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2018年医学免疫学领域国家自然科学基金项目申请与资助概况 被引量:3
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作者 王佳 杨建岭 吕群燕 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期123-128,共6页
2018年度国家自然科学基金委员会医学科学部医学免疫学领域接收面上项目、青年科学基金项目(简称青年项目)和地区科学基金项目(简称地区项目)共1 205项,分布于16个分支代码,研究内容涉及了医学免疫学各个领域的科学问题。本文将介绍和总... 2018年度国家自然科学基金委员会医学科学部医学免疫学领域接收面上项目、青年科学基金项目(简称青年项目)和地区科学基金项目(简称地区项目)共1 205项,分布于16个分支代码,研究内容涉及了医学免疫学各个领域的科学问题。本文将介绍和总结2018年度医学免疫学领域国家自然科学基金面上项目、青年项目和地区项目的申请、评审及资助情况,期待能为今后科研人员申请医学免疫学国家自然科学基金有所裨益。 展开更多
关键词 国家自然科学基金委员会 医学免疫学 项目申请 资助 面上项目 基金项目 医学科学 科研人员
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CD4^+CD25^+调节性T细胞在自身免疫性甲状腺疾病中数量和功能变化 被引量:11
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作者 高书涛 朱铁年 +3 位作者 张玉娜 刘桂红 周卫华 赵瑞景 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期269-273,共5页
目的:探讨自身免疫性甲状腺疾病患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)的数量和功能变化。方法:采用化学发光法测定20例初发Graves’病人、20例初发桥本甲状腺炎(HT)患者及20例健康体检者血清中促甲状腺素(TSH)、总三碘甲状腺原氨酸(... 目的:探讨自身免疫性甲状腺疾病患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)的数量和功能变化。方法:采用化学发光法测定20例初发Graves’病人、20例初发桥本甲状腺炎(HT)患者及20例健康体检者血清中促甲状腺素(TSH)、总三碘甲状腺原氨酸(TT3)、总甲状腺素(TT4)、甲状腺球蛋白抗体(TgAb)和甲状腺过氧化酶抗体(TPOAb)的水平;用流式细胞仪分析外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+T细胞及CD4+CD25+Tregs的数量;采用磁珠分选技术分选5例HT病人和5例健康体检者PBMC中CD4+CD25+Tregs和CD4+CD25-T细胞,采用MTT法检测CD4+CD25+Tregs对自身CD4+CD25-T细胞增殖的抑制作用;提取各组PBMC的总RNA,经Real time-PCR检测TGFβ-1、Foxp3 mRNA的表达水平。结果:流式细胞检测结果显示,初发Graves’病人、初发HT患者外周血PBMC中CD4+T细胞数量与正常人比较无差异(P<0.05);初发HT患者外周血PBMC中CD4+CD25+Tregs占CD4+T细胞的比率为(1.55%±0.49%),明显低于正常对照组(2.86%±1.04%)(P<0.05);初发Graves’病人外周血PBMC中CD4+CD25+Tregs占CD4+T细胞的比率为(3.25%±0.97%),与正常对照组(2.86%±1.04%)相比无显著性差异(P<0.05)。MTT结果显示,初发HT患者CD4+CD25+Tregs对自身CD4+CD25-T细胞增殖的抑制百分率为15.7%±5.36%,与正常组(41.7%±9.87%)相比显著降低(P<0.05)。Real time-PCR结果显示,初发Graves’病人、初发HT患者PBMC的TGFβ-1 mRNA表达水平分别为(0.37±0.10)和(0.43±0.09),均明显低于正常对照组(1.02±0.04)(P<0.05);初发Graves’病人、初发HT患者PBMC的Foxp3 mRNA表达水平分别为0.62±0.09和0.42±0.29,均明显低于正常对照组(0.99±0.17)(P<0.05)。结论:本研究结果提示,HT患者外周血中CD4+CD25+Tregs的数量和功能明显降低。Graves’病和HT患者外周血PBMC中TGFβ-1、Foxp3 mRNA表达水平明显降低。 展开更多
关键词 TREGS Graves’病 桥本甲状腺炎 TGF-β1 FOXP3
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CD4^+调节性T细胞与自身免疫性甲状腺疾病 被引量:5
3
作者 姚智燕 单宝恩 +1 位作者 赵瑞景 杨建岭 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期858-862,共5页
关键词 自身免疫性甲状腺疾病 调节性T细胞 CD4^+ 机体免疫系统 cells 自身免疫病 免疫应答 自身抗原
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固有免疫细胞对结核分枝杆菌的免疫识别 被引量:7
4
作者 吴小娥 陈晶 宋淑霞 《中国防痨杂志》 CAS 2015年第2期189-193,共5页
由结核分枝杆菌感染引起的肺结核已成为非常重要的健康问题,全球每年因结核病死亡的患者超过200万例。机体的固有免疫在抵抗结核分枝杆菌感染过程中发挥了重要作用。多种模式识别受体参与了固有免疫细胞对结核分枝杆菌的识别,包括Tol... 由结核分枝杆菌感染引起的肺结核已成为非常重要的健康问题,全球每年因结核病死亡的患者超过200万例。机体的固有免疫在抵抗结核分枝杆菌感染过程中发挥了重要作用。多种模式识别受体参与了固有免疫细胞对结核分枝杆菌的识别,包括Toll样受体(TLR)、C-型凝集素受体及核苷酸结合寡聚化结构域(NOD)样受体。在Toll样受体中,TLR2、TLR4及TLR9及其接头分子髓样分化因子(MyD88)在启动针对结核分枝杆菌感染的免疫应答方面发挥了主要作用。另外,其他的模式识别受体,如NOD2、树突状细胞相关性C型植物血凝素-1(Dectin-1)、甘露糖受体及树突状细胞表面特异性C型凝集素-细胞间黏附分子3结合非整合素分子(DC-SIGN)也参与对结核分枝杆菌的识别。流行病学研究发现,模式识别受体基因突变影响机体对结核分枝杆菌感染的易感性。因此,深入研究模式识别受体对结核分枝杆菌的识别特点及基因多态性分布特征,对加深了解结核分枝杆菌致病特点、设计新型抗结核的免疫制剂可提供理论支持。 展开更多
关键词 受体 模式识别 结核分枝杆菌 免疫 细胞
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stat3信号促进肿瘤免疫抑制微环境形成的研究进展 被引量:7
5
作者 常立甲 宋淑霞 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期177-181,共5页
肿瘤微环境指肿瘤在其发生发展过程中所处的内环境,由肿瘤细胞、间质细胞、微血管、微淋巴管、众多细胞因子及少量浸润细胞等共同构成。肿瘤微环境在促进肿瘤细胞生长、增殖的同时,也为肿瘤细胞的侵袭转移及逃避机体免疫系统的攻击提供... 肿瘤微环境指肿瘤在其发生发展过程中所处的内环境,由肿瘤细胞、间质细胞、微血管、微淋巴管、众多细胞因子及少量浸润细胞等共同构成。肿瘤微环境在促进肿瘤细胞生长、增殖的同时,也为肿瘤细胞的侵袭转移及逃避机体免疫系统的攻击提供了必要的条件。 展开更多
关键词 肿瘤免疫抑制 肿瘤微环境 STAT3 肿瘤细胞生长 信号 机体免疫系统 多细胞因子 间质细胞
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肿瘤及肿瘤基质细胞释放的外泌体对肿瘤耐药产生的影响 被引量:8
6
作者 陈芳 张雯 +1 位作者 宋淑霞 钱雪松 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期432-436,共5页
恶性肿瘤已成为当今严重威胁人类健康的疾病之一,存在早发现难、治愈率低和预后差等三大难点。虽然,化疗是癌症治疗的主要手段,但由此产生的耐药也是当今影响疗效的最棘手问题之一,从而使患者面对无药可用的尴尬境地。外泌体(exosomes)... 恶性肿瘤已成为当今严重威胁人类健康的疾病之一,存在早发现难、治愈率低和预后差等三大难点。虽然,化疗是癌症治疗的主要手段,但由此产生的耐药也是当今影响疗效的最棘手问题之一,从而使患者面对无药可用的尴尬境地。外泌体(exosomes)作为细胞间信息传递的重要通讯员,在肿瘤耐药传递方面发挥重要作用。研究发现,肿瘤细胞和肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)中的基质细胞均可分泌携带耐药相关分子(包括蛋白质和miRNAs等)的外泌体,并通过外泌体在TME中相互作用,传递耐药分子,从而增强肿瘤细胞对药物的耐受性;同时肿瘤细胞外泌体还可以介导药物外排,从而影响药效;基质细胞也可与肿瘤细胞相互作用影响肿瘤细胞对药物的敏感性。同时,这些机制的发现也为克服肿瘤耐药提供了新思路,研究表明通过去除或抑制含耐药分子的外泌体,或者通过改变外泌体的成分(减少耐药分子或增加抗耐药分子),可在一定程度上逆转耐药。本文就肿瘤及肿瘤基质细胞释放的外泌体在肿瘤耐药中的作用以及由此而来的耐药逆转的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 肿瘤耐药 外泌体 肿瘤细胞 基质细胞 逆转
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吡咯烷二硫代氨基甲酸酯对2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用 被引量:8
7
作者 张新杰 刘建坤 +3 位作者 高冬梅 张怡梅 朱铁年 赵瑞景 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1807-1811,共5页
目的:探讨吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)对2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其机制。方法:雄性Wistar大鼠,随机分为2组:正常对照(NC)组和高脂饮食(HFD)组。喂养8周后高脂饮食组大鼠腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ,27 mg/kg),以随机血糖≥16... 目的:探讨吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)对2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其机制。方法:雄性Wistar大鼠,随机分为2组:正常对照(NC)组和高脂饮食(HFD)组。喂养8周后高脂饮食组大鼠腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ,27 mg/kg),以随机血糖≥16.7 mmol/L为2型糖尿病大鼠造模成功。将成模大鼠随机分为2组:糖尿病模型(DM)组和PDTC(50 mg.kg-1.d-1,ip)治疗组。治疗1周后断头处死大鼠,留取各组血浆、尿液及肾脏标本。测定各组血糖、尿微量白蛋白/肌酐比值、肾皮质组织中丙二醛(MDA)的含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性;经HE及Masson染色观察大鼠肾小球形态学变化;透射电镜观察肾脏微血管超微结构改变;免疫组化观察肾脏组织中诱生型一氧化氮合酶(iNOS)和硝基酪氨酸(NT)的表达。结果:PDTC治疗组血糖和尿微量白蛋白/肌酐比值较DM组明显降低(P<0.01)。DM组肾皮质组织中MDA含量明显高于NC组,GSH-Px和SOD的活性明显低于NC组(P<0.05)。HE及Masson染色显示,DM组肾小球体积增大,肾小管扩张,系膜区扩张,Masson染色阳性物质增多,提示肾小球毛细血管基底膜增厚;PDTC治疗组病理改变较DM组明显改善。电镜超微结构显示,DM组基底膜高度增厚,厚度不均,有断裂层,足突融合;PDTC治疗组基底膜轻度增厚,足突轻度融合。免疫组化显示,DM组iNOS和NT表达量较NC组明显增多(P<0.05);PDTC治疗组iNOS和NT表达量较DM组明显减少(P<0.05)。结论:PDTC不仅具有降低血糖作用,而且可通过减少iN-OS和NT表达改善糖尿病肾脏损害。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 吡咯烷二硫代氨基甲酸酯 氧化性应激 一氧化氮合酶 硝基酪氨酸
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多聚(ADP-核糖)聚合酶与细胞损伤 被引量:8
8
作者 朱铁年 赵瑞景 凌亦凌 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期104-107,共4页
Poly(ADP-ribose) polymerase(PARP) is a protein-modifying and nucleotide-polymerizing enzyme. As a critical element in DNA repair, PARP can be activated by DNA strand breaks. Excessive activation of PARP, however, can ... Poly(ADP-ribose) polymerase(PARP) is a protein-modifying and nucleotide-polymerizing enzyme. As a critical element in DNA repair, PARP can be activated by DNA strand breaks. Excessive activation of PARP, however, can deplete NAD + and ATP, leads to cell death. Cleavage of PARP by activated caspase-3 play an important role in cell apoptosis. 展开更多
关键词 细胞凋亡 聚核苷酸合成酶类 细胞损伤 细胞坏死 炎症
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Th17细胞在Graves’病中的变化及意义 被引量:4
9
作者 张玉娜 周喜娜 +2 位作者 安杰 朱铁年 赵瑞景 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期635-639,共5页
目的:探讨Th17细胞在中国人Graves’病(GD)中的变化及意义。方法:应用电化学发光法测定30例初发GD患者及30例健康体检者血清中促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺激素(FT4)、甲状腺球蛋白抗体(TgAb)和甲状腺过氧... 目的:探讨Th17细胞在中国人Graves’病(GD)中的变化及意义。方法:应用电化学发光法测定30例初发GD患者及30例健康体检者血清中促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺激素(FT4)、甲状腺球蛋白抗体(TgAb)和甲状腺过氧化酶抗体(TPOAb)的水平;采用流式细胞术检测外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+IL-17+T(Th17)细胞的数量;用ELISA法测定初发GD患者和健康对照者PBMC产生IL-17的水平;应用实时定量PCR(qRT-PCR)检测PBMC中ROR-γt、IFN-γ、IL-4 mRNA的表达量;采用免疫组化染色检测甲状腺组织中IL-17+细胞的分布和数量。结果:初发GD组外周血中Th17细胞占CD4+T细胞的比例[(20.59±4.63)%]、PBMC分泌的IL-17水平[(83.22±34.28)pg/ml]以及PBMC中ROR-γt mRNA表达(1.67±0.98)均明显高于正常对照组Th17[(11.77±4.18)%](P<0.01)、IL-17[(19.74±5.99)pg/ml](P<0.01)和ROR-γt mRNA(0.92±0.18)(P<0.05)的水平。与正常对照组比较,GD患者PBMC中IFN-γmRNA的表达(0.31±0.07)、IL-4 mRNA的表达(2.53±0.70)均明显降低(P<0.01)。初发GD组患者PBMC中Th17细胞百分率与ROR-γt mRNA表达呈正相关(r=0.5047,P=0.01);与IFN-γmRNA表达量呈负相关(r=-0.5085,P<0.01);与IL-4 mRNA表达量呈负相关(r=-0.5372,P<0.01)。正常对照组甲状腺组织中未发现IL-17+细胞,GD组甲状腺组织滤泡间质内可见散在的IL-17+细胞。结论:初发GD患者PBMC中Th17细胞数量、PBMC分泌IL-17的水平和ROR-γt mRNA表达明显增高。GD患者甲状腺组织中有IL-17+细胞浸润,提示Th17细胞可能参与了中国人GD的发生。 展开更多
关键词 Graves'disease IL-17 TH17 ROR-γt
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吡咯烷二硫代氨基甲酸酯对2型糖尿病大鼠心肌的保护作用 被引量:3
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作者 朱铁年 刘建坤 +3 位作者 刘桂红 张玉娜 张利众 赵瑞景 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1149-1153,共5页
目的:探讨吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)的降糖作用及对糖尿病大鼠心肌的保护作用。方法:37只雄性Wistar大鼠,随机分为正常对照组(NC)和高脂饮食组(HFD)。喂养8周后,高脂饮食组大鼠腹腔注射单剂量链脲佐菌素(STZ)27 mg/kg复制2型糖尿病... 目的:探讨吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)的降糖作用及对糖尿病大鼠心肌的保护作用。方法:37只雄性Wistar大鼠,随机分为正常对照组(NC)和高脂饮食组(HFD)。喂养8周后,高脂饮食组大鼠腹腔注射单剂量链脲佐菌素(STZ)27 mg/kg复制2型糖尿病大鼠模型。造模成功后再随机分为模型组和PDTC治疗组。PDTC治疗组大鼠每天腹腔注射PDTC(50 mg/kg)1次,模型组和正常对照组每天注射相同剂量的生理盐水,连续注射1周后,检测血糖及各种生化指标,处死大鼠。检测心肌组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性;用透射电镜观察心肌组织的超微结构;用免疫组化观察心肌组织中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和硝基酪氨酸(NT)的表达。结果:糖尿病模型组与正常对照组大鼠相比,血糖和MDA水平显著升高,SOD和GSH-Px活性明显下降(P<0.01);PDTC治疗后,血糖和MDA水平明显降低,SOD和GSH-Px活性明显升高(P<0.01)。糖尿病组心肌变性坏死、线粒体损伤及炎症细胞浸润;PDTC治疗后线粒体损伤明显减轻。糖尿病组较正常对照组心肌中iNOS和NT的表达均明显增加;PDTC治疗后iNOS和NT的表达均明显减少。结论:高血糖可引起氧化应激,使心肌组织中iNOS和NT生成过多,损伤了心肌细胞的结构和功能。PDTC不仅具有降糖作用,而且还可以通过减少iNOS和NT的产生,进而阻止或延缓糖尿病心肌病的发生。 展开更多
关键词 糖尿病心肌病 吡咯烷二硫代氨基甲酸酯 氧化性应激 一氧化氮合酶 硝基酪氨酸
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多聚(ADP-核糖)聚合酶和半胱天冬蛋白酶-3在过氧亚硝基阴离子致气道上皮细胞损伤中的作用 被引量:2
11
作者 赵瑞景 朱铁年 +2 位作者 凌亦凌 李彦群 单保恩 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期321-324,共4页
目的 :探讨过氧亚硝基阴离子 (ONOO-)介导气道上皮细胞损伤的作用机制。方法 :在培养的大鼠气道上皮细胞 (RTE) ,观察应用多聚 (ADP -核糖 )聚合酶 (PARP)抑制剂 3 -氨基苯甲酰胺 (3 -AB)和半胱天冬氨酸蛋白酶 - 3 (caspase - 3 )抑制剂... 目的 :探讨过氧亚硝基阴离子 (ONOO-)介导气道上皮细胞损伤的作用机制。方法 :在培养的大鼠气道上皮细胞 (RTE) ,观察应用多聚 (ADP -核糖 )聚合酶 (PARP)抑制剂 3 -氨基苯甲酰胺 (3 -AB)和半胱天冬氨酸蛋白酶 - 3 (caspase - 3 )抑制剂Ac -DEVD -CHO后 ,外源性给予ONOO-对RTE细胞乳酸脱氢酶 (LDH)释放、凋亡百分率的影响 ,用Westernblot分析PARP裂解片段。结果 :3 -AB不能完全抑制ONOO-引起的RTE细胞LDH释放率的增高。 3 -AB对ONOO-引起的RTE细胞凋亡无明显影响。Ac -DEVD -CHO呈剂量依赖性抑制ONOO-诱导的RTE细胞凋亡。ONOO-致RTE细胞凋亡过程中有PARP的裂解。结论 :PARP活化是ONOO-介导RTE细胞损伤的途径之一 ,过度的PARP活化参与了ONOO-所致的RTE细胞坏死 ;caspase - 展开更多
关键词 半胱天冬蛋白酶-3 过氧亚硝基阴离子 气道上皮细胞损伤 支气管疾病 多聚(ADP-核糖)聚合酶
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CD3ζ链引入YRHQ基序可增强靶向HER2的CAR-T细胞的抗肿瘤活性 被引量:1
12
作者 王田 张征峥 +4 位作者 王晓峰 张紫梦 张雨晴 马翠卿 宋淑霞 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期181-188,共8页
目的:探讨在靶向HER2的CAR的CD3ζ链胞内区引入YRHQ基序对CAR-T细胞的特异性杀伤活性及免疫记忆形成的影响。方法:通过DNA合成获得包含靶向HER2的编码抗原受体H28ζ或H28ζ(YRHQ)的DNA片段,通过慢病毒载体将不同CAR的DNA片段分别转导健... 目的:探讨在靶向HER2的CAR的CD3ζ链胞内区引入YRHQ基序对CAR-T细胞的特异性杀伤活性及免疫记忆形成的影响。方法:通过DNA合成获得包含靶向HER2的编码抗原受体H28ζ或H28ζ(YRHQ)的DNA片段,通过慢病毒载体将不同CAR的DNA片段分别转导健康人外周血T细胞,制备靶向HER2的H28ζ-CAR-T及H28ζ(YRHQ)-CAR-T细胞。扩增过程中对不同CAR-T细胞进行计数,FCM检测CAR的表达率。将CAR-T细胞分别与HER2阳性的SKOV3、MDA-MB-453或HER2阴性的MCF-7细胞共培养,LDH释放法检测其杀伤活性,ELISA法检测IL-2、IFN-γ和颗粒酶B的水平,WB法检测STAT3磷酸化水平及免疫检查点分子TIM-3和PD-1的表达,通过FCM检测CCR7、CD45RO的表达,分析CAR-T细胞的表型。结果:H28ζ-CAR-T和H28ζ(YRHQ)-CAR-T细胞扩增能力较好,体外培养7 d时扩增4~5倍。H28ζ-CAR和H28ζ(YRHQ)-CAR表达率分别为(33.3±2.85)%和(28.30±3.2)%。H28ξ(YRHQ)-CAR-T细胞的杀伤活性较H28ζ-CAR-T细胞更高(P<0.05)。经HER2抗原刺激后,与T细胞或H28z-CAR-T细胞比较,H28ξ(YRHQ)-CAR-T细胞的STAT3磷酸化水平较H28ξ-CAR-T细胞明显升高(P<0.01);而两者间PD-1和TIM-3的表达无明显差异。未经抗原刺激的CAR-T细胞CCR7和CD45RO表达与正常T细胞比较差异无统计学意义(均P>0.05),与SKOV3细胞共培养后,与T细胞或H28z-CAR-T细胞比较,H28ξ(YRHQ)-CAR-T细胞中T_(EM)细胞比例明显增加、T_(CM)细胞比例明显减少(均P<0.05)。结论:在CD3胞内区引入YRHQ基序可在一定程度上提高CAR-T细胞的杀伤潜力。 展开更多
关键词 人表皮生长因子受体2 CAR-T细胞 YRHQ基序 STAT3 记忆性T细胞
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人LIGHT胞外区基因的克隆及融合蛋白的表达
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作者 姚智燕 赵瑞景 +4 位作者 朱铁年 尹晓琳 冯惠东 王秀荣 马翠卿 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期37-40,共4页
目的:克隆人LIGHT胞外区基因(hsLIGHT),构建其原核表达质粒,并诱导其在大肠杆菌中表达融合蛋白。方法:采用RT-PCR方法从HL60细胞中扩增hsLIGHT,将其克隆入原核表达质粒pGEX-4T-2,构建其重组表达质粒pGEX-4T- 2/hsLIGHT,以不同浓度IPTG... 目的:克隆人LIGHT胞外区基因(hsLIGHT),构建其原核表达质粒,并诱导其在大肠杆菌中表达融合蛋白。方法:采用RT-PCR方法从HL60细胞中扩增hsLIGHT,将其克隆入原核表达质粒pGEX-4T-2,构建其重组表达质粒pGEX-4T- 2/hsLIGHT,以不同浓度IPTG诱导表达,于不同时间经SDS-PAGE和Western blot分析、鉴定。结果:经RT-PCR扩增获得的 hsLIGHT序列与Genebank报道的LIGHT基因胞外区序列完全一致;SDS-PAGE和Western blot分析证实重组质粒可表达出相对分子量为47 000的蛋白,与GST-hsLIGHT融合蛋白分子量一致。结论:成功完成了人LIGHT胞外区基因的克隆及其原核表达质粒的构建,在大肠杆菌E.coli BL21中经IPTG诱导表达了融合蛋白GST-hsLIGHT,为进一步探讨LIGHT的抗肿瘤生物学活性、探索肿瘤免疫治疗新方法奠定了基础。 展开更多
关键词 人LIGHT基因 基因克隆 融合蛋白 原核表达
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小鼠白细胞介素23基因在毕赤酵母中的诱导表达及初步活性研究
14
作者 杨建岭 姚智燕 +1 位作者 杨艺红 魏林 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期120-123,共4页
目的:克隆小鼠白细胞介素23(mice interlecukin-23,mIL-23)基因,构建高效稳定的毕赤酵母表达菌株,并对得到的蛋白进行生物活性的初步测定。方法:采用聚合酶链式反应(PCR)技术从pcDNA3-mIL-23上分别扩增获得IL-23的两亚基p19和p40,并通... 目的:克隆小鼠白细胞介素23(mice interlecukin-23,mIL-23)基因,构建高效稳定的毕赤酵母表达菌株,并对得到的蛋白进行生物活性的初步测定。方法:采用聚合酶链式反应(PCR)技术从pcDNA3-mIL-23上分别扩增获得IL-23的两亚基p19和p40,并通过重叠PCR(over-lap PCR)技术获得含有连接子的p1940,构建pPICZαA-IL-23重组质粒;采用甲醇诱导毕赤酵母表达重组蛋白,MTT方法检测诱导表达蛋白的促淋巴细胞增殖情况。结果:SDS-PAGE分析显示在诱导24小时和36小时后的上清及24~96小时的沉淀中均可以检测到约70 kD的诱导条带。Western blot印迹法证实了重组蛋白为特异性蛋白。上清和沉淀中表达的重组蛋白IL-23能促进外周血单个核细胞的增殖,OD570 nm分别达到(0.235±0.029)和(0.216±0.035),而未刺激的对照组只有(0.135±0.008)和(0.164±0.017)。结论:成功构建出mIL-23的酵母表达载体,诱导产生的蛋白可以明显地促进外周血单个核细胞的增殖。 展开更多
关键词 白细胞介素23 克隆表达 毕赤酵母 生物活性
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尿路致病性大肠杆菌Ⅰ型菌毛fimH基因真核表达质粒的构建及表达
15
作者 尹晓琳 张永红 魏林 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2003年第3期41-43,共3页
目的 构建以尿路致病性大肠杆菌Ⅰ型菌毛 fimH基因为靶位的真核表达质粒 ,并使其在小鼠肌肉中表达。 方法 应用PCR方法及基因重组技术 ,克隆了尿路致病性大肠杆菌标准菌株J96 fimH基因 ,并将fimH基因插入真核表达载体pcDNA3中。免疫BA... 目的 构建以尿路致病性大肠杆菌Ⅰ型菌毛 fimH基因为靶位的真核表达质粒 ,并使其在小鼠肌肉中表达。 方法 应用PCR方法及基因重组技术 ,克隆了尿路致病性大肠杆菌标准菌株J96 fimH基因 ,并将fimH基因插入真核表达载体pcDNA3中。免疫BALB/c小鼠 ,用免疫组化染色法观察表达情况。结果与结论 成功地构建了真核表达质粒pcDNA3-fimH ,序列分析显示 ,fimH基因核苷酸序列与GenBank上登录的一致 ,fimH蛋白在小鼠肌肉组织细胞内呈分散表达。 展开更多
关键词 尿路致病性大肠杆菌 Ⅰ型菌毛 fimH基因 真核表达质粒 构建 基因表达 兔疫组化
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非小细胞肺癌中ROS1基因重排及其临床意义 被引量:9
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作者 徐陆亭 赵瑞景 +1 位作者 董增军 朱铁年 《中国肺癌杂志》 CAS 北大核心 2013年第12期663-670,共8页
最近研究显示,包括非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)在内的许多恶性肿瘤存在ROS1受体酪氨酸激酶基因重排。ROS1基因重排作为一种新发现的NSCLC亚型,其发生率约占NSCLC的1%-2%,优势人群通常为年轻、不吸烟的肺腺癌患者,... 最近研究显示,包括非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)在内的许多恶性肿瘤存在ROS1受体酪氨酸激酶基因重排。ROS1基因重排作为一种新发现的NSCLC亚型,其发生率约占NSCLC的1%-2%,优势人群通常为年轻、不吸烟的肺腺癌患者,这些临床特征与ALK重排的NSCLC患者类似。体外实验和早期临床试验均显示,克唑替尼对ROS1重排阳性的癌症患者具有明显的抗肿瘤活性,治疗第8周和第16周时疾病控制率分别为76%和60%,治疗患者的总缓解率为56%。进一步了解ROS1基因重排在NSCLC发病中的作用,提高ROS1基因重排的检测技术,发现ROS1重排患者及研发特异性ROS1激酶抑制剂将为肿瘤个体化治疗增添新的篇章。 展开更多
关键词 ROS1受体酪氨酸激酶 间变性淋巴瘤激酶 肺肿瘤 克唑替尼 个体化治疗
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新的镇痛靶点及相应的镇痛先导化合物
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作者 郑博阳 曾瑞红 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2019年第12期1057-1065,共9页
阿片类药物是常用的镇痛药物,但有很大的副作用,包括潜在的恢复延迟和永久性残疾的风险。本文综述了N-甲基-D-天冬氨酸受体、大麻素受体、前列腺素E2受体4受体和基质金属蛋白酶受体等镇痛靶点以及一些阻断疼痛信号通路的新靶点。此外,... 阿片类药物是常用的镇痛药物,但有很大的副作用,包括潜在的恢复延迟和永久性残疾的风险。本文综述了N-甲基-D-天冬氨酸受体、大麻素受体、前列腺素E2受体4受体和基质金属蛋白酶受体等镇痛靶点以及一些阻断疼痛信号通路的新靶点。此外,还描述了一些针对于这些靶点的新的激动剂、拮抗剂和具有激动剂(拮抗剂)活性的先导化合物。与传统类阿片类药物相比,这些新化合物通常具有良好的镇痛活性和较低的副作用,它们有望发展成为新的镇痛剂,并将为需要疼痛治疗的临床患者带来福音。 展开更多
关键词 镇痛药 靶点 激动剂 拮抗剂 先导化合物
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