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汉坦病毒核蛋白基因疫苗的初步研究被引量：3: 1; 作者郑兰艳刘详宁 +3 位作者张晓棠石焱牟玲罗恩杰《微生物学杂志》 CAS CSCD 2005年第2期13-17,共5页; 探讨了汉坦病毒核蛋白(NP)S基因疫苗的免疫效果。构建重组真核表达质粒pcDNA3.1+S,直接肌注免疫BALB/c小鼠,分别用ELISA法检测血清特异性抗体的变化,MTT法检测T细胞增殖反应,以及用ELISAkit检测免疫鼠脾细胞上清液中细胞因子IL-4和IFN-... 展开更多; 关键词汉坦病毒核酸疫苗核蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

噬菌体抗体库技术的研究进展及应用被引量：1: 2; 作者王凯刘洪艳牟玲《微生物学杂志》 CAS CSCD 2011年第6期80-83,共4页; 噬菌体抗体库技术是继噬菌体展示技术发展而来的一项基因抗体工程新技术。它可将含不同物种全部抗体可变区基因的基因库转化成展示在噬菌体表面的蛋白库,不仅使单克隆抗体的生产更方便、快速、高效地在体外进行,还开辟了单克隆抗体人源... 展开更多; 关键词噬菌体展示抗体库; 在线阅读下载PDF 职称材料

人源抗汉坦病毒核衣壳蛋白T7噬菌体抗体库的构建被引量：5: 3; 作者刘兵王美莲 +4 位作者王斯史俊岩郑兰艳牟玲罗恩杰《微生物学杂志》 CAS CSCD 2007年第2期16-20,共5页; 构建人源T7噬菌体单链抗体(scFv)库筛选抗汉坦病毒核衣壳蛋白(NP)抗体。从肾综合征出血热恢复期患者外周血淋巴细胞中提取总RNA,反转录合成cDNA第一条链,PCR分别扩增抗体重链可变区基因(VH)和轻链可变区基因(VL),经重叠延伸拼接(SOE)PC... 展开更多; 关键词汉坦病毒 SCFV t7噬菌体抗体库; 在线阅读下载PDF 职称材料

人免疫球蛋白重链可变区基因引物设计方法的改良被引量：4: 4; 作者姜晶孙颖 +2 位作者刘红艳牟玲罗恩杰《微生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第2期60-63,共4页; 针对抗体胚系基因数据库的数据不断更新和完善,为获得人全部免疫球蛋白(Ig)重链可变区基因,改进引物设计方法,自主设计针对可变区基因高度保守的框架区1(FR1)和框架区4(FR4)的引物,提取未经免疫的健康人外周血单个核细胞,通过RT-PCR扩... 展开更多; 关键词重链可变区引物设计序列分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

共刺激分子B7-1与汉坦病毒核蛋白基因共表达载体的构建及免疫调节作用被引量：1: 5; 作者郑兰艳杨涛 +3 位作者于笑难滕秀丽牟玲罗恩杰《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期205-207,共3页; 目的:探讨共刺激分子B71(CD80)对汉坦病毒核蛋白基因疫苗的免疫调节作用。方法:构建双启动子共表达B71基因和汉坦病毒核蛋白基因的真核表达载体pcDNA3.1B7S,酶切鉴定后直接肌注免疫BALB/c小鼠,同时设对照组pcDNA3.1+空质粒接种组、pcDNA... 展开更多; 关键词汉坦病毒共刺激分子B7-1 基因疫苗; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗汉坦病毒NP scFv基因表达及生物活性分析: 6; 作者刘兵史俊岩 +5 位作者王舰王美莲王斯郑兰艳牟玲罗恩杰《微生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第2期29-32,共4页; 诱导已构建的重组质粒pGEX-6P-1-scFv原核表达抗汉坦病毒核衣壳蛋白单链抗体,并用酶免疫实验检测单链抗体生物活性。用IPTG诱导重组原核表达质粒pGEX-6P-1-scFv表达抗汉坦病毒NP单链抗体融合蛋白,经亲和层析纯化,并应用SDS-PAGE电泳检... 展开更多; 关键词汉坦病毒 SCFV 表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

引入CpG基序的汉滩病毒G2糖蛋白基因的克隆及表达被引量：3: 7; 作者聂清王斯 +3 位作者郑兰艳史俊岩牟玲罗恩杰《微生物学杂志》 CAS CSCD 2006年第2期34-36,共3页; 构建汉滩病毒G2糖蛋白的真核表达载体,并加入可增强小鼠免疫刺激作用的CpG基序,检测其可否在真核细胞中表达。参照Genebank中汉滩病毒M的全基因序列设计引物,引物两端引入可增强小鼠免疫刺激作用的CpG基序及双酶切位点,通过聚合酶链反应... 展开更多; 关键词汉滩病毒包膜糖蛋白真核细胞 CPG基序; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名汉坦病毒核蛋白基因疫苗的初步研究被引量：3: 1; 作者郑兰艳刘详宁张晓棠石焱牟玲罗恩杰; 机构中国医科大学病原生物教研室沈阳市传染病院肾综合征出血热研究所; 出处《微生物学杂志》 CAS CSCD 2005年第2期13-17,共5页; 基金辽宁省教育厅2002年高等学校科学研究项目资助(202013130) 沈阳市科委课题(沈科发2001 38号); 文摘探讨了汉坦病毒核蛋白(NP)S基因疫苗的免疫效果。构建重组真核表达质粒pcDNA3.1+S,直接肌注免疫BALB/c小鼠,分别用ELISA法检测血清特异性抗体的变化,MTT法检测T细胞增殖反应,以及用ELISAkit检测免疫鼠脾细胞上清液中细胞因子IL-4和IFN-γ的动态变化,从而了解免疫鼠的体液免疫反应和细胞免疫反应。pcDNA3.1+S接种组的小鼠血清抗体水平、T细胞增殖反应以及细胞因子IL-4和IFN-γ的产生水平均较对照组pcDNA3.1+空载体接种组的要高。编码核蛋白的S基因的核酸免疫可同时启动机体的细胞免疫和体液免疫反应,S基因是汉坦病毒核酸疫苗的一个比较理想的侯选抗原基因。; 关键词汉坦病毒核酸疫苗核蛋白; Keywords hantavirus DNA vaccine nucleoprotein; 分类号 R373.3 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名噬菌体抗体库技术的研究进展及应用被引量：1: 2; 作者王凯刘洪艳牟玲; 机构沈阳市传染病院肾综合征出血热研究所; 出处《微生物学杂志》 CAS CSCD 2011年第6期80-83,共4页; 基金沈阳市科技基金(1071186-9-00); 文摘噬菌体抗体库技术是继噬菌体展示技术发展而来的一项基因抗体工程新技术。它可将含不同物种全部抗体可变区基因的基因库转化成展示在噬菌体表面的蛋白库,不仅使单克隆抗体的生产更方便、快速、高效地在体外进行,还开辟了单克隆抗体人源化的新途径,促进了人类单克隆抗体生产的发展。就近年来噬菌体抗体库技术的基因来源、发展关键及抗体应用的研究作一综述。; 关键词噬菌体展示抗体库; Keywords Phage display antibody library; 分类号 Q939.48 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人源抗汉坦病毒核衣壳蛋白T7噬菌体抗体库的构建被引量：5: 3; 作者刘兵王美莲王斯史俊岩郑兰艳牟玲罗恩杰; 机构中国医科大学基础医学院病原生物教研室沈阳市传染病院肾综合征出血热研究所; 出处《微生物学杂志》 CAS CSCD 2007年第2期16-20,共5页; 基金辽宁省自然科学基金资助(20062101); 文摘构建人源T7噬菌体单链抗体(scFv)库筛选抗汉坦病毒核衣壳蛋白(NP)抗体。从肾综合征出血热恢复期患者外周血淋巴细胞中提取总RNA,反转录合成cDNA第一条链,PCR分别扩增抗体重链可变区基因(VH)和轻链可变区基因(VL),经重叠延伸拼接(SOE)PCR组成scFv基因,并将其与T7噬菌体载体的2个臂相连接。体外包装后,在宿主菌BLT5403中,扩增重组噬菌体抗体库。以基因工程表达NP进行4轮“吸附-洗脱-扩增”的筛选,酶免疫实验检测抗体活性。所建抗体库库容为1.35×107,扩增后初级库滴度为2.12×1010pfu/mL。以NP抗原筛选后抗体出现特异性富集,经酶免疫实验鉴定,得到2株与NP抗原特异结合的噬菌体抗体。结果表明,研究成功构建了人源抗NP蛋白T7噬菌体抗体库。; 关键词汉坦病毒 SCFV t7噬菌体抗体库; Keywords Hantaan virus seFv T7 phage display library; 分类号 R373.3 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人免疫球蛋白重链可变区基因引物设计方法的改良被引量：4: 4; 作者姜晶孙颖刘红艳牟玲罗恩杰; 机构中国医科大学病原生物学教研室沈阳市传染病院肾综合征出血热研究所; 出处《微生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第2期60-63,共4页; 基金辽宁省自然基金(20062101) 沈阳市科学技术基金(1071186-9-00); 文摘针对抗体胚系基因数据库的数据不断更新和完善,为获得人全部免疫球蛋白(Ig)重链可变区基因,改进引物设计方法,自主设计针对可变区基因高度保守的框架区1(FR1)和框架区4(FR4)的引物,提取未经免疫的健康人外周血单个核细胞,通过RT-PCR扩增重链可变区基因。其DNA序列与GenBank数据库和IMGT/V-QUEST软件比对,序列分析符合人免疫球蛋白重链基本框架结构,为胚系基因重排产生的序列。多个克隆的测序结果对比分析显示了良好的多样性。获得的重链序列为研制基因工程抗体及构建噬菌体抗体库奠定了物质基础,也为扩增其他物种Ig可变区基因的引物提供新的设计思路。; 关键词重链可变区引物设计序列分析; Keywords heavy chain variable region primer design sequence analysis; 分类号 Q939.91 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名共刺激分子B7-1与汉坦病毒核蛋白基因共表达载体的构建及免疫调节作用被引量：1: 5; 作者郑兰艳杨涛于笑难滕秀丽牟玲罗恩杰; 机构中国医科大学基础医学院病原生物学教研室沈阳市传染病院肾综合征出血热研究所沈阳军区总医院检验科; 出处《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期205-207,共3页; 基金辽宁省教育厅科研基金资助项目(202013130) 沈阳市科委科研基金资助项目(2001 38); 文摘目的:探讨共刺激分子B71(CD80)对汉坦病毒核蛋白基因疫苗的免疫调节作用。方法:构建双启动子共表达B71基因和汉坦病毒核蛋白基因的真核表达载体pcDNA3.1B7S,酶切鉴定后直接肌注免疫BALB/c小鼠,同时设对照组pcDNA3.1+空质粒接种组、pcDNA3.1S接种组。ELISA法检测血清特异性抗体,MTT法检测T细胞增殖反应。结果:pcDNA3.1B7S接种组鼠在抗体的产生水平及淋巴细胞增殖指数上均较pcDNA3.1S接种组明显增高。结论:接种B71基因和汉坦病毒核蛋白基因的共表达质粒优于注射单目的抗原基因表达质粒,为探索增强基因疫苗的免疫作用提供了新的途径。; 关键词汉坦病毒共刺激分子B7-1 基因疫苗; Keywords hantavirus costimulation molecules B7-1 DNA vaccine; 分类号 R373 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗汉坦病毒NP scFv基因表达及生物活性分析: 6; 作者刘兵史俊岩王舰王美莲王斯郑兰艳牟玲罗恩杰; 机构中国医科大学基础医学院病原生物教研室沈阳市传染病院肾综合征出血热研究所; 出处《微生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第2期29-32,共4页; 基金辽宁省自然科学基金资助(20062101); 文摘诱导已构建的重组质粒pGEX-6P-1-scFv原核表达抗汉坦病毒核衣壳蛋白单链抗体,并用酶免疫实验检测单链抗体生物活性。用IPTG诱导重组原核表达质粒pGEX-6P-1-scFv表达抗汉坦病毒NP单链抗体融合蛋白,经亲和层析纯化,并应用SDS-PAGE电泳检测单链抗体融合蛋白,应用酶免疫实验检测抗NP单链抗体生物学活性。SDS-PAGE电泳检测显示,原核重组质粒pGEX-6P-1-scFv已表达分子量约为56ku的单链抗体融合蛋白;酶免疫实验检测显示,单链抗体具有与汉坦病毒NP抗原特异性结合的生物学活性。结果表明,已构建的原核表达重组质粒pGEX-6P-1-scFv,能够成功表达具有与汉坦病毒NP抗原特异性结合生物学活性的单链抗体。; 关键词汉坦病毒 SCFV 表达; Keywords Hantavirus single-chain fragment variable region （seFv） expression; 分类号 R373.3 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名引入CpG基序的汉滩病毒G2糖蛋白基因的克隆及表达被引量：3: 7; 作者聂清王斯郑兰艳史俊岩牟玲罗恩杰; 机构中国医科大学病原生物学教研室沈阳市传染病院肾综合征出血热研究所; 出处《微生物学杂志》 CAS CSCD 2006年第2期34-36,共3页; 基金辽宁省教育厅2002年高等学校研究项目资助(202013130) 沈阳市科委课题(沈科发2001 38号); 文摘构建汉滩病毒G2糖蛋白的真核表达载体,并加入可增强小鼠免疫刺激作用的CpG基序,检测其可否在真核细胞中表达。参照Genebank中汉滩病毒M的全基因序列设计引物,引物两端引入可增强小鼠免疫刺激作用的CpG基序及双酶切位点,通过聚合酶链反应(PCR)获得含CpG基序的G2片段,并将其与T载体pMD18-T相连,测序后克隆至真核表达载体pcDNA3.1+上,将此真核表达载体以脂质体法转染至真核细胞Vero-E6中,利用间接免疫荧光法(IFA)检测发现转染后的Vero-E6中出现特异性的绿色荧光。结果表明本实验成功构建了汉滩病毒包膜糖蛋白G2的重组体。; 关键词汉滩病毒包膜糖蛋白真核细胞 CPG基序; Keywords Hantaan virus en-membraned glyeoprotein eukaryotic cell CpG motif; 分类号 R373.3 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	汉坦病毒核蛋白基因疫苗的初步研究	郑兰艳刘详宁张晓棠石焱牟玲罗恩杰	《微生物学杂志》 CAS CSCD	2005	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	噬菌体抗体库技术的研究进展及应用	王凯刘洪艳牟玲	《微生物学杂志》 CAS CSCD	2011	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	人源抗汉坦病毒核衣壳蛋白T7噬菌体抗体库的构建	刘兵王美莲王斯史俊岩郑兰艳牟玲罗恩杰	《微生物学杂志》 CAS CSCD	2007	5	在线阅读下载PDF 职称材料
4	人免疫球蛋白重链可变区基因引物设计方法的改良	姜晶孙颖刘红艳牟玲罗恩杰	《微生物学杂志》 CAS CSCD	2012	4	在线阅读下载PDF 职称材料
5	共刺激分子B7-1与汉坦病毒核蛋白基因共表达载体的构建及免疫调节作用	郑兰艳杨涛于笑难滕秀丽牟玲罗恩杰	《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2005	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	抗汉坦病毒NP scFv基因表达及生物活性分析	刘兵史俊岩王舰王美莲王斯郑兰艳牟玲罗恩杰	《微生物学杂志》 CAS CSCD	2009	0	在线阅读下载PDF 职称材料
7	引入CpG基序的汉滩病毒G2糖蛋白基因的克隆及表达	聂清王斯郑兰艳史俊岩牟玲罗恩杰	《微生物学杂志》 CAS CSCD	2006	3	在线阅读下载PDF 职称材料