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TNF-α单克隆抗体对小鼠变应性鼻炎的治疗作用及机制研究 被引量:7
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作者 唐桥斐 张爽 +3 位作者 程阳 邰旭辉 姜玉秋 闫智永 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1270-1273,1285,共5页
目的探讨TNF-α抗体干预对小鼠变应性鼻炎(AR)的治疗作用及潜在分子机制。方法 18只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、AR模型组和TNF-α抗体干预组;采用卵清蛋白诱导致敏建立AR模型,于鼻腔刺激前滴加TNF-α单克隆抗体进行治疗;对各组小鼠... 目的探讨TNF-α抗体干预对小鼠变应性鼻炎(AR)的治疗作用及潜在分子机制。方法 18只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、AR模型组和TNF-α抗体干预组;采用卵清蛋白诱导致敏建立AR模型,于鼻腔刺激前滴加TNF-α单克隆抗体进行治疗;对各组小鼠进行行为学评分,H-E染色观察鼻黏膜组织病理学变化,TUNEL法检测细胞凋亡,ELISA检测鼻黏膜液中TNF-α、IL-1β、Ig E表达水平,Western blotting检测NF-κB p65、IκB及凋亡相关蛋白表达变化。结果 TNF-α抗体干预组变应性鼻炎症状减轻,炎症反应程度降低,鼻黏膜液中TNF-α、IL-1β、Ig E含量及鼻黏膜组织中NF-κB p65、cleaved caspase-3、Bax表达水平较AR模型组显著降低,I-κB及Bcl-2表达增加。结论 TNF-α单克隆抗体干预对小鼠变应性鼻炎具有一定的治疗作用,可能通过抑制NF-κB信号通路激活、调节Th1/Th2平衡、降低炎性因子水平、抑制细胞凋亡发挥作用。 展开更多
关键词 TNF-α单克隆抗体 变应性鼻炎 NF-ΚB信号通路
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乳腺癌MCF-7细胞p21^(WAF1/CIP1)启动子区HDAC1高功能结合位点的研究 被引量:6
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作者 邹丹 周伟强 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期317-321,共5页
目的研究乳腺癌MCF-7细胞中组蛋白去乙酰化酶1(histone deacetylases 1,HDAC1)募集于p21^(WAF1/CIP1)启动子区调控其转录活性的特异性结合位点。方法将处于对数生长期的乳腺癌MCF-7细胞在无血清培养基中饥饿24 h后,分别用20μmol·L... 目的研究乳腺癌MCF-7细胞中组蛋白去乙酰化酶1(histone deacetylases 1,HDAC1)募集于p21^(WAF1/CIP1)启动子区调控其转录活性的特异性结合位点。方法将处于对数生长期的乳腺癌MCF-7细胞在无血清培养基中饥饿24 h后,分别用20μmol·L^(-1)0.88μL SAHA(S组)、0.625 nmol·L^(-1)10μL Leptin(L组)处理24 h,对照组(B组)细胞培养在完全型RPMI 1640培养基中。各组细胞裂解液与HDAC1抗体孵育,收集纯化结合HDAC1抗体的DNA片段,应用Realtime PCR法检测p21^(WAF1/CIP1)启动子区从TSS到其上游(+2^-4 000 bp)f1~f10片段的DNA相对表达量并用2-ΔΔCT法分析。结果 B组中,HDAC1抗体在p21^(WAF1/CIP1)启动子区f1、f8片段有高亲和力,f8片段达最高。S组中,HDAC1抗体与p21^(WAF1/CIP1)启动子区f1~f10片段结合量明显低于对照组,f8片段达最低,而在L组此片段与HDAC1抗体结合量达最大值。结论乳腺癌MCF-7细胞增殖过程中,HDAC1可被招募至p21^(WAF1/CIP1)启动子区,该启动子区上游-2 800 bp至-3 200 bp DNA片段是与HDAC1高度结合的靶功能区。 展开更多
关键词 乳腺癌 MCF-7细胞 p21(WAF1/CIP1) 组蛋白去乙酰化酶1 辛二酰苯胺异羟肟酸 瘦素
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葡萄糖调节蛋白78和基质金属蛋白酶在口腔鳞状细胞癌中的表达 被引量:3
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作者 王波 汲坤 +3 位作者 张丽艳 尚德志 侯君妍 华正伟 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期786-789,共4页
目的探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和基质金属蛋白酶(MMPs)在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及意义,阐明GRP78在口腔鳞状细胞癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组织化学方法检测26例口腔鳞状细胞癌组织和10例正常口腔组织中GRP78蛋白的表... 目的探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和基质金属蛋白酶(MMPs)在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及意义,阐明GRP78在口腔鳞状细胞癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组织化学方法检测26例口腔鳞状细胞癌组织和10例正常口腔组织中GRP78蛋白的表达;采用逆转录PCR检测正常口腔组织和口腔鳞状细胞癌组织中GRP78 m RNA的表达;采用免疫组织化学方法检测26例口腔鳞状细胞癌组织中MMP-2和MMP-9蛋白的表达。结果 GRP78蛋白在口腔鳞状细胞癌组织中的阳性表达率为100%(26/26),在正常口腔组织中的阳性表达率为20%(2/10),两者比较差异有统计学意义(P<0.01);与高分化和中分化口腔鳞状细胞癌组织比较,低分化口腔鳞状细胞癌组织中的GRP78蛋白阳性表达强度明显增高(P<0.05)。与正常口腔组织比较,GRP78 m RNA表达水平在口腔鳞状细胞癌组织中的表达增高(P<0.05)。MMP-2和MMP-9蛋白在口腔鳞状细胞癌组织中的阳性表达率均为100%(26/26)。结论 GRP78和MMPs在口腔鳞状细胞癌组织中表达明显升高,提示口腔鳞状细胞癌中GRP78蛋白的表达可能与肿瘤的侵袭和转移相关。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 葡萄糖调节蛋白78 基质金属蛋白酶
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乳腺癌MCF-7细胞p21^(WAF1/CIP1)启动子区雌激素受体α的高功能结合位点 被引量:2
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作者 邹丹 冯秀艳 周伟强 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期677-680,685,共5页
目的研究雌激素受体(ER)α募集于p21^(WAF1/CIP1)启动子区调控其转录活性的具体作用位点,明确辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)及瘦素(leptin)在调节p21^(WAF1/CIP1)启动子功能中的分子机制。方法将处于对数生长期的乳腺癌MCF-7细胞在无血清培... 目的研究雌激素受体(ER)α募集于p21^(WAF1/CIP1)启动子区调控其转录活性的具体作用位点,明确辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)及瘦素(leptin)在调节p21^(WAF1/CIP1)启动子功能中的分子机制。方法将处于对数生长期的乳腺癌MCF-7细胞在无血清培养基中饥饿24 h后,分别用20μmol/L的SAHA 0.88μL(SAHA组)、0.625 nmol/L的leptin 10μL(leptin组)处理24 h,对照组在完全型RPMI-1640培养基中培养细胞。应用染色质免疫共沉淀技术将各组细胞裂解液与ERα抗体孵育,收集纯化结合ERα抗体的DNA片段,应用实时PCR法检测p21^(WAF1/CIP1)启动子区从转录起始点到其上游(+2^-4 000 bp)f1~f10片段的DNA相对表达量并用2-ΔΔCt法分析。结果对照组中,与ERα抗体结合的f1、f2、f8片段DNA相对表达量较f9片段高出2倍以上(P<0.01)。与对照组比较,SAHA及leptin组f1~f10片段与ERα抗体结合能力均降低,其中SAHA组f8片段DNA相对表达量达最低值(P<0.01),且明显低于leptin组(P<0.01)。SAHA组中以f8片段为对照,其他片段与ERα抗体结合能力均较其升高(P<0.05或0.01)。leptin组中以f8片段为对照,其他片段与ERα抗体结合能力均较其降低,除f1外均有统计学差异(P<0.01)。结论乳腺癌细胞增殖过程中细胞增殖信号招募ERα至p21^(WAF1/CIP1)启动子区,且p21^(WAF1/CIP1)启动子区-2 800 bp^-3 200 bp区域存在与ERα高度结合的靶功能区。 展开更多
关键词 乳腺癌 MCF-7 细胞 P21^WAF1/CIP1 雌激素受体 α 辛二酰苯胺异羟肟酸 瘦素
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粉防己碱拮抗豚鼠水杨酸急性耳肾损伤的实验研究 被引量:1
5
作者 安玉香 苏禄晖 +1 位作者 李舒音 汤浩 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期1569-1569,共1页
关键词 粉防己碱 豚鼠 水杨酸 急性耳损伤 急性肾损伤 实验
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银杏内酯B对体外培养神经细胞延迟整流钾电流的作用 被引量:1
6
作者 姚阳 刘坤 +3 位作者 杨宇 吴敏范 张丽艳 梁宇 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期982-984,共3页
目的研究银杏内酯B对传代培养的SH SY5Y细胞延迟整流钾电流(IK)的影响。方法传代培养SH SY5Y细胞,用浓度为0.1、1.0和10.0μmol/L的银杏内酯B灌流细胞,用全细胞膜片钳技术记录SH SY5Y细胞IK。结果浓度为0.1、1.0和10.0μmol/L的银杏苦内... 目的研究银杏内酯B对传代培养的SH SY5Y细胞延迟整流钾电流(IK)的影响。方法传代培养SH SY5Y细胞,用浓度为0.1、1.0和10.0μmol/L的银杏内酯B灌流细胞,用全细胞膜片钳技术记录SH SY5Y细胞IK。结果浓度为0.1、1.0和10.0μmol/L的银杏苦内酯B在指令电压+60 mV时使SH SY5Y细胞IK峰密度值分别从(2.19±0.45)pA/pF增大至(2.48±0.37)pA/pF(P<0.05,n=5)、(2.97±0.29)pA/pF(P<0.01,n=5)和(3.15±0.48)pA/pF(P<0.01,n=5)。IK分别增大13.24%、35.62%和43.85%,具有浓度依赖性。结论银杏内酯B能增加IK,并且具有浓度依赖性。 展开更多
关键词 银杏内酯B 膜片钳 延迟整流钾电流
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大鼠海马结构CA1位置细胞对感觉错配适应的相关反应
7
作者 邹丹 吴敏范 +2 位作者 金戈 符文双 郑燕 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期146-149,共4页
目的观察大鼠经过学习其海马结构接受视觉-前庭-本体感觉错配格局并将其视为匹配的状态后CA1位置细胞的电活动,为揭示海马结构可编码感觉输入的任何组合提供依据。方法应用微电极细胞外记录方法,记录清醒大鼠在适应视觉-前庭-本体感觉... 目的观察大鼠经过学习其海马结构接受视觉-前庭-本体感觉错配格局并将其视为匹配的状态后CA1位置细胞的电活动,为揭示海马结构可编码感觉输入的任何组合提供依据。方法应用微电极细胞外记录方法,记录清醒大鼠在适应视觉-前庭-本体感觉错配条件后海马结构CA1位置细胞神经元放电情况。结果 56个位置细胞中,29个神经元在正向状态中有显著的空间放电(正向相关神经元),19个神经元在反向状态中有显著的空间放电(反向相关神经元)。位置野内放电频率的分布呈现不对称及负偏斜。结论大鼠海马结构位置细胞可编码不能自然发生的新的感觉输入配置,更新海马结构比较器内的信息。 展开更多
关键词 感觉错配 海马 位置细胞 神经元放电
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HDAC1在调控乳腺癌MCF-7细胞p21^(WAF1/CIP1)转录过程中与ERα的协同作用
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作者 邹丹 冯秀艳 周伟强 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1243-1248,共6页
目的研究乳腺癌MCF-7细胞中组蛋白去乙酰化酶1(histone deacetylases 1,HDAC1)、雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)共同募集于p21^(WAF1/CIP1)启动子特定区域,调控其转录活性的具体作用位点,同时明确辛二酰苯胺异羟肟酸(suberoyla... 目的研究乳腺癌MCF-7细胞中组蛋白去乙酰化酶1(histone deacetylases 1,HDAC1)、雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)共同募集于p21^(WAF1/CIP1)启动子特定区域,调控其转录活性的具体作用位点,同时明确辛二酰苯胺异羟肟酸(suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)及瘦素(Leptin)在调节p21^(WAF1/CIP1)启动子功能中的作用机制。方法将处于对数生长期的乳腺癌MCF-7细胞在无血清培养基中饥饿24 h后,分别用20μmol·L^(-1)0.88μL SAHA(SAHA组)、0.625nmol·L^(-1)10μL Leptin(Leptin组)处理24 h,对照组(Basal组)细胞培养在完全型RPMI 1640培养基中。各组细胞裂解液先后与HDAC1抗体及ERα抗体进行染色质免疫共沉淀(chromatin-immunoprecipitation,Ch IP)孵育,收集纯化结合HDAC1及ERα抗体的DNA片段,应用Real-time PCR法检测p21^(WAF1/CIP1)启动子区从转录起始位点(transcription start site,TSS)到其上游(+2^-4 000 bp)f1~f10片段的DNA相对表达量,并用2^(-△△CT)法分析。结果Basal组中,HDAC1、ERα抗体在p21^(WAF1/CIP1)启动子区f1、f8片段有高亲和力。SAHA组中,HDAC1、ERα抗体与p21^(WAF1/CIP1)启动子区f1、f8片段结合量明显低于对照组,而在Leptin组两片段与HDAC1、ERα抗体结合量明显高于对照组。结论乳腺癌MCF-7细胞增殖过程中,细胞增殖信号可招募HDAC1、ERα至p21^(WAF1/CIP1)启动子区。该启动子区上游0^-400bp,-2 800^-3 200 bp DNA片段是与HDAC1、ERα共同作用的靶功能区。 展开更多
关键词 乳腺癌 MCF-7细胞 P21WAF1/CIP1 组蛋白去乙酰化酶1 雌激素受体α 辛二酰苯胺异羟肟酸 瘦素
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高锌抑制鼠前列腺癌细胞RM-1侵袭与诱导凋亡的实验研究
9
作者 王波 汲坤 +3 位作者 张丽艳 尚德志 李璞宸 刘璐璐 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期589-591,597,共4页
目的探讨锌对鼠前列腺癌细胞RM-1侵袭能力和凋亡的影响。方法将RM-1细胞培养于含Zn2+的培养基中,Zn2+终浓度分别为0μmol/L(control)、100μmol/L、200μmol/L、250μmol/L、300μmol/L,继续培养24 h,MTT检测锌对RM-1细胞增殖的影响;RT-... 目的探讨锌对鼠前列腺癌细胞RM-1侵袭能力和凋亡的影响。方法将RM-1细胞培养于含Zn2+的培养基中,Zn2+终浓度分别为0μmol/L(control)、100μmol/L、200μmol/L、250μmol/L、300μmol/L,继续培养24 h,MTT检测锌对RM-1细胞增殖的影响;RT-PCR检测肿瘤侵袭和凋亡相关基因mmp-2、mmp-9、bax和bcl-2 m RNA表达。结果 MTT检测结果显示,与对照组比较,不同浓度锌对RM-1细胞增殖抑制率明显增加(P<0.05);与100μmol/L组、200μmol/L组比较,250μmol/L组、300μmol/L组细胞增殖抑制率明显增加(P<0.01)。RT-PCR结果显示,与对照组比较,250μmol/L、300μmol/L组mmp-2和mmp-9 m RNA及bcl-2 m RNA表达水平明显降低(P<0.01);bax m RNA表达水平明显升高(P<0.01)。结论高锌可以降低RM-1细胞的增殖和侵袭能力,诱导RM-1细胞的凋亡。 展开更多
关键词 前列腺癌 基质金属蛋白酶 凋亡
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视觉-前庭感觉-本体感觉错配适应大鼠海马CA1区位置细胞的放电特征
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作者 邹丹 金戈 符文双 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期592-597,共6页
目的观察大鼠经过学习其海马结构接受视觉-前庭感觉-本体感觉错配格局并将其视为匹配的状态后CA1区位置细胞的电活动,为揭示海马结构可编码感觉输入的任何组合提供依据。方法建立视觉-前庭感觉-本体感觉错配格局,根据对海马结构齿状回... 目的观察大鼠经过学习其海马结构接受视觉-前庭感觉-本体感觉错配格局并将其视为匹配的状态后CA1区位置细胞的电活动,为揭示海马结构可编码感觉输入的任何组合提供依据。方法建立视觉-前庭感觉-本体感觉错配格局,根据对海马结构齿状回θ节律的记录及其电功率的计算,获知大鼠适应该感觉冲突后,应用钨丝微电极细胞外记录方法,记录清醒大鼠在适应视觉-前庭感觉-本体感觉错配条件后海马CA1区位置细胞神经元集群放电情况。结果 56个位置细胞中,14个(25.0%)神经元在感觉正配及错配条件下均有位置稳定的空间放电(双向移动相关经验非依赖神经元),33个(58.9%)神经元在感觉正配及错配条件下依次出现位置不稳的空间放电(双向移动相关经验依赖神经元)。经验非依赖神经元的位置野长度及非对称指数的均值大于经验依赖型神经元,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。此外,位置野内放电频率的分布呈现出不对称及负偏斜。结论动物在适应自然情况下不可能出现的新的感觉配置后,海马结构能编码这一配置并能更新其储存的记忆,接受新的配置作为匹配状态。海马结构可能编码感觉输入的任何组合。 展开更多
关键词 感觉错配 适应 海马 位置细胞 神经元放电
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RNA干扰抑制乳腺癌MCF-7细胞鼠双微体-2基因表达及细胞增殖的实验研究 被引量:1
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作者 宫琦玉 汲坤 +3 位作者 张丽艳 王波 楚琪 张明璇 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期892-896,共5页
目的研究乳腺增生症、乳腺导管内癌和浸润性乳腺癌组织中mdm2蛋白的表达及siRNA mdm2对肿瘤细胞增殖的影响。方法采用免疫组织化学方法检测乳腺增生症、乳腺导管内癌和浸润性乳腺癌组织中mdm2蛋白的表达;将siRNA mdm2质粒转染乳腺癌MCF-... 目的研究乳腺增生症、乳腺导管内癌和浸润性乳腺癌组织中mdm2蛋白的表达及siRNA mdm2对肿瘤细胞增殖的影响。方法采用免疫组织化学方法检测乳腺增生症、乳腺导管内癌和浸润性乳腺癌组织中mdm2蛋白的表达;将siRNA mdm2质粒转染乳腺癌MCF-7细胞,应用MTT检测siRNA mdm2对肿瘤细胞增殖的抑制作用。结果 mdm2蛋白在乳腺导管内癌组织和浸润性乳腺癌组织中的阳性表达率均为100%(18/18,20/20),在乳腺增生症组织中表达阳性率为20%(4/20)。与乳腺增生症组织比较,乳腺导管内癌组织和浸润性乳腺癌组织中mdm2蛋白阳性表达率明显增高(P<0.01)。MTT结果表明转染pGCsiRNA-mdm2后MCF-7细胞生长受到抑制,与mock组和pGCsiRNA-scramble组比较差异有统计学意义(P<0.01)。转染pGCsiRNA-mdm2 72 h后与48 h比较,MCF-7细胞生长受抑制明显,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 mdm2在乳腺癌组织中存在广泛表达,其阳性表达可能促进肿瘤细胞的增殖过程。 展开更多
关键词 乳腺增生症 乳腺导管内癌 浸润性乳腺癌 鼠双微体-2 RNA干扰 MDM2
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