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糖尿病黄斑水肿抗VEGF治疗后视力获益早期预测模型构建与验证 被引量：1
1
作者 颜宇 钟琴 +3 位作者 陈妍鹏 杨蕾 李港逸 李爽乐 《眼科新进展》 北大核心 2025年第4期298-304,共7页
目的基于临床资料、OCTA、血清脑组织水通道蛋白4(AQP4)mRNA、总胆红素(TBIL)构建糖尿病黄斑水肿(DME)抗血管内皮生长因子(VEGF)治疗后视力获益的早期预测模型,并进行验证。方法选取2021年10月至2024年3月自贡市第一人民医院收治的480例... 目的基于临床资料、OCTA、血清脑组织水通道蛋白4(AQP4)mRNA、总胆红素(TBIL)构建糖尿病黄斑水肿(DME)抗血管内皮生长因子(VEGF)治疗后视力获益的早期预测模型,并进行验证。方法选取2021年10月至2024年3月自贡市第一人民医院收治的480例(480眼)DME患者,按照21分为建模集(320例)、验证集(160例)。将建模集根据抗VEGF治疗后视力获益情况分为获益组(80例)、未获益组(240例)。收集两组患者基线资料,分析DME患者抗VEGF治疗后视力获益的影响因素,构建早期预测模型,并对该模型进行内部、外部验证。结果组间比较结果显示,未获益组患者糖尿病病程长于获益组,吸烟患者占比、最佳矫正视力(BCVA)最小分辨角对数(logMAR)视力、糖化血红蛋白(HbAlc)、AQP4 mRNA均高于获益组,中心凹视网膜深层毛细血管血流密度(DCP-VD)、黄斑中央厚度(CMT)、TBIL均低于获益组(均为P<0.05)。LASSO-Logistic回归分析显示,DME抗VEGF治疗后视力获益的影响因素为CMT、BCVA(logMAR)、HbAlc、AQP4 mRNA、中心凹DCP-VD、TBIL。基于上述影响因素构建的抗VEGF治疗后视力获益的列线图模型的预测风险一致性指数为0.844。受试者工作特征曲线(ROC)显示,该模型在建模集中预测的曲线下面积(AUC)为0.844(95%CI:0.797~0.891),验证集中预测的AUC为0.898(95%CI:0.847~0.949)。决策分析曲线显示,建模集高风险阈值在0~82%,验证集高风险阈值在0~100%时,该模型可带来临床净收益。结论CMT、BCVA(logMAR)、HbAlc、AQP4 mRNA、中心凹DCP-VD、TBIL是DME抗VEGF治疗后视力获益的影响因素,基于此构建的视力获益预测模型准确性、稳定性较高,可作为临床预测治疗后视力获益的有效工具。 展开更多
关键词 糖尿病 黄斑水肿 LASSO-Logistic回归模型 列线图模型 危险因素 影响因素
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环状RNA0001287(circ_0001287)和miR-21在糖尿病视网膜病变发病过程中的作用机制 被引量：1
2
作者 陈妍鹏 顾婕 +1 位作者 袁沣 温登慧 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2023年第12期946-951,共6页
目的 探讨环状RNA0001287(circ_0001287)和miR-21在糖尿病视网膜病变(DR)发病过程中的作用机制。方法 分离原代人RPE(phRPE)细胞用于circRNA芯片分析。体外培养ARPE-19细胞,并分为空白组、高糖组、阴性组、si-circ组、circ_0001287组、c... 目的 探讨环状RNA0001287(circ_0001287)和miR-21在糖尿病视网膜病变(DR)发病过程中的作用机制。方法 分离原代人RPE(phRPE)细胞用于circRNA芯片分析。体外培养ARPE-19细胞,并分为空白组、高糖组、阴性组、si-circ组、circ_0001287组、circ_0001287+阴性组、circ_0001287+miR-21组。构建抗circ_0001287的小干扰RNA(siRNA)寡核苷酸和含有靶向miR-21序列的模拟物以及miR-21 mimics质粒。阴性组、si-circ组、circ_0001287组、circ_0001287+阴性组、circ_0001287+miR-21组分别采用Lipofectamine2000试剂盒将空质粒、circ_0001287 siRNA、circ_0001287模拟物、circ_0001287模拟物+miRNA无序序列、circ_0001287模拟物+miR-21 mimics质粒转染到ARPE-19细胞。转染6 h后,用新鲜的正常培养基更换Opti-MEM培养基。空白组和高糖组细胞不作转染处理。空白组细胞用含5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖的培养液培养,高糖组细胞逐次用含15.5 mmol·L^(-1)、25.5 mmol·L^(-1)、35.5 mmol·L^(-1)葡萄糖的培养液培养。而其余各组细胞用35.5 mmol·L^(-1)葡萄糖处理48 h。采用RT-PCR检测circ_0001287和miR-21表达情况,CCK-8实验检测细胞增殖活性,双荧光素酶报告基因检测circ_0001287和miR-21的靶向关系,RNA免疫沉淀(RIP)法和生物素偶联探针Pull-down法验证circ_0001287和miR-21的靶向关系,Western blot法检测蛋白表达情况。结果 circRNA芯片筛选发现,hsa_circ_0001287在phRPE细胞中的表达下调。RT-PCR检测结果显示:与空白组相比,高糖组ARPE-19细胞中circ_0001287表达降低(P<0.05),并且具有剂量依赖性,而且随着葡萄糖浓度的增加,ARPE-19细胞中miR-21表达逐渐升高(P<0.05)。将siRNA与circ_0001287模拟物共转染,siRNA也能减少circ_0001287表达,表现为circ_0001287+阴性组circ_0001287相对表达量(0.70±0.03)较阴性组(0.98±0.04)显著降低(P<0.05)。对于转染circ_0001287-WT质粒的细胞,与对照模拟组(0.98±0.03)相比,miR-21模拟组荧光素酶相对酶活性降低(0.59±0.02,P<0.05);然而,对于转染circ_0001287-MUT质粒的细胞,对照模拟组和miR-21模拟组荧光素酶相对酶活性几乎一致(分别为0.96±0.05和1.00±0.04,P>0.05)。在抗Ago RIP实验中,与对照组相比,circ_0001287组中miR-21明显富集,表明miR-21可被生物素化circ_0001287探针显著下拉;Pull-down分析结果显示:与对照IgG相比,circ_0001287特异性探针下拉样品中circ_0001287和miR-21显著富集。在本实验中,circ_0001287+miR-21组细胞增殖率(78.25%±3.01%)低于circ_0001287+阴性组(90.88%±3.51%,P<0.05)。与空白组相比,用35.5 mmol·L^(-1)葡萄糖处理的高糖组ARPE-19细胞PTEN蛋白表达显著下调(P<0.05),而circ_0001287组ARPE-19细胞PTEN蛋白表达较阴性组增加(P<0.05),circ_0001287+miR-21组ARPE-19细胞PTEN蛋白表达量则高于circ_0001287组(P<0.05)。结论 circ_0001287在phRPE细胞和高糖诱导的ARPE-19细胞中表达下调,上调circ_0001287可通过吸附miR-21和激活PTEN表达从而抑制糖尿病性RPE细胞损伤。 展开更多
关键词 环状RNA0001287 MIR-21 PTEN 糖尿病视网膜病变 视网膜色素上皮
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