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人丙氨酸氨基转移酶(ALT2)的表达、单克隆抗体制备及鉴定
被引量：
1
1
作者
葛翠
鲜阳凌
+4 位作者
廖红梅
鲍勇刚
叶祥忠
李益民
夏焕章
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第12期1232-1234,1237,共4页
目的:克隆、表达、纯化重组人丙氨酸氨基转移酶(ALT2),以此作为抗原免疫动物获得针对ALT2的单克隆抗体(mAb)株,用于ALT的免疫诊断。方法:通过RT-PCR从肝癌细胞中扩增丙氨酸氨基转移酶(ALT2)基因,并将其克隆至pET-28a表达载体中,带有组...
目的:克隆、表达、纯化重组人丙氨酸氨基转移酶(ALT2),以此作为抗原免疫动物获得针对ALT2的单克隆抗体(mAb)株,用于ALT的免疫诊断。方法:通过RT-PCR从肝癌细胞中扩增丙氨酸氨基转移酶(ALT2)基因,并将其克隆至pET-28a表达载体中,带有组氨酸标签的ALT2蛋白经镍亲和层析纯化,纯化的ALT2作为抗原免疫小鼠制备mAb,通过Western blot和ELISA方法测定mAb的亲和力和特异性。结果:利用大肠杆菌成功表达ALT2蛋白,以镍亲和层析纯化获得ALT活性超过10 000 U/L的ALT2目的蛋白,以此蛋白免疫小鼠后得到5株mAb。结论:经过初步筛选获得2株高特异性的mAb,为研制ALT2蛋白定量检测试剂提供了重要工具。
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关键词
丙氨酸氨基转移酶
表达
单克隆抗体
ELISA
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职称材料
题名
人丙氨酸氨基转移酶(ALT2)的表达、单克隆抗体制备及鉴定
被引量：
1
1
作者
葛翠
鲜阳凌
廖红梅
鲍勇刚
叶祥忠
李益民
夏焕章
机构
沈阳药科大学生命科学与生物制药学院生物制药教研室
北京万泰
生物
药业股份有限公司
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第12期1232-1234,1237,共4页
基金
国家科技支撑计划课题资助(2007BAI07A22)
文摘
目的:克隆、表达、纯化重组人丙氨酸氨基转移酶(ALT2),以此作为抗原免疫动物获得针对ALT2的单克隆抗体(mAb)株,用于ALT的免疫诊断。方法:通过RT-PCR从肝癌细胞中扩增丙氨酸氨基转移酶(ALT2)基因,并将其克隆至pET-28a表达载体中,带有组氨酸标签的ALT2蛋白经镍亲和层析纯化,纯化的ALT2作为抗原免疫小鼠制备mAb,通过Western blot和ELISA方法测定mAb的亲和力和特异性。结果:利用大肠杆菌成功表达ALT2蛋白,以镍亲和层析纯化获得ALT活性超过10 000 U/L的ALT2目的蛋白,以此蛋白免疫小鼠后得到5株mAb。结论:经过初步筛选获得2株高特异性的mAb,为研制ALT2蛋白定量检测试剂提供了重要工具。
关键词
丙氨酸氨基转移酶
表达
单克隆抗体
ELISA
Keywords
alanine aminotransferase
expression
mAb
ELISA
分类号
Q291 [生物学—细胞生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人丙氨酸氨基转移酶(ALT2)的表达、单克隆抗体制备及鉴定
葛翠
鲜阳凌
廖红梅
鲍勇刚
叶祥忠
李益民
夏焕章
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010
1
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