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Ehhadh通过调控脂代谢抑制高脂饮食小鼠肾小管间质炎症
1
作者
闫嘉欣
吴婷
+3 位作者
朱艳
姚芳
王晓峰
杜春阳
《中国病理生理杂志》
北大核心
2025年第9期1665-1673,共9页
目的:观察烯酰辅酶A水解酶/L-3-羟酰辅酶A脱氢酶(Ehhadh)在高脂饮食(HFD)小鼠肾小管间质炎症中的作用及分子机制。方法:24只雄性C57BL/6N实验小鼠随机分为4组:标准饮食(SD)组、HFD组、HFD+Ehhadh基因过表达组和HFD+载体对照组,每组6只。...
目的:观察烯酰辅酶A水解酶/L-3-羟酰辅酶A脱氢酶(Ehhadh)在高脂饮食(HFD)小鼠肾小管间质炎症中的作用及分子机制。方法:24只雄性C57BL/6N实验小鼠随机分为4组:标准饮食(SD)组、HFD组、HFD+Ehhadh基因过表达组和HFD+载体对照组,每组6只。HFD小鼠给予60%脂肪、20%蛋白和20%碳水化合物的饲料16周,HFD+Ehhadh基因过表达组和HFD+载体对照组小鼠在HFD喂养8周后,尾静脉分别注射腺相关病毒9(AAV9)-Ehhadh和AAV9-vector,随后继续8周HFD喂养。观察小鼠肾功能及肾组织形态学变化;Western blot及免疫组化检测小鼠肾组织核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、caspase-1 p10、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-18的表达水平;免疫荧光共定位检测Ehhadh与过氧化物酶体生物发生因子14(Pex14)的共定位情况;ELISA检测小鼠尿液中IL-1β和IL-18含量;尼罗红染色观察肾组织脂质沉积情况;靶向定量脂质组学分析检测小鼠肾皮质脂质亚类含量。结果:与SD组相比,HFD组小鼠肾小管细胞过氧化物酶体Ehhadh蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。Ehhadh过表达显著改善HFD小鼠肾功能(P<0.01),减轻肾小管上皮细胞的病理形态学变化,显著抑制炎症因子IL-1β和IL-18的表达和肾间质巨噬细胞浸润(P<0.01),使HFD诱导的NLRP3炎症小体活化被抑制(P<0.01)。同时,Ehhadh过表达减少肾小管细胞脂质沉积(P<0.01),促进胆固醇和磷脂等长链脂肪酸的氧化分解。结论:Ehhadh可抑制HFD小鼠肾小管间质炎症反应,这一作用是通过促进过氧化物酶体脂肪酸氧化,进而抑制NLRP3炎症小体活化实现的。
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关键词
高脂饮食
烯酰辅酶A水解酶/L-3-羟酰辅酶A脱氢酶
过氧化物酶体
肾小管间质炎症
脂质组学
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职称材料
固相萃取-超高效液相色谱-静电场轨道阱高分辨率质谱法测定血浆中神经酰胺
2
作者
吴思非
张雅
+2 位作者
刘英杰
孙玉洁
张晓光
《分析科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第6期689-695,共7页
建立了固相萃取-超高效液相色谱-静电场轨道阱高分辨率质谱测定血浆中10种神经酰胺的方法。样品经甲醇提取、固相萃取柱净化,采用C30色谱柱进行色谱分离;以母离子精确质量数提取峰面积进行定量,以相对应的子离子进行定性,用同位素内标...
建立了固相萃取-超高效液相色谱-静电场轨道阱高分辨率质谱测定血浆中10种神经酰胺的方法。样品经甲醇提取、固相萃取柱净化,采用C30色谱柱进行色谱分离;以母离子精确质量数提取峰面积进行定量,以相对应的子离子进行定性,用同位素内标法建立标准曲线。实验对固相萃取柱、色谱柱,以及固相萃取洗脱条件、色谱条件以及质谱条件进行优化,并考察了不同净化方法的基质效应。10种神经酰胺在一定的线性范围内拟合良好(相关系数r^(2)>0.99),检出限范围为0.5~1.2 ng/mL,定量限范围为1.5~3.5 ng/mL。方法的回收率在73.1%~106.9%之间,相对标准偏差在1.0%~13.1%之间。方法操作方便,分析时间短,准确性高,可为神经酰胺的测定以及相关研究提供新的技术支持。
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关键词
血浆
神经酰胺
固相萃取
高分辨率质谱
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职称材料
题名
Ehhadh通过调控脂代谢抑制高脂饮食小鼠肾小管间质炎症
1
作者
闫嘉欣
吴婷
朱艳
姚芳
王晓峰
杜春阳
机构
河北医科大学
病理学教研室
河北医科大学大型科研仪器设备共享服务平台
出处
《中国病理生理杂志》
北大核心
2025年第9期1665-1673,共9页
基金
国家自然科学基金青年基金资助项目(No.82000773)
河北省自然科学基金资助项目(No.H2022206463)
河北省科技厅中央引导地方科技发展资金项目(自由探索类基础研究)(No.236Z7716G,No.236Z7737G)。
文摘
目的:观察烯酰辅酶A水解酶/L-3-羟酰辅酶A脱氢酶(Ehhadh)在高脂饮食(HFD)小鼠肾小管间质炎症中的作用及分子机制。方法:24只雄性C57BL/6N实验小鼠随机分为4组:标准饮食(SD)组、HFD组、HFD+Ehhadh基因过表达组和HFD+载体对照组,每组6只。HFD小鼠给予60%脂肪、20%蛋白和20%碳水化合物的饲料16周,HFD+Ehhadh基因过表达组和HFD+载体对照组小鼠在HFD喂养8周后,尾静脉分别注射腺相关病毒9(AAV9)-Ehhadh和AAV9-vector,随后继续8周HFD喂养。观察小鼠肾功能及肾组织形态学变化;Western blot及免疫组化检测小鼠肾组织核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、caspase-1 p10、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-18的表达水平;免疫荧光共定位检测Ehhadh与过氧化物酶体生物发生因子14(Pex14)的共定位情况;ELISA检测小鼠尿液中IL-1β和IL-18含量;尼罗红染色观察肾组织脂质沉积情况;靶向定量脂质组学分析检测小鼠肾皮质脂质亚类含量。结果:与SD组相比,HFD组小鼠肾小管细胞过氧化物酶体Ehhadh蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。Ehhadh过表达显著改善HFD小鼠肾功能(P<0.01),减轻肾小管上皮细胞的病理形态学变化,显著抑制炎症因子IL-1β和IL-18的表达和肾间质巨噬细胞浸润(P<0.01),使HFD诱导的NLRP3炎症小体活化被抑制(P<0.01)。同时,Ehhadh过表达减少肾小管细胞脂质沉积(P<0.01),促进胆固醇和磷脂等长链脂肪酸的氧化分解。结论:Ehhadh可抑制HFD小鼠肾小管间质炎症反应,这一作用是通过促进过氧化物酶体脂肪酸氧化,进而抑制NLRP3炎症小体活化实现的。
关键词
高脂饮食
烯酰辅酶A水解酶/L-3-羟酰辅酶A脱氢酶
过氧化物酶体
肾小管间质炎症
脂质组学
Keywords
high-fat diet
enoyl-coenzyme A hydratase/L-3-hydroxyacyl-coenzyme A dehydrogenase
peroxisome
tubulointerstitial inflammation
lipidomics
分类号
R589.2 [医药卫生—内分泌]
R692.6 [医药卫生—泌尿科学]
R363 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
固相萃取-超高效液相色谱-静电场轨道阱高分辨率质谱法测定血浆中神经酰胺
2
作者
吴思非
张雅
刘英杰
孙玉洁
张晓光
机构
河北医科大学
药学院
河北医科大学
护理学院
河北医科大学大型科研仪器设备共享服务平台
出处
《分析科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第6期689-695,共7页
基金
河北省高等学校科学技术研究项目(产学研合作)(CXY2024051)
河北省卫生健康委员会医学科学研究课题项目(20200038)。
文摘
建立了固相萃取-超高效液相色谱-静电场轨道阱高分辨率质谱测定血浆中10种神经酰胺的方法。样品经甲醇提取、固相萃取柱净化,采用C30色谱柱进行色谱分离;以母离子精确质量数提取峰面积进行定量,以相对应的子离子进行定性,用同位素内标法建立标准曲线。实验对固相萃取柱、色谱柱,以及固相萃取洗脱条件、色谱条件以及质谱条件进行优化,并考察了不同净化方法的基质效应。10种神经酰胺在一定的线性范围内拟合良好(相关系数r^(2)>0.99),检出限范围为0.5~1.2 ng/mL,定量限范围为1.5~3.5 ng/mL。方法的回收率在73.1%~106.9%之间,相对标准偏差在1.0%~13.1%之间。方法操作方便,分析时间短,准确性高,可为神经酰胺的测定以及相关研究提供新的技术支持。
关键词
血浆
神经酰胺
固相萃取
高分辨率质谱
Keywords
Plasma
Ceramide
Solid phase extraction
High resolution mass spectrometry
分类号
O657.63 [理学—分析化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Ehhadh通过调控脂代谢抑制高脂饮食小鼠肾小管间质炎症
闫嘉欣
吴婷
朱艳
姚芳
王晓峰
杜春阳
《中国病理生理杂志》
北大核心
2025
0
在线阅读
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职称材料
2
固相萃取-超高效液相色谱-静电场轨道阱高分辨率质谱法测定血浆中神经酰胺
吴思非
张雅
刘英杰
孙玉洁
张晓光
《分析科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
在线阅读
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职称材料
已选择
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