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密码子优化提高PRRSV GP5/M双基因在真核细胞中的同步表达被引量：3: 1; 作者张永红徐建 +5 位作者张建楼霍珊珊王利月林洪羽李秀锦仲飞《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期92-97,115,共7页; 为提高猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)GP5和M蛋白基因在动物细胞中同步表达水平,本试验依据动物偏爱的密码子对GP5和M蛋白基因分别进行了密码子优化,并利用本室构建的含内部核蛋白体进入位点(IRES)载体pcDNA-IRES,将密码子优化的和... 展开更多; 关键词密码子优化 PRRSV GP5蛋白 M蛋白表达水平; 在线阅读下载PDF 职称材料

丹参酮ⅡA抑制LPS诱导人单核细胞促炎性分子的表达被引量：2: 2; 作者王利月温洁霞 +5 位作者林洪羽李文艳张建楼张永红李秀锦仲飞《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期85-90,共6页; 为探讨丹参酮ⅡA(Tanshinone IIA,Tan IIA)抗动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)的影响,用脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)体外刺激人外周血单个核细胞(PBMCs)及人单核细胞系(THP-1),通过ELISA和RT-PCR方法分别检测细胞的促炎性细胞因子(... 展开更多; 关键词丹参酮ⅡA 人单核细胞系单核/巨噬细胞促炎性细胞分子; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪CD163 cDNA扩增及其稳定表达细胞系(CHO-K1)的建立被引量：1: 3; 作者徐建霍珊珊 +4 位作者张建楼张永红崔丹仲飞李秀锦《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期88-92,122,共6页; 猪CD163是猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的重要受体之一。为探讨此受体在病毒感染过程中与PRRSV的相互作用,需要建立稳定表达猪全长CD163基因的细胞系。首先通过RT-PCR方法从猪肺泡巨噬细胞中扩增猪全长CD163cDNA,然后通过KpnI和XhoI... 展开更多; 关键词猪CD163 稳定表达细胞系 CHO-K1细胞流式细胞术; 在线阅读下载PDF 职称材料

PRRSV对猪树突细胞可溶性CD83释放影响的分析: 4; 作者李秀锦霍珊珊 +5 位作者张永红张建楼徐建林洪羽王利月仲飞《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期86-91,共6页; 为研究猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)感染是否促进猪树突细胞可溶性CD83(sCD83)的释放,在体外用PRRSV感染猪树突细胞,通过ELISA检测了树突细胞培养基sCD83的含量,结果显示PRRSV可明显提高猪树突细胞培养基sCD83的含量,表明PRRSV促... 展开更多; 关键词可溶性CD83 PRRSV 免疫抑制; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名密码子优化提高PRRSV GP5/M双基因在真核细胞中的同步表达被引量：3: 1; 作者张永红徐建张建楼霍珊珊王利月林洪羽李秀锦仲飞; 机构河北农业大学动物医学院基础兽医系/河北兽医生物技术工程技术研究中心中国农科院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室燕山大学环境与化学工程学院生物工程系; 出处《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期92-97,115,共7页; 基金河北省自然科学基金(C2013204130) 河北省教育厅重点科学研究项目(ZD20131056) 家畜疫病病原生物学国家重点实验室课题(SKLVEB2013KFKT022); 文摘为提高猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)GP5和M蛋白基因在动物细胞中同步表达水平,本试验依据动物偏爱的密码子对GP5和M蛋白基因分别进行了密码子优化,并利用本室构建的含内部核蛋白体进入位点(IRES)载体pcDNA-IRES,将密码子优化的和野生型的GP5基因和M蛋白基因分别插入到IRES的上下游,分别构建成GP5与His-标签融合和M蛋白与Myc-标签融合的密码子优化的和野生型的GP5/M双基因表达载体pcDNA-OpGP5/His-IRES-OpM/MH和pcDNA-GP5/His-IRES-M/MH,将双基因表达载体转染HEK293T细胞使其表达,通过Western blot检测,比较GP5和M蛋白在真核细胞的表达水平。结果显示,密码子优化可明显提高GP5和M在HEK293T细胞中的表达水平,本试验为GP5和M蛋白功能的研究提供了有利条件。; 关键词密码子优化 PRRSV GP5蛋白 M蛋白表达水平; Keywords codon optimization PRRSV GP5protein M protein expression level; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名丹参酮ⅡA抑制LPS诱导人单核细胞促炎性分子的表达被引量：2: 2; 作者王利月温洁霞林洪羽李文艳张建楼张永红李秀锦仲飞; 机构河北农业大学动物医学院基础兽医系/河北兽医生物技术工程技术研究中心燕山大学环境与化学工程学院生物工程系; 出处《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期85-90,共6页; 基金河北省自然科学基金(C2013204130) 河北省教育厅重点科学研究项目(ZD20131056); 文摘为探讨丹参酮ⅡA(Tanshinone IIA,Tan IIA)抗动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)的影响,用脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)体外刺激人外周血单个核细胞(PBMCs)及人单核细胞系(THP-1),通过ELISA和RT-PCR方法分别检测细胞的促炎性细胞因子(IL-1β、TNFα、IL-6)和粘附分子VCAM-1的表达;同时用丹参酮IIA预先处理上述2种细胞,分析丹参酮IIA对LPS诱导细胞因子及粘附分子表达的影响。结果表明,LPS可明显诱导PBMCs和THP-1细胞IL-1β前体、TNFα、IL-6和VCAM-1的表达,而丹参酮ⅡA可明显抑制LPS诱导上述细胞因子及粘附分子表达,表明丹参酮ⅡA能够明显的抑制单核/巨噬细胞介导的炎性应答反应,为探索丹参酮ⅡA抗AS的机制提供了重要的试验依据。; 关键词丹参酮ⅡA 人单核细胞系单核/巨噬细胞促炎性细胞分子; Keywords PBMCs tanshinone IIA THP-Ⅱ monocyte/macrophages proinflammatory molecule; 分类号 R34 [医药卫生—基础医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪CD163 cDNA扩增及其稳定表达细胞系(CHO-K1)的建立被引量：1: 3; 作者徐建霍珊珊张建楼张永红崔丹仲飞李秀锦; 机构燕山大学环境与化学工程学院生物工程系中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室河北农业大学动物医学院基础兽医系/河北兽医生物技术工程技术研究中心; 出处《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期88-92,122,共6页; 基金河北省自然科学基金(C2013204130) 家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放课题(SKLVEB2013KFKT022) 河北省高等学校科学技术研究项目(ZD20131056); 文摘猪CD163是猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的重要受体之一。为探讨此受体在病毒感染过程中与PRRSV的相互作用,需要建立稳定表达猪全长CD163基因的细胞系。首先通过RT-PCR方法从猪肺泡巨噬细胞中扩增猪全长CD163cDNA,然后通过KpnI和XhoI将其插入到pcDNA3.1A质粒中,构建成真核表达载体。将表达载体转染CHO-K1细胞,通过G418加压,筛选出在细胞膜上稳定表达猪CD163的细胞系。结果显示,扩增出的猪CD163基因与基因库的序列基本一致,个别碱基的突变没有引起编码氨基酸的改变。通过转染表达载体和G418筛选,成功构建了稳定表达猪全长CD163基因的CHO-K1细胞系。经流式细胞仪检测证实,重组猪CD163可在CHO-K1细胞膜上进行表达,这为进一步研究PRRSV与CD163受体相互作用提供了必要条件。; 关键词猪CD163 稳定表达细胞系 CHO-K1细胞流式细胞术; Keywords porcine CD163 stable expression cell line CHO-K1 cells flow cytometry; 分类号 S828 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名PRRSV对猪树突细胞可溶性CD83释放影响的分析: 4; 作者李秀锦霍珊珊张永红张建楼徐建林洪羽王利月仲飞; 机构燕山大学环境与化学工程学院生物工程系河北农业大学动物医学院基础兽医系/河北兽医生物技术工程技术研究中心; 出处《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期86-91,共6页; 基金河北省自然科学基金(C2013204130) 河北省教育厅重点科学研究项目(ZD20131056); 文摘为研究猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)感染是否促进猪树突细胞可溶性CD83(sCD83)的释放,在体外用PRRSV感染猪树突细胞,通过ELISA检测了树突细胞培养基sCD83的含量,结果显示PRRSV可明显提高猪树突细胞培养基sCD83的含量,表明PRRSV促进树突细胞sCD83的释放。为研究PRRSV对猪树突细胞CD83表达的影响,用RT-PCR和流式细胞术分别检测了细胞CD83mRNA的水平和细胞膜CD83的含量。结果显示PRRSV可提高猪树突细胞CD83 mRNA的水平,然而对细胞膜CD83的含量影响不大,说明PRRSV促进sCD83释放的作用高于刺激CD83表达的作用,致使膜结合的CD83保持较低的水平。PRRSV诱导树突细胞sCD83的释放为探讨PRRSV感染引起免疫抑制提供了重要的线索。; 关键词可溶性CD83 PRRSV 免疫抑制; Keywords soluble CD83 PRRSV immunosuppression; 分类号 S814.8 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	密码子优化提高PRRSV GP5/M双基因在真核细胞中的同步表达	张永红徐建张建楼霍珊珊王利月林洪羽李秀锦仲飞	《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2015	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	丹参酮ⅡA抑制LPS诱导人单核细胞促炎性分子的表达	王利月温洁霞林洪羽李文艳张建楼张永红李秀锦仲飞	《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2014	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	猪CD163 cDNA扩增及其稳定表达细胞系(CHO-K1)的建立	徐建霍珊珊张建楼张永红崔丹仲飞李秀锦	《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2016	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	PRRSV对猪树突细胞可溶性CD83释放影响的分析	李秀锦霍珊珊张永红张建楼徐建林洪羽王利月仲飞	《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2015	0	在线阅读下载PDF 职称材料