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山萘酚通过下调ERRα抑制非小细胞肺癌A549细胞的侵袭和迁移 被引量:35
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作者 张敬 史晓宇 +3 位作者 孟玮 马峰 赵丽霞 赵峻峰 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1230-1236,共7页
目的:探讨山奈酚(kaempferol)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)A549细胞侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法:A549细胞培养完成后,CCK-8法检测不同浓度山奈酚对A549细胞增殖的影响,Transwell和划痕实验检测A549细胞... 目的:探讨山奈酚(kaempferol)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)A549细胞侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法:A549细胞培养完成后,CCK-8法检测不同浓度山奈酚对A549细胞增殖的影响,Transwell和划痕实验检测A549细胞侵袭和迁移能力,Western blotting检测EMT相关蛋白的表达,qRT-PCR和Western blotting检测山奈酚对雌激素相关受体α(estrogen related receptor alpha, ERRα)mRNA和蛋白表达的影响。构建ERRα过表达载体pLV-ERRα转染A549细胞后,Transwell实验、划痕愈合实验和Western blotting检测A549细胞侵袭、迁移和EMT相关蛋白的表达情况。结果:山奈酚浓度依赖性抑制A549细胞增殖,选择5、10和20μmol/L山奈酚进行后续实验。经山奈酚处理后,A549细胞侵袭细胞数目显著减少、划痕愈合率显著降低、N-cadherin和Snail-2的表达显著下调,E-cadherin的表达显著上调,ERRa mRNA和蛋白水平显著降低(均P<0.01)。转染pLV-ERRα后,过表达ERRα的A549细胞的侵袭细胞数、划痕愈合率均显著增加,细胞中N-cadherin、Snail-2表达上调,而E-cadherin的表达下调(均P<0.05或P<0.01);该细胞再经山奈酚处理后,上述各指标均发生逆转变化(均P<0.05或P<0.01)。结论:山奈酚通过抑制ERRα降低NSCLC A549细胞侵袭和迁移能力,并抑制其EMT,为肺癌的临床治疗提供了实验依据。 展开更多
关键词 山奈酚 雌激素相关受体α 非小细胞肺癌 A549细胞 侵袭 迁移
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长链非编码RNA UCA1靶向miR-582-5p对膀胱癌UM-UC-3细胞生存和运动能力的调节作用及机制研究 被引量:14
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作者 王哲 张敬 +3 位作者 陈怀安 张潮 刘硕 苗文隆 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期670-674,680,共6页
目的:探究长链非编码RNA UCA1通过靶向miR-582-5p对膀胱癌细胞生存和运动能力的作用及作用机制。方法:用UCA1 shRNA(sh-UCA1)和(或)miR-582-5p inhibitor转染细胞,荧光定量检测转染效率及miR-582-5p的表达水平;荧光素酶报告实验确定UCA1... 目的:探究长链非编码RNA UCA1通过靶向miR-582-5p对膀胱癌细胞生存和运动能力的作用及作用机制。方法:用UCA1 shRNA(sh-UCA1)和(或)miR-582-5p inhibitor转染细胞,荧光定量检测转染效率及miR-582-5p的表达水平;荧光素酶报告实验确定UCA1和miR-582-5p的靶向关系;CCK8检测细胞活性,流式检测细胞凋亡情况,侵袭及划痕实验检测细胞侵袭迁移能力,免疫印迹检测细胞增殖、凋亡及迁移相关蛋白的表达。结果:sh-UCA1能显著降低膀胱癌细胞UCA1表达水平(P<0.05),促进miR-582-5p表达(P<0.05);miR-582-5p inhibitor能明显减弱sh-UCA1对miR-582-5p表达的促进作用(P<0.05);荧光素酶报告实验表明UCA1上有miR-582-5p的结合位点;沉默UCA1可显著抑制膀胱癌细胞增殖及Ki67的表达,促进细胞凋亡及cleaved caspase-3的表达(P<0.05);同时,sh-UCA1还能显著抑制膀胱癌细胞侵袭、迁移及VEGF的表达(P<0.05);此外,miR-582-5p inhibitor可显著减弱sh-UCA1对细胞增殖、凋亡及侵袭迁移能力的作用(P<0.05)。结论:UCA1可通过靶向miR-582-5p增强膀胱癌UM-UC-3细胞的生存及运动能力。 展开更多
关键词 UCA1 miR-582-5p 膀胱癌 增殖 凋亡 迁移 侵袭
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EGFR野生型晚期非小细胞肺癌的治疗进展 被引量:7
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作者 马峰 史晓宇 +4 位作者 孟玮 张敬 赵丽霞 何晓华 赵峻峰 《中国肺癌杂志》 CAS 北大核心 2014年第7期575-580,共6页
肺癌是癌症死亡的主要原因。肺癌的治疗仍是医疗界最具挑战性的任务之一。表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitor,EGFR-TKI)的发现和发展,对非小细胞肺癌(non-small cell lung ... 肺癌是癌症死亡的主要原因。肺癌的治疗仍是医疗界最具挑战性的任务之一。表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitor,EGFR-TKI)的发现和发展,对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的治疗产生了重大影响。但EGFR-TKI对EGFR野生型NSCLC的疗效较差,而有限的EGFR突变率也促使研究者们不断探索EGFR野生型NSCLC的最佳的治疗选择。本文将对EGFR野生型NSCLC的治疗现状进行综述。 展开更多
关键词 肺肿瘤 表皮生长因子受体 野生型 化疗 靶向治疗 维持治疗
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二苓苡仁汤联合斑蝥酸钠维生素B6治疗晚期结肠癌的临床观察及免疫调控作用 被引量:7
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作者 史晓宇 张敬 +2 位作者 孟玮 赵峻峰 李占林 《辽宁中医杂志》 CAS 2018年第5期987-990,共4页
目的:探讨二苓苡仁汤联合斑蝥酸钠维生素B6治疗晚期结肠癌的效果及免疫调控作用。方法:选取96例晚期结肠癌患者,采用随机排列表法将入选患者分为观察组(n=48)和对照组(n=48)。两组均采用Xelox方案化疗,同时静脉滴注斑蝥酸钠维生素... 目的:探讨二苓苡仁汤联合斑蝥酸钠维生素B6治疗晚期结肠癌的效果及免疫调控作用。方法:选取96例晚期结肠癌患者,采用随机排列表法将入选患者分为观察组(n=48)和对照组(n=48)。两组均采用Xelox方案化疗,同时静脉滴注斑蝥酸钠维生素B6,21 d为1个化疗周期,两组均连续进行4个化疗周期。观察组在上述治疗的基础上联合二苓苡仁汤辨证加减治疗,连续治疗3个月。治疗前后评价两组患者主要中医证候积分变化及疗效,评价并比较两组细胞免疫功能、FACT-C评分、KPS评分及化疗不良反应情况,随访观察患者生存情况。结果:治疗后两组口干口苦、腹痛、消瘦及观察组纳呆食少积分降低,两组大便稀溏积分升高,且观察组上述各项症状积分均低于对照组(P〈0.05)。观察组有效率60.42%显著高于对照组37.50%(P〈0.05)。与治疗前比较,治疗后两组CD3+、CD4+比例及CD4+/CD8+比值均升高,CD8+水平均降低(P〈0.05),且两组间差异显著(P〈0.05)。治疗后,观察组FACT-C及KPS评分均较治疗前升高,且高于对照组(P〈0.05)。治疗期间,观察组恶性、呕吐及腹泻的发生率均低于对照组(P〈0.05)。随访期间,观察组平均PFS较对照组延长,2年生存率较对照组升高(P〈0.05)。结论:二苓苡仁汤联合斑蝥酸钠维生素B6治疗晚期结肠癌可促进患者中医症状的改善,调节细胞免疫功能,且胃肠道不良反应发生率降低,患者生存质量及生存率提高。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 晚期 二苓苡仁汤 斑蝥酸钠维生素B6 免疫
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TRAP1通过TGF/Smad3通路对膀胱癌的迁移和侵袭能力的影响 被引量:6
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作者 王哲 张敬 +5 位作者 陈怀安 张潮 张晓云 刘硕 苗文隆 李凤歧 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1306-1309,1314,共5页
目的:探讨TRAP1蛋白对膀胱癌细胞迁移和侵袭的影响及机制。方法:采用Western blot从膀胱癌细胞株中挑选出高表达TRAP1的细胞系BIU-87;使用TRAP1沉默慢病毒(LV3-TRAP1)沉默TRAP1,使用GFP荧光及PCR检测LV3-TRAP1沉默效率;Transwell和划痕... 目的:探讨TRAP1蛋白对膀胱癌细胞迁移和侵袭的影响及机制。方法:采用Western blot从膀胱癌细胞株中挑选出高表达TRAP1的细胞系BIU-87;使用TRAP1沉默慢病毒(LV3-TRAP1)沉默TRAP1,使用GFP荧光及PCR检测LV3-TRAP1沉默效率;Transwell和划痕实验分别检测沉默TRAP1蛋白表达后对膀胱癌细胞侵袭和迁移能力的影响;CMH2DCFDA荧光染色细胞检测膀胱癌细胞内活性氧水平;Western blot检测相关信号通路TGF/Smad3蛋白的表达情况。结果:LV3-TRAP1慢病毒可以有效地抑制TRAP1蛋白的表达;沉默TRAP1蛋白的表达可以有效抑制膀胱癌细胞的侵袭和迁移能力、降低膀胱癌细胞内活性氧水平;同时TGF/Smad3信号通路中的TGF、Smad2及Smad3蛋白表达也相应降低。结论:沉默TRAP1蛋白可以通过调控TGF/Smad3信号通路来抑制膀胱癌细胞的侵袭和迁移能力。 展开更多
关键词 TRAP1 膀胱癌 TGF SMAD3 ROS
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lncRNA-GAS5调节Notch通路对肺癌A549细胞血管生成拟态的影响 被引量:10
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作者 汤建华 樊頔 +2 位作者 牛玉春 马峰 张志华 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1412-1417,共6页
目的探讨lncRNA-生长停滞特异性转录本5(growth arrest specific transcript 5,GAS5)通过调节Notch通路对肺癌A549细胞血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)的影响。方法培养人肺癌细胞A549和人正常肺细胞MRC-5,采用qRT-PCR技术检测... 目的探讨lncRNA-生长停滞特异性转录本5(growth arrest specific transcript 5,GAS5)通过调节Notch通路对肺癌A549细胞血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)的影响。方法培养人肺癌细胞A549和人正常肺细胞MRC-5,采用qRT-PCR技术检测细胞中lncRNA-GAS5的表达水平,向肺癌细胞A549转染GAS5过表达质粒(p-EGFP-C1-GAS5组)和空载体质粒p-EGFP-C1(阴性对照组),空白对照组未处理,荧光显微镜观察转染效率,收集转染后对数期细胞进行三维体外培养法,观察VM,Western blot法检测HIF-1α、VEGF、VE-cadherin、MMP-2、MMP-9及Notch通路蛋白Notch1、DLL4的表达水平。结果qRT-PCR结果显示,与正常细胞MRC-5比较,肺癌细胞A549 lncRNA-GAS5 mRNA水平显著降低(P<0.05);荧光显微镜下观察质粒转染24 h后细胞转染效率达80%;细胞转染后,与空白对照组比较,p-EGFP-C1-GAS5组lncRNA-GAS5表达水平显著升高(P<0.05),阴性对照组与空白对照组差异无显著性。肺癌A549细胞接种后10 h细胞贴附在Matrigel基质胶上彼此连接成空腔样、环状结构,形成拟态血管,转染过表达质粒的A549细胞组管腔形成数明显多于阴性对照组和空白对照组(P<0.05),阴性对照组与空白对照组差异无显著性;Western blot检测显示,p-EGFP-C1-GAS5组VEGF、VE-cadherin、HIF-1α、MMP-2、MMP-9表达水平与阴性对照组和空白对照组相比,均显著降低(P<0.05),阴性对照组和空白对照组各蛋白表达量无显著变化;p-EGFP-C1-GAS5组血管生成相关蛋白Notch1、DLL4表达水平与阴性对照组和空白对照组相比,均显著降低(P<0.05),阴性对照组和空白对照组各蛋白表达量无显著变化。结论lncRNA-GAS5过表达抑制VM的形成和血管生成相关蛋白的表达,其可能通过抑制Notch通路的激活,抑制VM的形成。 展开更多
关键词 肺肿瘤 A549细胞 血管生成拟态 NOTCH通路 lncRNA-GAS5
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