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血管平滑肌细胞增殖调控机理的研究进展 被引量:18
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作者 温进坤 石缨 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1996年第2期149-152,共4页
高血压和动脉粥样硬化是以血管平滑肌细胞(VSMC)增殖为主要病理特征的疾病,研究VSMC增殖调控机制对揭示这类疾病的发病机理具有重要意义。本文介绍VSMC表型转化的基因标志、组蛋白H_1激酶p34^(cdc2)和生长因... 高血压和动脉粥样硬化是以血管平滑肌细胞(VSMC)增殖为主要病理特征的疾病,研究VSMC增殖调控机制对揭示这类疾病的发病机理具有重要意义。本文介绍VSMC表型转化的基因标志、组蛋白H_1激酶p34^(cdc2)和生长因子对VSMC增殖的调节作用等方面的研究进展。 展开更多
关键词 血管平滑肌细胞 增殖调控 高血压 动脉粥样硬化
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iNOS在不同种属血管细胞中诱导表达差异的比较研究
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作者 韩梅 温进坤 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第6期775-779,共5页
为了探讨不同种属血管细胞中iNOS基因诱导表达的差异及其分子机制,采用North-ern印迹、电泳迁移率改变分析(EMSA)和细胞转染实验对iNOS基因在人、牛、大鼠血管内皮细胞(EC)和兔、大鼠平滑肌细胞(VSMC... 为了探讨不同种属血管细胞中iNOS基因诱导表达的差异及其分子机制,采用North-ern印迹、电泳迁移率改变分析(EMSA)和细胞转染实验对iNOS基因在人、牛、大鼠血管内皮细胞(EC)和兔、大鼠平滑肌细胞(VSMC)中的诱导表达和转录调控机制进行了研究.结果显示,IL-1β可诱导人、大鼠的EC和大鼠的VSMC表达iNOS,但对兔VSMC和牛EC无诱导作用.在IL-1β+TNF-α+LPS作用下,人和大鼠血管细胞iNOS的表达活性显著高于牛和兔,同一种属动物的VSMC比EC更易被诱导活化.用含有大鼠iNOS基因上游-1037~-438片段的报告基因转染这些细胞,经细胞因子和LPS处理后,被转染细胞的CAT活性变化与细胞的iNOS表达活性相一致.上述结果表明,iNOS表达调节具有种属特异性和细胞特异性.EMSA证实在不同种属的EC和VSMC中,与iNOS基因表达调控区(-1037~-787)相互作用的蛋白因子是不均一的.提示不同种属血管细胞内特异转录因子的种类及浓度不同和(或)反式因子与顺式元件相互作用的方式不同可能是这种差异的分子基础. 展开更多
关键词 INOS 表达调节 种属 血管细胞
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大鼠iNOS基因上游调控区在转录激活中的作用 被引量:3
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作者 韩梅 温进坤 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第5期498-502,共5页
为了探讨大鼠iNOS基因上游调控区不同部位在对细胞因子诱导应答中所起的作用,将调控区不同部位插入pSV0-CAT报告基因载体,转染体外培养的血管平滑肌细胞(VSMC),经IL-1β诱导后,采用氯霉素乙酰转移酶(CAT... 为了探讨大鼠iNOS基因上游调控区不同部位在对细胞因子诱导应答中所起的作用,将调控区不同部位插入pSV0-CAT报告基因载体,转染体外培养的血管平滑肌细胞(VSMC),经IL-1β诱导后,采用氯霉素乙酰转移酶(CAT)活性测定和Northern印迹杂交,检查了调控区各部位在IL-1β诱导cat表达中所起的作用.结果表明,被转染的细胞在未经IL-1β刺激时,各种调控区序列启动cat表达的活性均很低.在IL-1β作用下,调控区远端序列(-1037~-438)、近端序列(-437~+46)和全长序列(-1037~+46)均能独立激活cat表达,其中以全长序列的作用最强,表明iNOS基因表达调控区远端和近端序列均具有启动子和增强子样功能.同时证实,远端序列和近端序列单独启动cat表达的活性分别为全长序列的91.3%和67.1%,揭示大鼠iNOS基因调控区远端序列在介导IL-1β的应答反应中发挥更重要作用. 展开更多
关键词 INOS基因 转录激活 大鼠 IL-1Β
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反义癌基因c-jun对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响 被引量:5
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作者 石缨 温进坤 《生物化学杂志》 CSCD 1996年第2期153-156,共4页
构建可表达原癌基因c-jun正义和反义RNA的真核细胞表达载体,将其导入体外培养的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)后,经Northern分析证实,两种插入方向的cjun基因均在VSMC中大量表达; ̄3H-TdR参入实验... 构建可表达原癌基因c-jun正义和反义RNA的真核细胞表达载体,将其导入体外培养的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)后,经Northern分析证实,两种插入方向的cjun基因均在VSMC中大量表达; ̄3H-TdR参入实验表明,c-jun反义RNA对VSMC的增殖具有显著抑制作用.提示用反义核酸抑制c-jun表达对治疗某些由于VSMC增殖所引起的心血管病可能具有一定意义. 展开更多
关键词 心脏血管疾病 血管平滑肌细胞 癌基因 C-JUN
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内皮素受体反义寡聚核苷酸对内皮素受体基因表达及血管平滑肌细胞增殖的影响 被引量:5
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作者 胡静 温进坤 《生物化学杂志》 CSCD 1996年第2期157-160,共4页
关键词 心脏血管疾病 血管平滑肌细胞 内皮素受体
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大鼠诱导型一氧化氮合酶基因转录调控区的克隆与鉴定 被引量:3
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作者 韩梅 温进坤 《生物化学杂志》 CSCD 1997年第5期525-530,共6页
采用单特异引物PCR克隆法,得到大鼠诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因转录调控区DNA片段.核酸序列分析证实,大鼠iNOS基因的5′-侧翼区含有IFN-γ和TNF-α应答元件及NF-κB结合位点的保守序列.这些保守序... 采用单特异引物PCR克隆法,得到大鼠诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因转录调控区DNA片段.核酸序列分析证实,大鼠iNOS基因的5′-侧翼区含有IFN-γ和TNF-α应答元件及NF-κB结合位点的保守序列.这些保守序列的位置及排列显著区别于人和小鼠的iNOS基因.电泳迁移率改变分析(EMSA)表明,VSMC受IL-1和IFN-γ刺激后,细胞核内产生某种可与iNOS基因5′-侧翼区特异结合的核蛋白因子. 展开更多
关键词 诱导型 一氧化氮合酶 转录调控区 基因克隆
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IL-1β对正常和自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞iNOS基因转录调控因子的影响 被引量:2
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作者 韩梅 温进坤 《生物化学杂志》 CSCD 1997年第6期644-648,共5页
用IL-1β处理体外培养的SHR和WKY大鼠血管平滑肌细胞(VSMC),比较两种大鼠iNOS基因表达活性的变化,Northernblot结果表明,VSMC受IL-1β刺激后,两种细胞的iNOS基因均表现出极高的转录活... 用IL-1β处理体外培养的SHR和WKY大鼠血管平滑肌细胞(VSMC),比较两种大鼠iNOS基因表达活性的变化,Northernblot结果表明,VSMC受IL-1β刺激后,两种细胞的iNOS基因均表现出极高的转录活性,并且SHR的iNOSmRNA水平高于WKY大鼠.以大鼠iNOS基因转录调控区上游600bp(-1037~-438)和下游500bp(-437~46)DNA片段为探针,与VSMC核蛋白孵育后,进行凝胶电泳迁移率改变分析(EMSA),结果显示,两种大鼠的VSMC被IL-1β处理后,其核蛋白可分别与转录调控区上游或下游序列结合形成一条电泳滞后带.但是,转录调控区上游序列和下游序列与核蛋白形成的复合物具有明显不同的电泳迁移率.与WKY大鼠相比,SHR的VSMC核蛋白与DNA结合活性较高.提示SHR的VSMCiNOS基因及其转录调控因子对IL-1β的反应与WKY大鼠明显不同. 展开更多
关键词 INOS基因 转录调控因子 高血压 白细胞介素-1
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碱性成纤维细胞生长因子对大鼠肾小球系膜细胞原癌基因c-fos和c-myc表达的影响 被引量:1
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作者 刘静芳 温进坤 《生物化学杂志》 CSCD 1997年第6期661-665,共5页
在建立大鼠肾小球系膜细胞(MC)体外培养方法的基础上,通过3H-TdR参入实验,RNA印迹分析和斑点杂交观察bFGF对MCDNA合成及原癌基因c-fos和c-myc表达的影响.结果表明,bFGF作用于MC18h,MC... 在建立大鼠肾小球系膜细胞(MC)体外培养方法的基础上,通过3H-TdR参入实验,RNA印迹分析和斑点杂交观察bFGF对MCDNA合成及原癌基因c-fos和c-myc表达的影响.结果表明,bFGF作用于MC18h,MC的3H-TdR参入率明显增加(P<0.05),24h达到高峰(P<0.01);bFGF显著诱导原癌基因c-fos和c-myc表达,其表达活性分别于30min和1h达到高峰.提示bFGF是MC的强效丝裂原,其对MCDNA合成的促进作用与诱导原癌基因c-fos和c-myc表达有关. 展开更多
关键词 肾小球疾病 bFGF 肾小球系膜细胞 原癌基因
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