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载脂蛋白C1高表达通过激活JAK2/STAT3信号通路促进甲状腺乳头状癌细胞的增殖并抑制凋亡
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作者 宾禹 李子雯 +6 位作者 左素微 孙思诺 李敏 宋佳茵 林旭 薛刚 吴靖芳 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第2期359-370,共12页
目的探讨载脂蛋白C1(APOC1)在甲状腺乳头状癌(PTC)组织中的表达及对PTC细胞增殖、凋亡及关键信号通路的影响。方法通过GEPIA 2及K-M数据库分析APOC1在PTC的表达及对预后的影响。采用免疫组织化学、Western blotting检测APOC1在PTC和癌... 目的探讨载脂蛋白C1(APOC1)在甲状腺乳头状癌(PTC)组织中的表达及对PTC细胞增殖、凋亡及关键信号通路的影响。方法通过GEPIA 2及K-M数据库分析APOC1在PTC的表达及对预后的影响。采用免疫组织化学、Western blotting检测APOC1在PTC和癌旁组织中的表达以及3株PTC细胞和正常甲状腺Nthyori 3-1细胞的表达。采用细胞转染技术,构建APOC1敲低和过表达PTC细胞模型(TPC-1细胞和BCPAP细胞);采用Western blotting和RT-qPCR分别在蛋白水平和mRNA水平检验细胞模型构建是否成功。通过生长曲线、集落形成实验检测敲低和过表达APOC1后细胞的生长情况和集落形成能力;通过流式细胞术检测敲低和过表达APOC1对细胞周期、凋亡的影响。采用RT-qPCR和Western blotting检测增殖及凋亡相关靶基因P21,P27,CDK4,CyclinD1,BCL-2,Bax,caspase-3/caspase-9 mRNA和蛋白以及JAK2/STAT3信号通路关键蛋白的变化。结果成功构建APOC1敲低和过表达PTC细胞模型;PTC组织及3个PTC细胞株APOC1表达高于癌旁组织和Nthyori 3-1细胞(P<0.001)。与对照组相比,沉默组细胞增殖能力减弱(P<0.05);G0/G1期的细胞比例增高(P<0.01),S和G2期的细胞比例下降(P<0.05);细胞凋亡率明显增高(P<0.05);CDK4,CyclinD1,BCL-2 mRNA和蛋白表达量下调(P<0.05);p-JAK2,p-STAT3蛋白表达下调(P<0.001);增强组与沉默组结果相反:P21,P27,Bax,caspase-3/caspase-9 mRNA和蛋白表达下调(P<0.05);p-JAK2,p-STAT3蛋白表达上调(P<0.001)。JAK2抑制剂AG490显著减弱过表达APOC1对BCPAP细胞JAK2/STAT3信号通路的激活效应(P<0.01)。结论APOC1可能通过激活JAK2/STAT3信号通路,缩短G0/G1期进程,促进PTC细胞增殖并抑制凋亡。 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌 载脂蛋白C1 增殖 凋亡 JAK2/STAT3信号通路
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LY294002抑制TFF3阳性甲状腺乳头状癌TPC-1细胞恶性生物学行为 被引量:6
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作者 郭梦姚 裴达 +4 位作者 林旭 张文静 王树 吴靖芳 薛刚 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1684-1690,共7页
目的探讨PI3K/AKT通路抑制剂LY294002对肠三叶因子3(intestinal trefoil factor,TFF3)阳性甲状腺乳头状癌细胞TPC-1恶性生物学行为的影响及机制。方法不同浓度LY294002培养的TFF3过表达甲状腺乳头状癌细胞TFF3-TPC-1为实验组;TFF3-TPC-... 目的探讨PI3K/AKT通路抑制剂LY294002对肠三叶因子3(intestinal trefoil factor,TFF3)阳性甲状腺乳头状癌细胞TPC-1恶性生物学行为的影响及机制。方法不同浓度LY294002培养的TFF3过表达甲状腺乳头状癌细胞TFF3-TPC-1为实验组;TFF3-TPC-1细胞株为过表达组;野生型TPC-1细胞株为Control组。倒置显微镜观察各组细胞形态变化;生长曲线检测各组细胞增殖水平;Transwell和划痕实验检测侵袭和迁移能力;流式细胞仪检测细胞凋亡比例;Western blot检测与通路和凋亡相关蛋白的表达。结果形态学显示,实验组细胞间隙随LY294002浓度增加而变大,且圆形透亮细胞增多。LY294002呈浓度依赖性地抑制TFF3-TPC-1细胞的增殖、侵袭和迁移并逐渐诱导细胞凋亡(P<0.05或P<0.01)。Western blot显示通路蛋白和抗凋亡蛋白p-Akt、p-IκB-α、NF-κB-p65、Bcl-2随LY294002浓度增加而被下调,促凋亡蛋白IκB-α、cleaved-caspase-3、cleaved-caspase-9、Bax表达升高(P<0.05或P<0.01)。结论LY294002可有效抑制TFF3阳性TPC-1细胞恶性生物学行为,其机制可能与LY294002通过抑制Akt磷酸化,下调PI3K/AKT通路及下游NF-κB等转录因子活性有关。 展开更多
关键词 LY294002 PI3K/AKT/NF-κB 甲状腺乳头状癌 凋亡 p-IκB-α IΚB-Α cleaved-caspase-3 cleaved-caspase-9
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microRNA-7-5p在甲状腺乳头状癌中的表达及机制 被引量:3
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作者 秦小静 范会利 +3 位作者 林旭 王冬梅 薛刚 吴靖芳 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第5期565-570,共6页
目的探讨microRNA⁃7⁃5p(miR⁃7⁃5p)在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)组织和细胞系的表达以及对PTC细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响及相关分子机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real⁃time PCR,qRT⁃PCR... 目的探讨microRNA⁃7⁃5p(miR⁃7⁃5p)在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)组织和细胞系的表达以及对PTC细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响及相关分子机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real⁃time PCR,qRT⁃PCR)检测52例PTC及癌旁组织和人PTC细胞系TPC⁃1、BCPAP、K1及人正常甲状腺滤泡细胞系Nthy⁃ori 3⁃1中miR⁃7⁃5p的表达情况。分别将miR⁃7⁃5p mimics/inhibi⁃tor、mimics⁃NC/NC⁃inhibitor(NC⁃in)以脂质体Lipofectamin^(TM) 3000转染至TPC⁃1和K1细胞分为3组:(1)空白对照组(TPC⁃1/K1组);(2)阴性对照组(mimics⁃NC组/NC⁃in组);(3)实验组(mimics⁃7⁃5p组/inhibitor⁃7⁃5p组)。以生长曲线、小室侵袭实验和划痕实验检测3组细胞增殖、侵袭和迁移能力。双荧光素酶报告基因实验检测miR⁃7⁃5p与三叶因子3(TFF3)3′UTR区结合情况,Western blot检测miR⁃7⁃5p对TFF3蛋白表达的影响。结果PTC组织和3株PTC细胞系中miR⁃7⁃5p表达水平明显低于癌旁组织和Nthy⁃ori 3⁃1正常滤泡上皮细胞(P<0.01),且不同临床分期、肿瘤大小和淋巴结转移的PTC患者miR⁃7⁃5p表达差异有统计学意义(P<0.01)。上调miR⁃7⁃5p后,实验组TPC⁃1细胞的增殖活性、侵袭和迁移能力明显下降(P<0.05)。双荧光素酶报告实验结果表明mimics⁃7⁃5p/inhibitor⁃7⁃5p组的荧光酶活性低于/高于对照组(P<0.01)。结论miR⁃7⁃5p在PTC组织中低表达,miR⁃7⁃5p可以通过靶向TFF3抑制PTC细胞的增殖、侵袭及迁移能力。 展开更多
关键词 miR⁃7⁃5p 甲状腺乳头状癌 三叶因子3
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E2F转录因子7在甲状腺乳头状癌中的表达及生物学作用 被引量:2
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作者 范会利 赵如华 +3 位作者 张赫 林旭 薛刚 吴靖芳 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第17期2138-2144,共7页
目的探讨E2F转录因子7(E2F7)在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)中的作用及分子机制。方法生物信息学分析E2F7与PTC的关系;免疫组织化学方法检测PTC及癌旁组织E2F7的表达;Western blot(WB)检测人甲状腺癌细胞系K1、TPC-... 目的探讨E2F转录因子7(E2F7)在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)中的作用及分子机制。方法生物信息学分析E2F7与PTC的关系;免疫组织化学方法检测PTC及癌旁组织E2F7的表达;Western blot(WB)检测人甲状腺癌细胞系K1、TPC-1和BCPAP细胞以及正常人甲状腺Nthyori 3-1细胞系E2F7表达水平;以生长曲线、克隆形成实验和划痕实验检测沉默E2F7对K1细胞增殖和迁移能力的影响;流式细胞术检测沉默E2F7对K1细胞周期和凋亡的影响;qRT-PCR检测其对周期蛋白cyclin D1、cyclin E1、EIF4A3及周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)基因转录的影响,以WB检测E2F7对周期蛋白和通路蛋白Akt、pAkt的影响。结果E2F7在PTC组织中表达水平较癌旁组织高表达,其中临床分期及淋巴结转移与E2F7表达水平有统计学意义(P<0.05);K1细胞E2F7的表达明显高于正常甲状腺细胞;E2F7沉默组K1细胞蛋白表达水平相比对照组明显降低(P<0.01);增殖、迁移能力较对照组受到抑制(P<0.05);E2F7沉默组周期蛋白转录和翻译水平较对照组降低;通路关键蛋白Akt和pAkt表达水平较对照组下调;E2F7沉默组细胞周期较对照组细胞周期进展出现阻滞,凋亡率升高。结论E2F7高表达与PTC发生、发展有关;E2F7基因可能通过Akt信号通路促进K1细胞增殖、抑制凋亡。 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌 E2F转录因子7 细胞周期 细胞凋亡 AKT信号通路
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