目的:基于转录组测序技术,分析预测蛹虫草(XG)水提物影响人胃癌细胞BGC-823生长活性的主要调节性细胞死亡(Regulated Cell Death,RCD)信号通路。方法:MTT法测定XG水提物对胃癌细胞增殖能力的影响,转录组测序分析显著差异基因及其京都基...目的:基于转录组测序技术,分析预测蛹虫草(XG)水提物影响人胃癌细胞BGC-823生长活性的主要调节性细胞死亡(Regulated Cell Death,RCD)信号通路。方法:MTT法测定XG水提物对胃癌细胞增殖能力的影响,转录组测序分析显著差异基因及其京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集情况,获得凋亡、自噬、坏死性凋亡及铁死亡信号通路的hub基因(10个)。通过激光共聚焦、流式细胞术、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)进一步验证XG水提物对胃癌细胞凋亡的诱导情况。结果:XG水提物对人胃癌细胞BGC-823生长活性的抑制作用具有剂量依赖特征。转录组测序共筛选到5885个差异表达基因,并在凋亡(P=0.001)及自噬(P=0.008)信号通路存在显著性富集,除铁死亡外,其它信号通路的hub基因的表达量均被显著性抑制,包括caspase依赖性凋亡信号通路的关键因子CASP3、CASP9、CASP7和APAF1,自噬小体形成相关的基因ULK1、ULK2、UVRAG、Atg14及Atg5。细胞学检测结果显示,胃癌细胞经XG水提物处理后呈典型的凋亡形态学特征,早期凋亡率为24.8%,细胞周期阻滞于G2/M期。qRT-PCR检测显示,BCL2、BCL2L1、CASP3、CASP9及XIAP的表达受到显著抑制(P<0.01),ENDOG和AIF表达量显著上调(P<0.01),与转录组测序结果一致。结论:蛹虫草主要通过caspase非依赖性线粒体凋亡途径抑制人胃癌细胞BGC-823的生长活性,同时可以影响自噬等信号通路的激活,为蛹虫草在功能性食品的开发提供理论支持。展开更多
侧生器官边界域(lateral organ boundaries domain,LBD)基因广泛存在于高等植物中,可以参与调控植物生长发育及逆境响应。通过对甜瓜LBD转录因子的鉴定分析,旨在揭示其在果实发育进程中的调控作用。通过生物信息学分析明确LBD转录因子...侧生器官边界域(lateral organ boundaries domain,LBD)基因广泛存在于高等植物中,可以参与调控植物生长发育及逆境响应。通过对甜瓜LBD转录因子的鉴定分析,旨在揭示其在果实发育进程中的调控作用。通过生物信息学分析明确LBD转录因子在基因组中的成员,分别命名为CmLBD1-CmLBD32;采用多序列比对分析甜瓜LBD结构域的结构特征;运用邻接法、极大似然法进行系统进化树分析;以薄皮甜瓜发育各个阶段的果实(花后5-40 d,每间隔5 d取一次样)为试验材料提取RNA,并通过实时荧光定量技术检测LBD成员的基因表达水平。在甜瓜基因组上共鉴定出32个甜瓜LBD家族成员,分为7大类,分布于12条染色体上;多序列比对分析表明,32个LBD基因均具有典型的LOB结构域。在果实发育进程中,LBD家族基因在不同时期均有表达,其中CmLBD2和CmLBD28随着果实发育进程表达水平逐渐升高,其余家族成员在果实中表达水平相对较低。亚细胞定位表明,CmLBD2蛋白定位于细胞膜上。CmLBD2基因表达量与果实硬度间相关性分析表明,CmLBD2在果实成熟进程中基因表达量与硬度的变化显著负相关;利用外源1-MCP进行果实处理发现,1-MCP可以抑制CmLBD2基因表达,表明CmLBD2基因表达可能受到乙烯的调控。综上,甜瓜LBD基因在果实发育进程中可能发挥不同的作用,其中CmLBD2可能参与乙烯调控相关的果实后熟软化。展开更多
为改善挤压大米淀粉的功能特性,以米粉为主要原料,探究了不同槲皮素(quercetin,Q)添加量(0~10%)在挤压场下对米粉中淀粉的水溶性、吸水性、糊化特性等功能特性的影响。在此基础上,借助扫描电子显微镜(scanning electron microscopy)、X...为改善挤压大米淀粉的功能特性,以米粉为主要原料,探究了不同槲皮素(quercetin,Q)添加量(0~10%)在挤压场下对米粉中淀粉的水溶性、吸水性、糊化特性等功能特性的影响。在此基础上,借助扫描电子显微镜(scanning electron microscopy)、X-射线衍射、红外光谱、及紫外可见光分光光度计揭示了Q在挤压场下对淀粉结构的演变规律。试验结果表明:当Q添加量为4%时,样品的吸水指数、碘结合能力均达到了最大值,且自由水弛豫时间提前;挤压体系中Q与淀粉通过氢键结合,颗粒结构变得更加立体、紧凑。与挤压米粉相比,槲皮素的添加延缓了淀粉的回生且提高了淀粉的热稳定性。根据以上结果可知,挤压体系中Q与大米淀粉复合,促进了淀粉分子链重排,进而改变淀粉的结构及功能特性,该研究可为开发抗回生的挤压大米淀粉基产品提供理论依据。展开更多
文摘目的:基于转录组测序技术,分析预测蛹虫草(XG)水提物影响人胃癌细胞BGC-823生长活性的主要调节性细胞死亡(Regulated Cell Death,RCD)信号通路。方法:MTT法测定XG水提物对胃癌细胞增殖能力的影响,转录组测序分析显著差异基因及其京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集情况,获得凋亡、自噬、坏死性凋亡及铁死亡信号通路的hub基因(10个)。通过激光共聚焦、流式细胞术、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)进一步验证XG水提物对胃癌细胞凋亡的诱导情况。结果:XG水提物对人胃癌细胞BGC-823生长活性的抑制作用具有剂量依赖特征。转录组测序共筛选到5885个差异表达基因,并在凋亡(P=0.001)及自噬(P=0.008)信号通路存在显著性富集,除铁死亡外,其它信号通路的hub基因的表达量均被显著性抑制,包括caspase依赖性凋亡信号通路的关键因子CASP3、CASP9、CASP7和APAF1,自噬小体形成相关的基因ULK1、ULK2、UVRAG、Atg14及Atg5。细胞学检测结果显示,胃癌细胞经XG水提物处理后呈典型的凋亡形态学特征,早期凋亡率为24.8%,细胞周期阻滞于G2/M期。qRT-PCR检测显示,BCL2、BCL2L1、CASP3、CASP9及XIAP的表达受到显著抑制(P<0.01),ENDOG和AIF表达量显著上调(P<0.01),与转录组测序结果一致。结论:蛹虫草主要通过caspase非依赖性线粒体凋亡途径抑制人胃癌细胞BGC-823的生长活性,同时可以影响自噬等信号通路的激活,为蛹虫草在功能性食品的开发提供理论支持。
文摘为改善挤压大米淀粉的功能特性,以米粉为主要原料,探究了不同槲皮素(quercetin,Q)添加量(0~10%)在挤压场下对米粉中淀粉的水溶性、吸水性、糊化特性等功能特性的影响。在此基础上,借助扫描电子显微镜(scanning electron microscopy)、X-射线衍射、红外光谱、及紫外可见光分光光度计揭示了Q在挤压场下对淀粉结构的演变规律。试验结果表明:当Q添加量为4%时,样品的吸水指数、碘结合能力均达到了最大值,且自由水弛豫时间提前;挤压体系中Q与淀粉通过氢键结合,颗粒结构变得更加立体、紧凑。与挤压米粉相比,槲皮素的添加延缓了淀粉的回生且提高了淀粉的热稳定性。根据以上结果可知,挤压体系中Q与大米淀粉复合,促进了淀粉分子链重排,进而改变淀粉的结构及功能特性,该研究可为开发抗回生的挤压大米淀粉基产品提供理论依据。