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甜菜夜蛾羧酸酯酶基因cDNA的克隆、表达及序列分析被引量：7: 1; 作者张霞郭巍 +1 位作者李国勋宋水山《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期681-688,共8页; 羧酸酯酶是昆虫体内重要的解毒酶系之一,与昆虫抗药性产生相关。利用粉纹夜蛾Trichoplusia ni(Hübner)肠粘蛋白多克隆抗体免疫筛选甜菜夜蛾Spodoptera exigua(Hübner)中肠cDNA表达文库,得到编码羧酸酯酶的全长cDNA克隆。该cDN... 展开更多; 关键词甜菜夜蛾 CDNA表达文库羧酸酯酶表达 spot-blot鉴定; 在线阅读下载PDF 职称材料

美国白蛾几丁质脱乙酰酶1(HcCDA1)的克隆表达与酶活测定被引量：5: 2; 作者闫晓平赵丹 +3 位作者孙晓彤郭巍李少雅李景《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2015年第3期423-427,共5页; 利用RACE-PCR方法,扩增得到编码美国白蛾Hyphantria cunea Drury几丁质脱乙酰酶基因Hc CDA1。将该基因分别在大肠杆菌BL21和毕赤酵母细胞Pichia pastoris GS115表达。经诱导表达后,Western blot分析表明Hc CDA1在大肠杆菌中成功表达61.8... 展开更多; 关键词美国白蛾几丁质脱乙酰酶表达几丁质脱乙酰酶活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

花生蛴螬中肠组织cDNA文库的构建被引量：2: 3; 作者刘小民张霞 +1 位作者李杰郭巍《花生学报》 2010年第1期15-19,共5页; 利用Qiagen试剂盒提取花生害虫华北大黑鳃金龟幼虫蛴螬中肠总RNA,并纯化mRNA,然后按照Stratagene试剂盒合成双链cDNA,经过凝胶柱层析,收集符合要求的cDNA片段,加工后与Uni-ZAP XR Vector连接,经Gigapack Ⅲ Gold体外包装,即获得蛴螬的c... 展开更多; 关键词花生蛴螬中肠组织 CDNA文库; 在线阅读下载PDF 职称材料

苏云金杆菌vip1A/vip2A基因的鉴定及其与cry1基因的联系: 4; 作者申建茹郭巍 +1 位作者张霞李晶《华北农学报》 CSCD 北大核心 2008年第5期131-135,共5页; 利用PCR方法检测vip1A/vip2A基因在野生型Bt菌株中的分布,进行基因片段的克隆和序列分析。结合cry1基因的PCR-RFLP基因型鉴定体系,分析与vip1A/vip2A基因有联系的cry1类基因。结果表明,分离保存的171株野生型Bt菌株中,有20株菌株含有vip... 展开更多; 关键词二元毒素 vip1A/vip2A vip1A/vip2A-16 PCR-RFLP cry1Fa; 在线阅读下载PDF 职称材料

一种从多克隆抗体库快速分离高特异性抗体的方法: 5; 作者张霞李杰 +1 位作者郭巍李国勋《华北农学报》 CSCD 北大核心 2008年第5期111-113,共3页; 为克服传统方法制备单克隆抗体复杂而费时的弊病,研究介绍了一种从多克隆抗体库中快速分离高特异性抗体的方法;根据抗原抗体特异性结合的原理,以大肠杆菌系统表达的甜菜夜蛾围食膜蛋白SeP89为抗原,从多克隆抗体库中分离其特异性抗体;成... 展开更多; 关键词抗体 CDNA克隆围食膜蛋白抗血清 WESTERN BLOT; 在线阅读下载PDF 职称材料

苏云金芽孢杆菌营养期杀虫蛋白Vips研究进展: 6; 作者申建茹郭巍《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期1-5,共5页; 苏云金芽孢杆菌Bt营养期杀虫蛋白Vips主要分为Vip1、Vip2和Vip33种。Vip1和Vip2构成二元毒素,对叶甲科昆虫具有特异杀虫活性。Vip3对鳞翅目昆虫具有广谱杀虫活性,该蛋白广泛存在于Bt中,与已知杀虫晶体蛋白ICPs没有序列相似性。Vip3通过... 展开更多; 关键词营养期杀虫蛋白二元毒素 Vip3A 蛋白特性作用机制; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名甜菜夜蛾羧酸酯酶基因cDNA的克隆、表达及序列分析被引量：7: 1; 作者张霞郭巍李国勋宋水山; 机构河北农业大学生命科学学院/河北省农作物病虫害生物防治工程技术中心河北省生物研究所; 出处《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期681-688,共8页; 基金国家重点基础研究发展规划(“973”计划)项目(2003CB114201) 河北省自然科学基金项目(C2007000542); 文摘羧酸酯酶是昆虫体内重要的解毒酶系之一,与昆虫抗药性产生相关。利用粉纹夜蛾Trichoplusia ni(Hübner)肠粘蛋白多克隆抗体免疫筛选甜菜夜蛾Spodoptera exigua(Hübner)中肠cDNA表达文库,得到编码羧酸酯酶的全长cDNA克隆。该cDNA克隆全长1812bp(GenBank登录号EF580101),开放阅读框长1605bp,编码535个氨基酸。该蛋白活性中心包括3个氨基酸残基(催化三联体):Ser186,Glu319和His443,3个N-联糖基化位点,具备羧酸酯酶的结构特征,属羧酸酯酶家族(EC:3.1.1.-)。将该基因与pQE30载体重组,经IPTG诱导,spot-blot鉴定,蛋白获得了表达;以α-醋酸萘酯为底物,检测表达的羧酸酯酶活性为1.3nmol/100μL酶液。; 关键词甜菜夜蛾 CDNA表达文库羧酸酯酶表达 spot-blot鉴定; Keywords Spodoptera exigua cDNA expression library carboxylesterase expression spot-blot analysis; 分类号 Q965.9 [生物学—昆虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名美国白蛾几丁质脱乙酰酶1(HcCDA1)的克隆表达与酶活测定被引量：5: 2; 作者闫晓平赵丹孙晓彤郭巍李少雅李景; 机构河北农业大学生命科学学院/河北省农作物病虫害生物防治工程技术中心北京农学院植物科学技术学院; 出处《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2015年第3期423-427,共5页; 基金国家自然科学基金(31471775) 现代农业产业技术体系(CARS-14) 北京农学院促进人才培养综合改革专项计划(BNRC&CC201404); 文摘利用RACE-PCR方法,扩增得到编码美国白蛾Hyphantria cunea Drury几丁质脱乙酰酶基因Hc CDA1。将该基因分别在大肠杆菌BL21和毕赤酵母细胞Pichia pastoris GS115表达。经诱导表达后,Western blot分析表明Hc CDA1在大肠杆菌中成功表达61.8 k D的蛋白,符合预期大小;在毕赤酵母GS115中成功表达80 k D蛋白。酶活性试验显示酵母细胞中表达的重组蛋白酶活力为1.685 U/m L。本研究利用毕赤酵母成功表达具有酶活力的重组Hc CDA1蛋白,为进一步明确该蛋白的生理功能提供条件。; 关键词美国白蛾几丁质脱乙酰酶表达几丁质脱乙酰酶活性; Keywords Hyphantria cunea chitin deacetylase expression chitin deacetylase activity; 分类号 S433.4 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名花生蛴螬中肠组织cDNA文库的构建被引量：2: 3; 作者刘小民张霞李杰郭巍; 机构河北农业大学植物保护学院河北省科学院生物研究所河北农业大学生命科学学院; 出处《花生学报》 2010年第1期15-19,共5页; 基金现代农业产业技术体系建设专项资金资助; 文摘利用Qiagen试剂盒提取花生害虫华北大黑鳃金龟幼虫蛴螬中肠总RNA,并纯化mRNA,然后按照Stratagene试剂盒合成双链cDNA,经过凝胶柱层析,收集符合要求的cDNA片段,加工后与Uni-ZAP XR Vector连接,经Gigapack Ⅲ Gold体外包装,即获得蛴螬的cDNA文库,未扩增文库滴度1.95×106pfu/mL,重组率为99.7%,扩增后文库滴度达1.34×109pfu/mL,插入cDNA片段的长度平均为1.34kb,表明成功构建了高质量的蛴螬中肠cDNA文库。; 关键词花生蛴螬中肠组织 CDNA文库; Keywords peanut Holotrichia oblita midgut cDNA library; 分类号 S565.2 [农业科学—作物学] S433 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名苏云金杆菌vip1A/vip2A基因的鉴定及其与cry1基因的联系: 4; 作者申建茹郭巍张霞李晶; 机构河北农业大学生命科学学院; 出处《华北农学报》 CSCD 北大核心 2008年第5期131-135,共5页; 基金国家重点基础研究发展计划(“973”计划)(2003CB114201) 河北省自然科学基金项目(C2007000542); 文摘利用PCR方法检测vip1A/vip2A基因在野生型Bt菌株中的分布,进行基因片段的克隆和序列分析。结合cry1基因的PCR-RFLP基因型鉴定体系,分析与vip1A/vip2A基因有联系的cry1类基因。结果表明,分离保存的171株野生型Bt菌株中,有20株菌株含有vip1A/vip2A基因,分布率为11.69%。成功克隆了菌株Bt16的vip1A/vip2A基因片段,命名为vip1A/vip2A-16,GenBank登录号为EU594327。cry1基因的PCR-RFLP鉴定结果表明,该20株菌株均含有cry1Fa基因,说明vip1A/vip2A基因与cry1Fa可能具有某种联系。; 关键词二元毒素 vip1A/vip2A vip1A/vip2A-16 PCR-RFLP cry1Fa; Keywords Binary toxin vip1A/vip2A vip1A/vip2A- 16 PCR-RFLP cry1Fa; 分类号 S476.1 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名一种从多克隆抗体库快速分离高特异性抗体的方法: 5; 作者张霞李杰郭巍李国勋; 机构河北农业大学生命科学学院河北省生物研究所青岛农业大学; 出处《华北农学报》 CSCD 北大核心 2008年第5期111-113,共3页; 基金国家重点基础研究发展计划(“973”计划)(2003CB114201) 河北省自然科学基金项目(C2007000542); 文摘为克服传统方法制备单克隆抗体复杂而费时的弊病,研究介绍了一种从多克隆抗体库中快速分离高特异性抗体的方法;根据抗原抗体特异性结合的原理,以大肠杆菌系统表达的甜菜夜蛾围食膜蛋白SeP89为抗原,从多克隆抗体库中分离其特异性抗体;成功从甜菜夜蛾围食膜蛋白抗血清库中分离SeP89蛋白的特异性抗体;以快速分离围食膜蛋白SeP89抗体为例,研究建立了一种快速从多克隆抗体库中分离特异性抗体的方法。; 关键词抗体 CDNA克隆围食膜蛋白抗血清 WESTERN BLOT; Keywords Antibody cDNA clone PM protein Antiserum Western blot; 分类号 Q511 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名苏云金芽孢杆菌营养期杀虫蛋白Vips研究进展: 6; 作者申建茹郭巍; 机构河北农业大学生命科学学院河北省农作物病虫害生物防治工程技术中心; 出处《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期1-5,共5页; 基金河北省自然科学基金(C2007000542) 河北农业大学9816项目; 文摘苏云金芽孢杆菌Bt营养期杀虫蛋白Vips主要分为Vip1、Vip2和Vip33种。Vip1和Vip2构成二元毒素,对叶甲科昆虫具有特异杀虫活性。Vip3对鳞翅目昆虫具有广谱杀虫活性,该蛋白广泛存在于Bt中,与已知杀虫晶体蛋白ICPs没有序列相似性。Vip3通过诱发细胞凋亡,最终导致昆虫死亡,这与Btδ-内毒素的作用机理完全不同,Vips的发现对于Bt的进一步开发利用具有重要意义。本文主要对营养期杀虫蛋白Vips的分布、特性、作用机制及应用等进行报道。; 关键词营养期杀虫蛋白二元毒素 Vip3A 蛋白特性作用机制; Keywords vegetative insecticidal protein binary toxin Vip3A characteristics of Vips mechanism; 分类号 S476.11 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	甜菜夜蛾羧酸酯酶基因cDNA的克隆、表达及序列分析	张霞郭巍李国勋宋水山	《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心	2008	7	在线阅读下载PDF 职称材料
2	美国白蛾几丁质脱乙酰酶1(HcCDA1)的克隆表达与酶活测定	闫晓平赵丹孙晓彤郭巍李少雅李景	《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心	2015	5	在线阅读下载PDF 职称材料
3	花生蛴螬中肠组织cDNA文库的构建	刘小民张霞李杰郭巍	《花生学报》	2010	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	苏云金杆菌vip1A/vip2A基因的鉴定及其与cry1基因的联系	申建茹郭巍张霞李晶	《华北农学报》 CSCD 北大核心	2008	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	一种从多克隆抗体库快速分离高特异性抗体的方法	张霞李杰郭巍李国勋	《华北农学报》 CSCD 北大核心	2008	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	苏云金芽孢杆菌营养期杀虫蛋白Vips研究进展	申建茹郭巍	《植物保护》 CAS CSCD 北大核心	2008	0	在线阅读下载PDF 职称材料