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鸭新城疫病毒河北分离株融合蛋白基因的分子特性分析被引量：3: 1; 作者翟文栋陈立功 +4 位作者董兵李玉荣段晓军任玉红董世山《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期94-99,共6页; 为研究鸭新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）河北分离株HB／1／05／Dk的遗传变异特性，本试验通过RT—PCR方法扩增其融合蛋白（F）基因片段的5’端的451bp核苷酸，将其推导的氨基酸序列与GenBank已发表的31株NDV参考毒株进行... 展开更多; 关键词新城疫病毒鸭 F基因序列分析基因型; 在线阅读下载PDF 职称材料

蛋黄卵磷脂提取方法的研究被引量：10: 2; 作者刘颖肖静静 +4 位作者李硕绵陈立功王丽叶王迎春董世山《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期105-108,共4页; 本试验比较了乙醇提取、先乙醇后丙酮提取和先丙酮后乙醇提取3种蛋黄卵磷脂提取方法,以期获得一种最优的提取方法。同时,在各提取方法中分别采用不同乙醇体积分数观察其对蛋黄卵磷脂提取效果的影响。试验采用钼黄比色法测定卵磷脂的含量... 展开更多; 关键词蛋黄卵磷脂薄层色谱提取; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组猪IL-7在真核细胞的分泌表达及生物活性分析被引量：1: 3; 作者温洁霞林洪羽 +5 位作者王利月李文艳张考陈慧慧仲飞李秀锦《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期98-101,106,共5页; 为了解猪IL-7(pIL-7)在防治猪免疫抑制性传染病及疫苗生物佐剂中的作用,通过RT-PCR方法从猪脾脏中扩增出含有自身信号肽序列的pIL-7 cDNA基因,将其克隆到pcDNA3.1A表达载体上,构建出羧基端与Myc/His融合的pIL-7基因真核表达载体pcDNA3.1... 展开更多; 关键词重组猪白细胞介素-7 真核表达生物活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

仔猪肠黏膜上皮细胞体外培养及其对小檗碱适应性的研究被引量：2: 4; 作者李妹玲乔宁 +4 位作者陈立功徐环叶徐倩倩王迎春董世山《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期99-102,共4页; 为了体外分离培养和鉴定仔猪肠粘膜上皮细胞,探讨小檗碱对体外培养的仔猪肠粘膜上皮细胞的安全剂量。本试验取刚出生未吃初乳的仔猪小肠的回肠段,用胰蛋白酶和胶原酶Ⅳ进行消化处理,获得原代仔猪肠粘膜上皮细胞,用免疫组化法对培养的仔... 展开更多; 关键词仔猪肠粘膜上皮细胞培养鉴定小檗碱; 在线阅读下载PDF 职称材料

白头翁素对腹泻小鼠肠黏膜修复因子PCNA和TGFα表达的影响被引量：2: 5; 作者徐倩倩陈立功 +5 位作者刘颖肖静静王迎春李硕绵王建军董世山《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期99-102,共4页; 本试验利用猪轮状病毒和大肠杆菌混合感染建立腹泻模型,通过免疫组织化学方法研究白头翁素对腹泻小鼠肠黏膜修复因子蛋白表达的影响,揭示白头翁素防治腹泻的黏膜修复机制。结果显示:小鼠腹泻96h内,自愈组、治疗组和预防组黏膜修复因子P... 展开更多; 关键词白头翁素小鼠腹泻黏膜修复细胞增殖核抗原转化生长因子Α; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪瘟高免卵黄抗体ELISA检测方法的建立被引量：1: 6; 作者肖静静李硕绵 +3 位作者李妹玲陈立功王迎春董世山《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期90-93,112,共5页; 本试验采用猪瘟活疫苗病毒包被酶标板，提取的卵黄抗体作为一抗，建立针对猪瘟病毒卵黄抗体的间接ELISA检测方法。用方阵滴定法确定各反应液的工作浓度及作用时间，并对检测方法的特异性、敏感性及重复性进行了评估。结果显示，抗原最... 展开更多; 关键词猪瘟卵黄抗体间接ELISA; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组单增李斯特菌溶血素O在HEK293T细胞中的分泌表达及活性分析被引量：2: 7; 作者常玉梅李文艳 +4 位作者张永红张建楼温洁霞王利月仲飞《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期53-57,共5页; 为研究单增李斯特菌分泌的溶血素O(LLO)的免疫佐剂作用,需要构建其真核表达载体,使其在动物体内进行分泌表达,从而发挥其生物佐剂活性。为此,本试验通过PCR方法从LM基因组DNA中扩增了LLO基因,并将其插入到带有CD5信号肽的质粒pcDNA3.1AC... 展开更多; 关键词单增李斯特菌溶血素O 真核表达溶血活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鸭新城疫病毒河北分离株融合蛋白基因的分子特性分析被引量：3: 1; 作者翟文栋陈立功董兵李玉荣段晓军任玉红董世山; 机构保定职业技术学院畜牧兽医系河北农业大学动物医学院/河北省兽用生物制品工程技术研究中心河北农业大学科技管理处河北省永清县畜牧兽医局; 出处《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期94-99,共6页; 基金河北省自然科学基金项目(C2011204030); 文摘为研究鸭新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）河北分离株HB／1／05／Dk的遗传变异特性，本试验通过RT—PCR方法扩增其融合蛋白（F）基因片段的5’端的451bp核苷酸，将其推导的氨基酸序列与GenBank已发表的31株NDV参考毒株进行比对分析，并根据F基因（47～420nt）对其进行基因分型。结果表明：鸭NDVHB／1／05／Dk分离株与参考毒株间的核苷酸和氨基酸的同源性分别为61．8％～98．4％和62．9％～97．6％，与鸡源NDVXJ-2／97株同源性最高；HB／1／05／Dk株F蛋白裂解位点氨基酸序列为^112R—R—Q-K—R—F^117，为强毒NDV的特征；该分离株属于基因VIId亚型。表明鸭NDV分离株可能来源于感染NDV的鸡群。; 关键词新城疫病毒鸭 F基因序列分析基因型; Keywords newcastle disease virus duck F gene sequence analysis genotype; 分类号 S852.3 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名蛋黄卵磷脂提取方法的研究被引量：10: 2; 作者刘颖肖静静李硕绵陈立功王丽叶王迎春董世山; 机构河北农业大学动物医学院/河北省兽用生物制品工程技术研究中心; 出处《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期105-108,共4页; 基金河北省科技支撑计划项目(07220401D-01); 文摘本试验比较了乙醇提取、先乙醇后丙酮提取和先丙酮后乙醇提取3种蛋黄卵磷脂提取方法,以期获得一种最优的提取方法。同时,在各提取方法中分别采用不同乙醇体积分数观察其对蛋黄卵磷脂提取效果的影响。试验采用钼黄比色法测定卵磷脂的含量;通过薄层色谱法(TLC)定性检测蛋黄卵磷脂。结果表明:先利用95%的乙醇处理蛋黄,然后用丙酮脱油为最优蛋黄卵磷脂提取方法,卵磷脂的提取率、纯度和含量都较高,分别为8.6%,80.3%,6.9%。提取得到的蛋黄卵磷脂薄层色谱图和卵磷脂标准品的薄层色基本谱图一致。; 关键词蛋黄卵磷脂薄层色谱提取; Keywords egg yolk lecithin TLC extraction; 分类号 S132 [农业科学—农业基础科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组猪IL-7在真核细胞的分泌表达及生物活性分析被引量：1: 3; 作者温洁霞林洪羽王利月李文艳张考陈慧慧仲飞李秀锦; 机构河北农业大学动物医学院/河北省兽用生物制品工程技术研究中心燕山大学环境与化学工程学院; 出处《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期98-101,106,共5页; 基金国家自然科学基金(31140093) 河北省自然科学基金(C2013204130); 文摘为了解猪IL-7(pIL-7)在防治猪免疫抑制性传染病及疫苗生物佐剂中的作用,通过RT-PCR方法从猪脾脏中扩增出含有自身信号肽序列的pIL-7 cDNA基因,将其克隆到pcDNA3.1A表达载体上,构建出羧基端与Myc/His融合的pIL-7基因真核表达载体pcDNA3.1A-pIL-7/MH。由磷酸钙介导将pcDNA3.1A-pIL-7/MH质粒转染人类胚胎肾细胞293T(HEK293T)使其进行瞬时表达,以Western-blot检测构建的pIL-7基因表达载体是否可介导重组pIL-7在真核细胞中进行分泌型表达。然后利用Ni-NTA琼脂糖亲和层析纯化表达的重组pIL-7,并通过淋巴细胞增殖试验检测其的生物活性。结果表明,扩增的pIL-7基因序列与GenBank序列完全一致;构建的表达载体可介导重组pIL-7在真核细胞HEK293T中进行分泌型表达。表达的重组pIL-7对猪脾淋巴细胞有明显的促增殖效应。由此可见,利用真核细胞表达的重组pIL-7具有生物活性。; 关键词重组猪白细胞介素-7 真核表达生物活性; Keywords recombinant porcine interleukin-7 eukaryotic expression biological activity; 分类号 S814.8 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名仔猪肠黏膜上皮细胞体外培养及其对小檗碱适应性的研究被引量：2: 4; 作者李妹玲乔宁陈立功徐环叶徐倩倩王迎春董世山; 机构河北农业大学动物医学院/河北省兽用生物制品工程技术研究中心; 出处《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期99-102,共4页; 基金国家自然基金项目(31470125); 文摘为了体外分离培养和鉴定仔猪肠粘膜上皮细胞,探讨小檗碱对体外培养的仔猪肠粘膜上皮细胞的安全剂量。本试验取刚出生未吃初乳的仔猪小肠的回肠段,用胰蛋白酶和胶原酶Ⅳ进行消化处理,获得原代仔猪肠粘膜上皮细胞,用免疫组化法对培养的仔猪肠粘膜细胞进行鉴定,用MTT检测法测定硫酸小檗碱对仔猪肠粘膜上皮细胞的安全浓度。结果表明:免疫组化法分离培养的细胞膜呈棕黄色,为粘膜上皮细胞。硫酸小檗碱对体外培养的仔猪肠粘膜上皮细胞的安全浓度为20μmol/L。; 关键词仔猪肠粘膜上皮细胞培养鉴定小檗碱; Keywords piglet intestinal epithelial cell cell culture cell identification berberine; 分类号 S816 [农业科学—饲料科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名白头翁素对腹泻小鼠肠黏膜修复因子PCNA和TGFα表达的影响被引量：2: 5; 作者徐倩倩陈立功刘颖肖静静王迎春李硕绵王建军董世山; 机构河北农业大学动物医学院/河北省兽用生物制品工程技术研究中心河北省保定市动物产品质量检验监测中心; 出处《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期99-102,共4页; 基金河北省科技支撑计划项目:高通量筛选抗病毒中兽药活性成分样品库建立及禽类重大传染病的防控(07220401D-01); 文摘本试验利用猪轮状病毒和大肠杆菌混合感染建立腹泻模型,通过免疫组织化学方法研究白头翁素对腹泻小鼠肠黏膜修复因子蛋白表达的影响,揭示白头翁素防治腹泻的黏膜修复机制。结果显示:小鼠腹泻96h内,自愈组、治疗组和预防组黏膜修复因子PCNA和TGFα的蛋白表达量均有所升高,其中预防组显著高于空白对照组(P<0.05),腹泻96h后,表达量逐渐下降直至正常。结果表明,白头翁素防治小鼠轮状病毒和大肠杆菌混合感染性腹泻的显著效果可能与其调节黏膜修复因子PCNA和TGFα的表达有关,从而促进了肠黏膜的修复。; 关键词白头翁素小鼠腹泻黏膜修复细胞增殖核抗原转化生长因子Α; Keywords anemonin mice diarrhoeal mucosa repair PCNA TGFa; 分类号 S851 [农业科学—预防兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪瘟高免卵黄抗体ELISA检测方法的建立被引量：1: 6; 作者肖静静李硕绵李妹玲陈立功王迎春董世山; 机构河北农业大学动物医学院/河北省兽用生物制品工程技术研究中心; 出处《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期90-93,112,共5页; 文摘本试验采用猪瘟活疫苗病毒包被酶标板，提取的卵黄抗体作为一抗，建立针对猪瘟病毒卵黄抗体的间接ELISA检测方法。用方阵滴定法确定各反应液的工作浓度及作用时间，并对检测方法的特异性、敏感性及重复性进行了评估。结果显示，抗原最佳包被浓度为1：1000，酶标二抗工作浓度为1：6000，临界值为0．131～0．145。建立的ELISA方法较IHA敏感性高，用IHA检测效价为2^7的抗体，稀释2^14倍后，用ELISA方法检测仍为阳性，且其特异性及重复性较好。; 关键词猪瘟卵黄抗体间接ELISA; Keywords swine fever yolk antibody indirect ELISA; 分类号 S852.3 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组单增李斯特菌溶血素O在HEK293T细胞中的分泌表达及活性分析被引量：2: 7; 作者常玉梅李文艳张永红张建楼温洁霞王利月仲飞; 机构中国人民解放军保定第河北大学基础医学院河北农业大学动物医学院/河北省兽用生物制品工程技术研究中心; 出处《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期53-57,共5页; 基金河北省自然科学基金(C2013204130) 河北大学医学学科专项资金建设项目(2015A2002); 文摘为研究单增李斯特菌分泌的溶血素O(LLO)的免疫佐剂作用,需要构建其真核表达载体,使其在动物体内进行分泌表达,从而发挥其生物佐剂活性。为此,本试验通过PCR方法从LM基因组DNA中扩增了LLO基因,并将其插入到带有CD5信号肽的质粒pcDNA3.1ACD5sp的信号肽下游构建成真核表达载体,然后转染人胚肾细胞HEK293T细胞使其分泌表达,用Ni-NTA琼脂糖凝胶层析法从培养基中分离纯化重组LLO蛋白,通过Western-blot对其进行鉴定,并用溶血试验鉴定其生物活性。结果表明,扩增的LLO基因序列与GenBank中的基因序列完全一致,在HEK293T细胞中表达的重组LLO在CD5信号肽介导下能被分泌到细胞外,并具有较强的溶血活性,这为进一步研究LLO的功能提供了必要的条件。; 关键词单增李斯特菌溶血素O 真核表达溶血活性; Keywords Listeria monocytogenes listeriolysin O eukaryotic expression haemoletic activity; 分类号 S855.1 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	鸭新城疫病毒河北分离株融合蛋白基因的分子特性分析	翟文栋陈立功董兵李玉荣段晓军任玉红董世山	《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2013	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	蛋黄卵磷脂提取方法的研究	刘颖肖静静李硕绵陈立功王丽叶王迎春董世山	《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2013	10	在线阅读下载PDF 职称材料
3	重组猪IL-7在真核细胞的分泌表达及生物活性分析	温洁霞林洪羽王利月李文艳张考陈慧慧仲飞李秀锦	《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2013	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	仔猪肠黏膜上皮细胞体外培养及其对小檗碱适应性的研究	李妹玲乔宁陈立功徐环叶徐倩倩王迎春董世山	《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2016	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	白头翁素对腹泻小鼠肠黏膜修复因子PCNA和TGFα表达的影响	徐倩倩陈立功刘颖肖静静王迎春李硕绵王建军董世山	《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2013	2	在线阅读下载PDF 职称材料
6	猪瘟高免卵黄抗体ELISA检测方法的建立	肖静静李硕绵李妹玲陈立功王迎春董世山	《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2013	1	在线阅读下载PDF 职称材料
7	重组单增李斯特菌溶血素O在HEK293T细胞中的分泌表达及活性分析	常玉梅李文艳张永红张建楼温洁霞王利月仲飞	《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2015	2	在线阅读下载PDF 职称材料