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肿瘤间质成纤维细胞对体外培养唾液腺多形性腺瘤细胞生物学行为的影响
1
作者 侯亚丽 李荷香 +3 位作者 宋鹏 杨艳霄 郝亚丽 刘慧娟 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期149-156,共8页
目的探讨肿瘤间质成纤维细胞(TSF)对体外培养唾液腺多形性腺瘤(SPA)细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法采用组织块培养法培养唾液腺多形性腺瘤细胞(SPAC)、TSF和瘤旁正常成纤维细胞(NF),并通过免疫细胞化学染色法进行细胞鉴定。选取对数... 目的探讨肿瘤间质成纤维细胞(TSF)对体外培养唾液腺多形性腺瘤(SPA)细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法采用组织块培养法培养唾液腺多形性腺瘤细胞(SPAC)、TSF和瘤旁正常成纤维细胞(NF),并通过免疫细胞化学染色法进行细胞鉴定。选取对数期TSF、NF制备条件培养液,培养SPAC并命名为TSF-SPAC组和NF-SPAC组,单纯培养SPAC作为对照组(SPAC组)。采用MTT实验、Transwell实验和划痕实验分别检测3组细胞的增殖、侵袭和迁移能力;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测3组培养液中血管内皮生长因子(VEGF)的表达量。结果免疫细胞化学染色显示:波形蛋白(Vimentin)在TSF和NF中为阳性,而α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和成纤维细胞活化蛋白(FAP)在NF中为阴性,在TSF中为弱阳性。MTT结果显示:TSF-SPAC组细胞增殖与NF-SPAC组和SPAC组的差异有统计学意义(P<0.05),NF-SPAC组与SPAC组的细胞增殖的差异无统计学意义(P>0.05)。Transwell侵袭实验和迁移实验显示:3组细胞的侵袭和迁移的差异无统计学意义(P>0.05)。ELISA检测结果显示:3组VEGF的表达量的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论TSF可能参与了SPA的生物学行为,促进体外培养的SPAC增殖,对其体外侵袭和迁移无促进作用,为SPA寻找新的治疗靶点提供了方向。 展开更多
关键词 唾液腺多形性腺瘤 肿瘤间质成纤维细胞 增殖 侵袭 迁移 交界性肿瘤
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大麻素2型受体在加速正畸牙移动中的作用
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作者 范登莹 翟浩嫣 +6 位作者 刘慧娟 赵圆 李东娜 乔星 康文静 朱德超 刘春艳 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第2期212-218,共7页
目的 探讨大麻素2型受体(CB2)在正畸过程中对小鼠正畸牙移动(OTM)速率和压力侧牙周组织改建的作用。方法 筛选CB2^(-/-)和同窝WT型各30只雄性小鼠,6周龄时建立牙齿移动模型,建模时间分别为0、3、7、14、21 d(n=6)后取材,经体视显微镜测... 目的 探讨大麻素2型受体(CB2)在正畸过程中对小鼠正畸牙移动(OTM)速率和压力侧牙周组织改建的作用。方法 筛选CB2^(-/-)和同窝WT型各30只雄性小鼠,6周龄时建立牙齿移动模型,建模时间分别为0、3、7、14、21 d(n=6)后取材,经体视显微镜测量牙移动距离;HE染色观察根压力区牙周组织变化;TRAP染色统计根压力区破骨细胞数量;免疫组织化学染色观察根压力区基质金属蛋白酶-9(MMP-9)阳性单核细胞和多核细胞的数量变化。结果 正畸牙移动距离测量结果显示,在21 d内,随着时间延长,牙齿移动距离逐渐增加,且3、7、14、21 d时CB2^(-/-)组牙齿移动距离均较WT小鼠增加;HE染色显示OTM第14天时CB2^(-/-)小鼠压力区牙周膜间隙宽度大于WT小鼠(P<0.000 1);TRAP染色显示14 d时,在第一磨牙远中根压力区硬骨板处,CB2^(-/-)小鼠的破骨细胞数量大于WT小鼠(P<0.001);MMP-9免疫组织化学染色显示OTM 14 d时,在压力区牙周膜区域,CB2^(-/-)小鼠的MMP-9(+)单核细胞和MMP-9(+)多核细胞数量均大于WT小鼠(P<0.05)。结论 CB2可加速正畸力作用下牙齿移动速率。CB2缺失加速正畸牙移动是通过加速牙移动过程中压力侧骨吸收实现的。 展开更多
关键词 大麻素2型受体 正畸牙移动 压力区 骨改建 破骨细胞
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大麻素受体2抑制对口腔黏膜天疱疮棘层松解影响的研究
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作者 刘慧娟 宋鹏 +3 位作者 侯亚丽 霍晓 秘利进 刘春艳 《华西口腔医学杂志》 2025年第6期829-836,共8页
目的利用大麻素受体2(CB2)抑制剂和天疱疮血清共培养HaCaT细胞,探讨CB2抑制对HaCaT细胞桥粒黏蛋白3(DSG3)的影响。方法采用免疫组织化学染色观察天疱疮患者和正常受试者黏膜中CB受体表达,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测天疱疮患者和正常... 目的利用大麻素受体2(CB2)抑制剂和天疱疮血清共培养HaCaT细胞,探讨CB2抑制对HaCaT细胞桥粒黏蛋白3(DSG3)的影响。方法采用免疫组织化学染色观察天疱疮患者和正常受试者黏膜中CB受体表达,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测天疱疮患者和正常受试者血清中CB2含量,对天疱疮患者血清CB2浓度与DSG表达进行相关性分析。CCK-8检测不同浓度AM630对HaCaT细胞的抑制作用,计算AM630对HaCaT细胞的半数抑制浓度(IC_(50))并作为抑制剂实验浓度。将正常受试者、天疱疮患者血清分别与完全培养液1∶1比例共培养HaCaT细胞作为阴性对照组和天疱疮组,完全培养液培养的HaCaT细胞作为对照组,天疱疮组培养液稀释AM630至IC_(50)浓度后培养的HaCaT细胞作为AM630组。实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)、蛋白印迹(Western blot)检测4组CB2、DSG3、β-catenin基因和蛋白的表达。细胞解离实验观察AM630对HaCaT细胞黏附功能的影响。结果免疫组织化学染色显示天疱疮黏膜与正常黏膜组织中CB2表达差异有统计学意义(P<0.0001),CB1表达差异无统计学意义。ELISA检测表明,正常受试者与天疱疮患者血清CB2的表达差异有统计学意义(P<0.001)。天疱疮患者血清CB2表达与DSG3表达呈正相关(r=0.831,P=0.003)。CCK-8检测表明,AM630对HaCaT细胞的半数抑制浓度IC_(50)为0.55μmol/L。实时荧光定量PCR、Western blot结果显示,天疱疮组CB2、DSG3表达升高,β-catenin表达降低,与AM630组差异有统计学意义(P<0.05)。结论口腔黏膜天疱疮中CB2高表达,AM630抑制天疱疮引起的CB2、DSG3高表达及β-catenin低表达,可为天疱疮治疗提供新的治疗靶点和思路。 展开更多
关键词 大麻素受体 自身免疫性疾病 天疱疮 桥粒黏蛋白 HaCaT细胞
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