通过显微注射获得过表达baff的阳性转基因斑马鱼,为进一步探讨其作为人类SLE疾病模型的意义及Baff拮抗药物的筛选奠定基础。 展开更多

关键词 系统性红斑狼疮 B细胞活化因子 斑马鱼 转基因

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MIJ和HFJ近交系大鼠血液生理生化的表型观察

11

作者 陈贵良 刘军须 +5 位作者 刘惠茹 蔡月花 曹福源 郑龙 姚林 刘福英 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1820-1823,共4页

目的:测定近交系MIJ和HFJ大鼠的血液生理、生化指标,并以它们的原始亲体动物Wistar远交群大鼠为参考,进行比较分析,了解近交系MIJ和HFJ大鼠血液生理、生化指标的表型特征。方法:利用XT-1800i全自动血球记数仪和HITACHI 7060-020全自动... 目的:测定近交系MIJ和HFJ大鼠的血液生理、生化指标,并以它们的原始亲体动物Wistar远交群大鼠为参考,进行比较分析,了解近交系MIJ和HFJ大鼠血液生理、生化指标的表型特征。方法:利用XT-1800i全自动血球记数仪和HITACHI 7060-020全自动生化仪对MIJ、HFJ和Wistar大鼠24项血液常规值和27项血液生化值进行测定。结果:HFJ大鼠与同性别Wistar大鼠、MIJ大鼠与同性别Wistar大鼠、HFJ大鼠与同性别MIJ大鼠之间均有许多血常规指标和生化指标存在差异。HFJ大鼠不同性别间、MIJ大鼠不同性别间部分指标存在差异。结论:MIJ和HFJ近交系大鼠血液的生理、生化有不同表型,各有其独特的生物学特征。 展开更多

关键词 近交系HFJ大鼠 近交系MIJ大鼠 血液生理生化指标

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应用2A肽策略构建双基因共表达转基因斑马鱼的研究

12

作者 张力 刘超 +2 位作者 周昕 谢英 刘树锋 《四川动物》 北大核心 2015年第3期338-344,共7页

目的以Tol2为骨架载体,以绿色荧光蛋白(GFP)、Cherry为报告基因,探讨采用2A肽双基因载体构建策略构建单启动子双基因共表达质粒的方法;将B细胞刺激因子(BAFF)分别置于2A序列前后位置,分析位置效应对跨膜融合蛋白的表达与剪切的影响,探... 目的以Tol2为骨架载体,以绿色荧光蛋白(GFP)、Cherry为报告基因,探讨采用2A肽双基因载体构建策略构建单启动子双基因共表达质粒的方法;将B细胞刺激因子(BAFF)分别置于2A序列前后位置,分析位置效应对跨膜融合蛋白的表达与剪切的影响,探讨多基因共表达转基因斑马鱼构建技术。方法以In Fusion法将GFP-2A-Cherry序列构建到Tol2质粒上,所得p Tol-GFP-2A-Cherry质粒转染He La细胞、显微注射1-细胞期斑马鱼受精卵;倒置荧光显微镜观察He La细胞、斑马鱼幼鱼体内GFP与Cherry蛋白的表达,Western blot法验证GFP和Cherry蛋白的表达量与剪切情况;分别构建p Tol2-GFP-2A-BAFF与p Tol2-BAFF-2A-Cherry质粒,Western blot法检查BAFF的表达与剪切情况。结果 p Tol2-GFP-2A-Cherry质粒转染的He La细胞,GFP与Cherry均可单独表达且表达呈现时空一致性;GFP-2A-Cherry融合蛋白可被剪切为GFP与Cherry,且成等比例表达趋势。p Tol2-GFP-2A-Cherry质粒显微注射1-细胞期斑马鱼受精卵可获得可单独表达GFP与Cherry蛋白的转基因斑马鱼;p Tol2-GFP-2A-BAFF与p Tol2-BAFF-2A-Cherry于斑马鱼体内均有融合蛋白的表达,且BAFF序列位于2A序列后更易于融合蛋白的剪切。结论通过2A肽策略构建可实现在斑马鱼体内单一载体、单一启动子调控双基因表达目的。发现编码跨膜分泌蛋白的功能基因位于2A序列的不同位置会直接影响蛋白的剪切,功能基因位于2A序列后易于跨膜蛋白的剪切。 展开更多

关键词 2A肽 斑马鱼 双顺反子

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