目的探讨Gli表达下调对食管鳞癌KYSE-30细胞周期分布和上皮-间质转化能力的影响及其分子机制。方法将Gli1和Gli2 si RNA和空白对照si RNA分别转染KYSE-30细胞48 h,实时荧光定量PCR法检测Gli1、Gli2 m RNA表达水平;Western blot法检测KYS...目的探讨Gli表达下调对食管鳞癌KYSE-30细胞周期分布和上皮-间质转化能力的影响及其分子机制。方法将Gli1和Gli2 si RNA和空白对照si RNA分别转染KYSE-30细胞48 h,实时荧光定量PCR法检测Gli1、Gli2 m RNA表达水平;Western blot法检测KYSE-30细胞Gli1、Gli2、Cyclin D1、Cyclin D2、p21、波形蛋白(Vimentin)和β-catenin蛋白的表达;流式细胞术检测KYSE-30细胞周期分布;Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力。结果与空白对照si RNA组相比,Gli1和Gli2 si RNA可明显抑制KYSE-30细胞Gli1、Gli2 m RNA和蛋白表达,下调Cyclin D1、Cyclin D2、Vimentin和β-catenin蛋白的表达和增加p21蛋白表达,将细胞周期阻滞在G0/G1期并降低细胞的侵袭能力,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 Gli蛋白表达可能在食管鳞癌的发生发展中具有重要作用,下调Gli1和Gli2表达可导致食管鳞癌细胞增殖、细胞周期分布和上皮-间质转化能力的改变,这可能与Cyclin D1、Cyclin D2、p21、Vimentin和β-catenin蛋白变化相关。展开更多
文摘目的探讨Gli表达下调对食管鳞癌KYSE-30细胞周期分布和上皮-间质转化能力的影响及其分子机制。方法将Gli1和Gli2 si RNA和空白对照si RNA分别转染KYSE-30细胞48 h,实时荧光定量PCR法检测Gli1、Gli2 m RNA表达水平;Western blot法检测KYSE-30细胞Gli1、Gli2、Cyclin D1、Cyclin D2、p21、波形蛋白(Vimentin)和β-catenin蛋白的表达;流式细胞术检测KYSE-30细胞周期分布;Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力。结果与空白对照si RNA组相比,Gli1和Gli2 si RNA可明显抑制KYSE-30细胞Gli1、Gli2 m RNA和蛋白表达,下调Cyclin D1、Cyclin D2、Vimentin和β-catenin蛋白的表达和增加p21蛋白表达,将细胞周期阻滞在G0/G1期并降低细胞的侵袭能力,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 Gli蛋白表达可能在食管鳞癌的发生发展中具有重要作用,下调Gli1和Gli2表达可导致食管鳞癌细胞增殖、细胞周期分布和上皮-间质转化能力的改变,这可能与Cyclin D1、Cyclin D2、p21、Vimentin和β-catenin蛋白变化相关。
