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缬沙坦对高糖培养的肾小球系膜细胞p38MAPK传导通路的影响 被引量：4
1
作者 王丽晖 段惠军 +2 位作者 史永红 刘青娟 刘淑霞 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期501-505,共5页
目的探讨高糖状态下肾小球系膜细胞中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、其上游因子MAPK激酶3/6(MKK3/6)和下游因子cAMP反应元件结合蛋白1(CREB1)的表达以及血管紧张素受体1拮抗剂(AT1Ra)缬沙坦的影响。方法体外培养大鼠肾小球系膜细胞... 目的探讨高糖状态下肾小球系膜细胞中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、其上游因子MAPK激酶3/6(MKK3/6)和下游因子cAMP反应元件结合蛋白1(CREB1)的表达以及血管紧张素受体1拮抗剂(AT1Ra)缬沙坦的影响。方法体外培养大鼠肾小球系膜细胞,分别给予高糖和缬沙坦干预,采用Western bolt检测MKK3/6、p38 MAPK和CREB1及其磷酸化蛋白的表达,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测系膜细胞内TGF-β1和FN mRNA的表达。放免法测定细胞上清液中纤维连接蛋白(FN)和IV型胶原的含量。MTT法检测缬沙坦在不同时间、不同药物浓度对细胞增殖状态的影响。结果①与低糖对照组相比,高糖组系膜细胞p-p38 MAPK、p-MKK3/6和p-CREB1表达明显上调,TGF-β1和FN mRNA的表达增加,FN和IV型胶原含量增加。②缬沙坦组p-p38 MAPK、p-MKK3/6和p-CREB1的表达明显下调,TGF-β1和FN mRNA的表达降低,同时FN和IV型胶原的含量减少。③MTT法检测显示不同浓度的缬沙坦对细胞增殖状态都有所抑制,并随药物浓度的增加而作用增强。结论缬沙坦抑制肾小球系膜细胞TGF-β1的表达和细胞外基质的分泌可能部分是通过影响p38 MAPK传导通路的激活来实现的。 展开更多
关键词 血管紧张素受体1拮抗剂 系膜细胞 高糖 P38丝裂原活化蛋白激酶 MAPK激酶3/6 cAMP反应元件结合蛋白1 转化生长因子β1
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血清TNF-α升高对糖尿病肾脏脂质积聚的影响研究 被引量：6
2
作者 张松 朱琳 +1 位作者 郝军 郑书深 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1161-1165,共5页
目的明确糖尿病小鼠血清TNF-α升高与肾脏脂质代谢的关系。方法 CD1小鼠按体重腹腔注射链脲佐菌素(150 mg·kg-1),72 h后空腹血糖大于16.7 mmol·L-1者确定为1型糖尿病模型,饲养1个月后,采用ELISA方法检测血清中TNF-α水平,免... 目的明确糖尿病小鼠血清TNF-α升高与肾脏脂质代谢的关系。方法 CD1小鼠按体重腹腔注射链脲佐菌素(150 mg·kg-1),72 h后空腹血糖大于16.7 mmol·L-1者确定为1型糖尿病模型,饲养1个月后,采用ELISA方法检测血清中TNF-α水平,免疫组织化学和Western blot方法检测SREBP-1和ADRP的表达。结果与正常对照小鼠相比,糖尿病小鼠血清TNF-α水平明显升高,为正常对照小鼠的7.73倍。SREBP-1和ADRP主要表达于肾小管上皮细胞,糖尿病小鼠肾脏SREBP-1前体片段、成熟片段和ADRP表达明显高于正常对照小鼠,分别是对照组的2.31倍、1.74倍和1.72倍。小鼠血清TNF-α水平和肾脏ADRP表达的相关性分析证实二者间存在正相关,相关系数为0.914。结论糖尿病小鼠血清TNF-α升高可能是导致肾脏脂质积聚的因素之一。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子A 糖尿病 肾小管上皮细胞 脂质积聚 脂肪分化相关蛋白 固醇调节元件结合蛋白-1
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敲低periostin对PDGF引起的系膜细胞增殖和细胞外基质表达的影响 被引量：3
3
作者 赵雪 郝军 +3 位作者 戎赞华 蒋丽君 封晓娟 窦志艳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1608-1612,共5页
目的 观察敲低periostin对PDGF引起的系膜细胞增殖和细胞外基质表达的影响。方法 体外培养小鼠系膜细胞,细胞以10 μg·L -1 PDGF刺激,分别于刺激0、2、4、6、12 h时收集细胞,Western blot检测periostin、PCNA、FN、TGF-β1蛋白的... 目的 观察敲低periostin对PDGF引起的系膜细胞增殖和细胞外基质表达的影响。方法 体外培养小鼠系膜细胞,细胞以10 μg·L -1 PDGF刺激,分别于刺激0、2、4、6、12 h时收集细胞,Western blot检测periostin、PCNA、FN、TGF-β1蛋白的表达水平;细胞免疫荧光检测periostin蛋白表达和定位。另外,细胞随机分为control组、PDGF组、PDGF+空质粒转染(PDGF+sh-nc)组和PDGF+periostin沉默质粒(PDGF+sh-periostin)组,后3组以10 μg·L -1 PDGF孵育6 h后终止培养,Western blot检测periostin、PCNA、FN、TGF-β1表达水平。结果 PDGF上调periostin蛋白表达,6 h达到高峰,12 h明显回落;细胞免疫荧光检测结果显示,PDGF刺激下periostin在胞质表达明显增强。PDGF可导致PCNA、FN、TGF-β1表达增强。periostin沉默质粒能够抑制PDGF引起的系膜细胞增殖和细胞外基质表达,下调PCNA、FN、TGF-β1蛋白表达。结论 PDGF诱导periostin在体外培养的小鼠系膜细胞表达增加,并上调系膜细胞增殖水平和细胞外基质表达水平。periostin沉默质粒部分逆转PDGF引起的系膜细胞增殖和FN、TGF-β1蛋白表达。 展开更多
关键词 PERIOSTIN PDGF PCNA TGF-β1 FN 小鼠系膜细胞
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三氧化二砷对高迁移率族蛋白诱导的大鼠滑膜细胞增殖的抑制作用 被引量：2
4
作者 郭惠芳 刘淑霞 +5 位作者 张玉军 左连富 郭建文 张欣 张景坤 张悦 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期108-111,172,共5页
目的:探讨三氧化二砷(AS2O3)对高迁移率族蛋白1(HMGB1)诱导的大鼠滑膜细胞(RSC-364细胞)增殖的抑制作用及其机制。方法:将常规培养的RSC-364细胞分为正常对照组、HMGB1组及HMGB1加0、5、10、20、40和80μmol·L-1AS2O3实验组;MTT法... 目的:探讨三氧化二砷(AS2O3)对高迁移率族蛋白1(HMGB1)诱导的大鼠滑膜细胞(RSC-364细胞)增殖的抑制作用及其机制。方法:将常规培养的RSC-364细胞分为正常对照组、HMGB1组及HMGB1加0、5、10、20、40和80μmol·L-1AS2O3实验组;MTT法检测不同浓度AS2O3对RSC-364细胞生长的影响,RT-PCR检测STAT1mRNA的表达变化,免疫细胞化学和流式细胞术检测STAT1、cyclinD1和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达的变化。结果:①MTT结果显示,AS2O3可抑制HMGB1诱导的RSC-364细胞的增殖,80μmol·L-1AS2O3作用24h抑制率可达88.18%,其抑制作用呈时间和浓度依赖性(P<0.05或P<0.01);②与对照组比较,HMGB1组STAT1mRNA及STAT1、PCNA、cyclinD1蛋白表达量增强,AS2O3组STAT1mRNA及STAT1、PCNA、cyclinD1蛋白降低,并呈剂量依赖性(P<0.01);③STAT1与cyclinD1蛋白表达呈正相关关系(r=0.842,P=0.001)。结论:AS2O3能够抑制HMGB1诱导的滑膜细胞的增殖,其机制可能与抑制STAT1的活性从而下调细胞周期调节蛋白cyclinD1的表达有关。 展开更多
关键词 滑膜细胞 砷剂 高迁移率族蛋白类 信号转导和转录激活子1 细胞周期蛋白D1
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INF-γ对体外培养的系膜细胞HMGB1和MMP-2表达的影响 被引量：2
5
作者 刘淑霞 郭惠芳 +4 位作者 郝军 张玉军 唐丽娟 陈宁 段惠军 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期47-50,195,共5页
目的:探讨INF-γ对体外培养的人肾小球系膜细胞高迁移率族蛋白1(HMGB1)和基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达的影响及可能机制,为系统性红斑狼疮(SLE)肾脏损害的治疗提供依据。方法:将常规培养的人肾小球系膜细胞分为正常对照组和INF-γ刺激组,... 目的:探讨INF-γ对体外培养的人肾小球系膜细胞高迁移率族蛋白1(HMGB1)和基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达的影响及可能机制,为系统性红斑狼疮(SLE)肾脏损害的治疗提供依据。方法:将常规培养的人肾小球系膜细胞分为正常对照组和INF-γ刺激组,于6、12和24 h收集细胞和上清,RT-PCR和免疫细胞化学法检测HMGB1 mRNA和蛋白表达;双抗夹心ELISA法检测细胞培养上清中HMGB1和MMP-2表达;免疫细胞化学法检测细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)和MMP-2表达。结果:与对照组比较,INF-γ刺激组系膜细胞PCNA蛋白表达强度增加,INF-γ刺激12和24 h时系膜细胞中HMGB1 mRNA水平明显增加(P<0.01),HMGB1蛋白表达强度增加;培养上清中HMGB1浓度明显增加(P<0.01);与对照组比较,INF-γ刺激组系膜细胞中MMP-2表达强度增加,培养上清中MMP-2蛋白水平升高(P<0.01);培养上清中HMGB1浓度与MMP-2蛋白表达量呈正相关关系(r=0.915,P<0.01)。结论:INF-γ通过促进系膜细胞合成和分泌HMGB1而上调MMP-2的表达,可能与SLE肾脏损伤有关联。 展开更多
关键词 狼疮肾炎 干扰素Ⅱ型 高迁移率族蛋白质类 明胶酶A
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异丙酚对第三丁基过氧化氢诱导的心肌细胞凋亡的保护作用 被引量：2
6
作者 赵松 解丽君 +1 位作者 张建新 李兰芳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1051-1055,共5页
目的观察异丙酚对第三丁基过氧化氢(t-BHP)诱导的心肌细胞凋亡的影响并探讨可能的机制。方法采用SD新生大鼠进行心肌细胞原代培养。实验分为5组:正常对照组、t-BHP组和异丙酚1、10、30μmol.L-1组。分光光度计法检测细胞内谷胱甘肽(GSH... 目的观察异丙酚对第三丁基过氧化氢(t-BHP)诱导的心肌细胞凋亡的影响并探讨可能的机制。方法采用SD新生大鼠进行心肌细胞原代培养。实验分为5组:正常对照组、t-BHP组和异丙酚1、10、30μmol.L-1组。分光光度计法检测细胞内谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平和超氧化物岐化酶(SOD)活性;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞线粒体活性,罗丹明123(Rhodamine123)荧光染色、流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位(ΔΨm),流式细胞术(FCM)测定细胞凋亡率,Western blot法检测caspase-3的表达。结果与正常对照组相比,100μmol.L-1的t-BHP处理心肌细胞4 h后,细胞内GSH水平明显下降(P<0.05),MDA含量增加(P<0.01),抗氧化酶SOD活性降低(P<0.01),细胞线粒体活性降低(P<0.01),线粒体膜电位ΔΨm明显下降(P<0.01),细胞凋亡率和caspase-3的表达明显升高(P<0.01);异丙酚10、30μmol.L-1能减少过氧化氢所致的细胞中MDA含量升高;提高SOD活性和GSH水平;提高线粒体活性、膜电位;抑制心肌细胞凋亡和caspase-3的表达升高(P(0.05,P(0.01)。结论异丙酚能减弱过氧化氢所致的心肌细胞凋亡,其作用机制可能是通过减少活性氧自由基导致的细胞膜氧化损伤、提高线粒体活性、维持线粒体的膜电位,从而抑制心肌细胞凋亡的发生。 展开更多
关键词 异丙酚 大鼠 心肌细胞 凋亡 第三丁基过氧化氢 线粒体
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L-精氨酸对糖尿病大鼠心肌组织钙泵及钠钾泵功能的影响 被引量：2
7
作者 朱方 刘芳 +2 位作者 甄艳军 周晓红 张雪静 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2003年第5期744-746,共3页
目的 :探讨左旋精氨酸 (L 精氨酸 )对实验性糖尿病大鼠心肌组织钙泵及钠 钾泵功能的影响。方法 :应用链脲佐菌素 (STZ)制备大鼠糖尿病模型 ,随机分为糖尿病模型组、L 精氨酸组、正常对照组 ,用药第 8周末处死动物 ,检测血糖、血中NO含量... 目的 :探讨左旋精氨酸 (L 精氨酸 )对实验性糖尿病大鼠心肌组织钙泵及钠 钾泵功能的影响。方法 :应用链脲佐菌素 (STZ)制备大鼠糖尿病模型 ,随机分为糖尿病模型组、L 精氨酸组、正常对照组 ,用药第 8周末处死动物 ,检测血糖、血中NO含量和NOS活性 ,以及心肌组织的Ca2 + ATP酶、Na+ K+ ATP酶活性 ,分析L 精氨酸对糖尿病大鼠心肌钙泵及钠 钾泵功能的影响。结果 :与模型组比 ,L 精氨酸可以明显降低糖尿病大鼠血糖 ((8.5± 2 .4 )mmol/Lvs (2 5 .8± 4 .3)mmol/L ,P <0 .0 1) ,增加血清中NO含量及NOS活性 (P <0 .0 5 ) ,使心肌组织中的Ca2 + ATP酶及Na+ K+ ATP酶活性明显增加 ((4 6 .5± 3.7) μmol/(mg·h)vs (4 2 .9± 4 .5 ) μmol/(mg·h) ,(2 5 .9± 3.6 ) μmol/(mg·h)vs (18.3± 3.2 ) μmol/(mg·h) ,P <0 .0 5 )。 结论 :糖尿病大鼠心肌存在着钙泵及钠 钾泵功能障碍 ,适当补充外源性L 精氨酸对于改善糖尿病大鼠心肌钙泵及钠 展开更多
关键词 糖尿病 心肌 L-精氨酸 CA^2+-ATP酶 NA^+-K^+-ATP酶 大鼠
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糖尿病大鼠肾脏组织中XBP-1s和ADRP的表达
8
作者 朱琳 郝军 +4 位作者 赵松 赵雪 陈宁 郑书深 段惠军 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1371-1374,共4页
目的探索糖尿病大鼠肾脏拼接型X盒子结合蛋白1(spliced X-box binding protein-1,XBP-1s)和脂肪分化相关蛋白(adipose differentiation related protein,ADRP)在糖尿病大鼠肾脏组织中的表达及二者表达的相关性。方法腹腔注射STZ成功构... 目的探索糖尿病大鼠肾脏拼接型X盒子结合蛋白1(spliced X-box binding protein-1,XBP-1s)和脂肪分化相关蛋白(adipose differentiation related protein,ADRP)在糖尿病大鼠肾脏组织中的表达及二者表达的相关性。方法腹腔注射STZ成功构建糖尿病大鼠模型,正常喂养2个月后,采用免疫组化和Western blot技术检测大鼠肾脏组织中XBP-1s和ADRP的表达。结果 XBP-1s和ADRP表达均定位于肾小管上皮细胞,对照大鼠相比,糖尿病大鼠肾小管上皮细胞中XBP-1s和ADRP表达均显著增高,分别升高2.017倍和1.544倍,差异有统计学意义(t=2.648、2.741,P<0.05)。进一步行相关性分析显示:大鼠肾脏组织中XBP-1s表达增强往往伴随着ADRP的表达增强(相关系数为0.723,P<0.05)。结论 XBP-1s表达升高可能是导致糖尿病大鼠肾脏组织中ADRP上调的因素之一。 展开更多
关键词 糖尿病 肾小管上皮细胞 大鼠 拼接型X盒子结合蛋白1 脂肪分化相关蛋白
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