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活血解毒化瘀方通过MR/NLRP3通路抑制UUO 6个月大鼠对侧肾脏血管平滑肌细胞焦亡的机制研究
被引量：
1
1
作者
羡云倩
韩雨彤
+3 位作者
强盼盼
郝娟
杨帆
许庆友
《世界科学技术-中医药现代化》
CSCD
北大核心
2023年第10期3336-3346,共11页
目的观察活血解毒化瘀方对单侧输尿管梗阻(Unilateral ureteral obstruction,UUO)6个月大鼠模型对侧肾脏血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cell,VSMC)焦亡的干预作用,探讨活血解毒化瘀方对慢性肾脏病(Chronic kidney disease,CKD...
目的观察活血解毒化瘀方对单侧输尿管梗阻(Unilateral ureteral obstruction,UUO)6个月大鼠模型对侧肾脏血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cell,VSMC)焦亡的干预作用,探讨活血解毒化瘀方对慢性肾脏病(Chronic kidney disease,CKD)的部分治疗机制。方法40只雄性Wistar大鼠随机分为假手术(Sham)组、单侧输尿管梗阻(UUO)组、依普利酮治疗(EPL)组和活血解毒化瘀方干预(HJHR)组(n=10)。术后EPL组给予依普利酮,HJHR组给予中药。6个月后摘取右侧肾脏。通过HE染色和Masson染色评估对侧肾脏病理改变。免疫组化检测含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(Cysteinyl aspartate specific proteinase1,Caspase-1)、白细胞介素1β(Interleukin-1β,IL-1β),核因子κappa-B,p65(Nuclear Factorκappa-B,NF-κB,p65)和血清和糖皮质激素诱导的激酶1(Serum and glucocorticoid-induced kinase 1,SGK1)的表达。通过TUNEL染色观察肾脏血管平滑肌细胞的DNA损伤情况。体外实验将大鼠血管平滑肌细胞随机分为4组:空白对照(CON)组、醛固酮刺激(ALD)组、醛固酮加依普利酮治疗(EPL)组和醛固酮加活血解毒化瘀方干预(HJHR)组。ALD组给予醛固酮刺激24 h,EPL组和HJHR组在醛固酮刺激前分别给予依普利酮和10%大鼠含中药血清预处理。通过流式细胞术检测细胞凋亡率。通过免疫荧光观察细胞膜中GSDMD蛋白(Gasdermin D,GSDMD)的穿孔和核受体亚家族3C组成员2(Nuclear Receptor subfamily 3 group C member 2,NR3C2)、编码盐皮质激素受体(Mineralocorticoid receptor,MR)的核转位。通过蛋白免疫印迹法检测炎症和细胞焦亡相关信号分子的蛋白质表达。通过实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测细胞焦亡信号通路相关分子的信使RNA(Messenger RNA,mRNA)表达。结果与Sham组比较,UUO组肾脏血管及血管平滑肌细胞的DNA损伤加重,Caspase-1、IL-1β、SGK1、NF-κB的表达增高;与UUO组比较,EPL组和HJHR组肾脏血管及血管平滑肌细胞的DNA损伤有所减轻,Caspase-1、IL-1β、SGK1和NF-κB的表达降低。与CON组比较,ALD组出现大鼠血管平滑肌细胞焦亡及细胞DNA损伤,NR3C2、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(Nod-like receptor protein 3,NLRP3)、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、SGK1、NF-κB的表达上调;与ALD组比较,EPL组和HJHR组细胞焦亡及细胞DNA损伤减轻,NR3C2、NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、SGK1、NF-κB的表达降低。结论活血解毒化瘀方通过抑制MR/NLRP3通路的激活,抑制血管平滑肌细胞焦亡,从而减轻UUO对侧肾脏血管损伤。
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关键词
活血解毒化瘀方
细胞焦亡
单侧输尿管梗阻
血管平滑肌细胞
依普利酮
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职称材料
益气活血解毒方抑制UUO大鼠肺脏淋巴管生成及淋巴管内皮细胞表型转化
2
作者
刘子骞
杨帆
+4 位作者
高晓萌
刘令今
陈格格
郝娟
许庆友
《世界科学技术-中医药现代化》
CSCD
北大核心
2023年第4期1350-1357,共8页
目的研究益气活血解毒方抑制梗阻性肾病大鼠肺脏淋巴管生成及淋巴管内皮细胞表型转化的作用。方法选用雄性Wistar大鼠80只,随机分为假手术组(Sham)、单侧输尿管结扎组(UUO)、依普利酮治疗组(EPL)和中药治疗组(TCM),每组20只。采用结扎...
目的研究益气活血解毒方抑制梗阻性肾病大鼠肺脏淋巴管生成及淋巴管内皮细胞表型转化的作用。方法选用雄性Wistar大鼠80只,随机分为假手术组(Sham)、单侧输尿管结扎组(UUO)、依普利酮治疗组(EPL)和中药治疗组(TCM),每组20只。采用结扎左侧输尿管复制梗阻性肾病大鼠模型。术后给予含药饲料(依普利酮100 mg·kg^(-1)·d^(-1)、益气活血解毒方免煎颗粒1.92 g·kg^(-1)·d^(-1))。180天后摘取大鼠肺脏。HE及天狼星红染色观察肺组织病理,Western blot、免疫组化及免疫荧光染色法检测淋巴管内皮透明质酸受体-1(LYVE-1)、血管内皮生长因子受体3(VEGFR3)、血管内皮生成因子-C(VEGF-C)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)、I型胶原蛋白(Collagen I)、白细胞介素-1β(IL-1β)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核因子κB(NF-κB)、血清糖皮质激素诱导蛋白激酶-1(SGK-1)以及盐皮质激素受体(MR)等指标表达情况。结果UUO大鼠肺脏呈现明显的纤维化改变,胶原沉积明显增多,伴有淋巴管增多及大量炎性细胞浸润,α-SMA、Vimentin、LYVE-1、VEGFR3、VEGF-C、IL-1β、MCP-1、TNF-α、NF-κB、p-SGK-1、MR及CollagenⅠ表达增强(P<0.05)。益气活血解毒方治疗后纤维化程度、淋巴管生成及炎症损伤等均明显减轻。结论益气活血解毒方可通过调控MR/NF-κB/VEGF-C通路,抑制肺淋巴管生成及淋巴管内皮细胞表型转化,减轻梗阻性肾病诱导的肺脏纤维化。
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关键词
梗阻性肾病
淋巴管生成
肺纤维化
益气活血解毒方
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职称材料
题名
活血解毒化瘀方通过MR/NLRP3通路抑制UUO 6个月大鼠对侧肾脏血管平滑肌细胞焦亡的机制研究
被引量：
1
1
作者
羡云倩
韩雨彤
强盼盼
郝娟
杨帆
许庆友
机构
河北
中医药大学
研究
生学院
河北
省
中西医
结合
肝肾病证
研究
重点实验室
河北
中医药大学
内科教研室
河北中医药大学中西医结合研究所
出处
《世界科学技术-中医药现代化》
CSCD
北大核心
2023年第10期3336-3346,共11页
基金
国家自然科学基金委员会面上项目(82174317):醛固酮刺激MR活化诱导UUO大鼠对侧肾脏淋巴管生成及益气解毒化瘀中药的保护作用,负责人:许庆友
文摘
目的观察活血解毒化瘀方对单侧输尿管梗阻(Unilateral ureteral obstruction,UUO)6个月大鼠模型对侧肾脏血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cell,VSMC)焦亡的干预作用,探讨活血解毒化瘀方对慢性肾脏病(Chronic kidney disease,CKD)的部分治疗机制。方法40只雄性Wistar大鼠随机分为假手术(Sham)组、单侧输尿管梗阻(UUO)组、依普利酮治疗(EPL)组和活血解毒化瘀方干预(HJHR)组(n=10)。术后EPL组给予依普利酮,HJHR组给予中药。6个月后摘取右侧肾脏。通过HE染色和Masson染色评估对侧肾脏病理改变。免疫组化检测含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(Cysteinyl aspartate specific proteinase1,Caspase-1)、白细胞介素1β(Interleukin-1β,IL-1β),核因子κappa-B,p65(Nuclear Factorκappa-B,NF-κB,p65)和血清和糖皮质激素诱导的激酶1(Serum and glucocorticoid-induced kinase 1,SGK1)的表达。通过TUNEL染色观察肾脏血管平滑肌细胞的DNA损伤情况。体外实验将大鼠血管平滑肌细胞随机分为4组:空白对照(CON)组、醛固酮刺激(ALD)组、醛固酮加依普利酮治疗(EPL)组和醛固酮加活血解毒化瘀方干预(HJHR)组。ALD组给予醛固酮刺激24 h,EPL组和HJHR组在醛固酮刺激前分别给予依普利酮和10%大鼠含中药血清预处理。通过流式细胞术检测细胞凋亡率。通过免疫荧光观察细胞膜中GSDMD蛋白(Gasdermin D,GSDMD)的穿孔和核受体亚家族3C组成员2(Nuclear Receptor subfamily 3 group C member 2,NR3C2)、编码盐皮质激素受体(Mineralocorticoid receptor,MR)的核转位。通过蛋白免疫印迹法检测炎症和细胞焦亡相关信号分子的蛋白质表达。通过实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测细胞焦亡信号通路相关分子的信使RNA(Messenger RNA,mRNA)表达。结果与Sham组比较,UUO组肾脏血管及血管平滑肌细胞的DNA损伤加重,Caspase-1、IL-1β、SGK1、NF-κB的表达增高;与UUO组比较,EPL组和HJHR组肾脏血管及血管平滑肌细胞的DNA损伤有所减轻,Caspase-1、IL-1β、SGK1和NF-κB的表达降低。与CON组比较,ALD组出现大鼠血管平滑肌细胞焦亡及细胞DNA损伤,NR3C2、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(Nod-like receptor protein 3,NLRP3)、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、SGK1、NF-κB的表达上调;与ALD组比较,EPL组和HJHR组细胞焦亡及细胞DNA损伤减轻,NR3C2、NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、SGK1、NF-κB的表达降低。结论活血解毒化瘀方通过抑制MR/NLRP3通路的激活,抑制血管平滑肌细胞焦亡,从而减轻UUO对侧肾脏血管损伤。
关键词
活血解毒化瘀方
细胞焦亡
单侧输尿管梗阻
血管平滑肌细胞
依普利酮
Keywords
Huoxue Jiedu Huayu Recipe
Pyroptosis
Unilateral ureteral obstruction
Vascular smooth muscle cell
Eplerenone
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
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职称材料
题名
益气活血解毒方抑制UUO大鼠肺脏淋巴管生成及淋巴管内皮细胞表型转化
2
作者
刘子骞
杨帆
高晓萌
刘令今
陈格格
郝娟
许庆友
机构
河北
中医药大学
河北中医药大学中西医结合研究所
河北
省
中西医
结合
肝肾病症
研究
重点实验室
出处
《世界科学技术-中医药现代化》
CSCD
北大核心
2023年第4期1350-1357,共8页
基金
国家自然科学基金委员会面上项目(82174317):醛固酮刺激MR活化诱导UUO大鼠对侧肾脏淋巴管生成及益气解毒化瘀中药的保护作用,负责人:许庆友
河北省教育厅河北省高等学校科学技术研究项目青年基金项目(QN2020116):NLRP3炎症小体在UUO诱导肺脏损伤中的作用机制及中药保护作用,负责人:杨帆
河北中医学院优秀青年教师基础研究计划项目(YQ2020007):基于“整体观念”探讨UUO诱导巨噬细胞表型转化在肺脏损伤中的作用及中药干预,负责人:杨帆
文摘
目的研究益气活血解毒方抑制梗阻性肾病大鼠肺脏淋巴管生成及淋巴管内皮细胞表型转化的作用。方法选用雄性Wistar大鼠80只,随机分为假手术组(Sham)、单侧输尿管结扎组(UUO)、依普利酮治疗组(EPL)和中药治疗组(TCM),每组20只。采用结扎左侧输尿管复制梗阻性肾病大鼠模型。术后给予含药饲料(依普利酮100 mg·kg^(-1)·d^(-1)、益气活血解毒方免煎颗粒1.92 g·kg^(-1)·d^(-1))。180天后摘取大鼠肺脏。HE及天狼星红染色观察肺组织病理,Western blot、免疫组化及免疫荧光染色法检测淋巴管内皮透明质酸受体-1(LYVE-1)、血管内皮生长因子受体3(VEGFR3)、血管内皮生成因子-C(VEGF-C)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)、I型胶原蛋白(Collagen I)、白细胞介素-1β(IL-1β)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核因子κB(NF-κB)、血清糖皮质激素诱导蛋白激酶-1(SGK-1)以及盐皮质激素受体(MR)等指标表达情况。结果UUO大鼠肺脏呈现明显的纤维化改变,胶原沉积明显增多,伴有淋巴管增多及大量炎性细胞浸润,α-SMA、Vimentin、LYVE-1、VEGFR3、VEGF-C、IL-1β、MCP-1、TNF-α、NF-κB、p-SGK-1、MR及CollagenⅠ表达增强(P<0.05)。益气活血解毒方治疗后纤维化程度、淋巴管生成及炎症损伤等均明显减轻。结论益气活血解毒方可通过调控MR/NF-κB/VEGF-C通路,抑制肺淋巴管生成及淋巴管内皮细胞表型转化,减轻梗阻性肾病诱导的肺脏纤维化。
关键词
梗阻性肾病
淋巴管生成
肺纤维化
益气活血解毒方
Keywords
Obstructive nephropathy
Lymphangiogenesis
Pulmonary fibrosis
Yiqi Huoxue Jiedu decoction
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
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1
活血解毒化瘀方通过MR/NLRP3通路抑制UUO 6个月大鼠对侧肾脏血管平滑肌细胞焦亡的机制研究
羡云倩
韩雨彤
强盼盼
郝娟
杨帆
许庆友
《世界科学技术-中医药现代化》
CSCD
北大核心
2023
1
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2
益气活血解毒方抑制UUO大鼠肺脏淋巴管生成及淋巴管内皮细胞表型转化
刘子骞
杨帆
高晓萌
刘令今
陈格格
郝娟
许庆友
《世界科学技术-中医药现代化》
CSCD
北大核心
2023
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