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敲低TRAIL-DR5抑制辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)诱导的MCF-7乳腺癌细胞自噬 被引量:3
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作者 韩翰 周慧 +3 位作者 孙玮璐 刘春阳 候昕彤 周伟强 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1504-1510,共7页
目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体-死亡受体5(TRAIL-DR5)在辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)诱导乳腺癌MCF-7细胞自噬过程中的调控作用。方法对数生长期MCF-7细胞分为空白对照组、SAHA处理组、TRAIL-DR5 siRNA处理组及SAHA联合TRAIL-DR5 s... 目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体-死亡受体5(TRAIL-DR5)在辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)诱导乳腺癌MCF-7细胞自噬过程中的调控作用。方法对数生长期MCF-7细胞分为空白对照组、SAHA处理组、TRAIL-DR5 siRNA处理组及SAHA联合TRAIL-DR5 siRNA处理组。Western blot法验证TRAIL-DR5的沉默效果,定量PCR阵列检测细胞自噬相关基因9B(ATG9B)、微管相关蛋白1轻链3A(LC3A)及LC3B的mRNA水平;Western blot法检测MCF-7细胞自噬相关蛋白beclin-1、ATG3、ATG5、ATG7、ATG12、ATG16、ATG4 A、ATG4 B、ATG9 B及LC3Ⅱ和组织蛋白酶B(CTSB)的蛋白水平;ELISA分析乳腺癌细胞培养上清液CTSB水平;免疫荧光细胞化学染色检测乳腺癌细胞LC3Ⅱ表达和分布。结果 TRAIL-DR5 siRNA转染后明显敲低MCF-7细胞的TRAIL-DR5水平。敲低TRAIL-DR5受体可抑制上述自噬相关基因及蛋白的表达水平,抑制乳腺癌细胞中CTSB蛋白的表达;SAHA处理MCF-7细胞后,LC3Ⅱ含量增加,当敲低TRAIL-DR5受体后,LC3Ⅱ水平明显弱于单独SAHA处理的细胞。结论敲低TRAIL-DR5受体抑制SAHA诱导的MCF-7乳腺癌细胞自噬作用。 展开更多
关键词 乳腺癌 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL) 死亡受体5(DR5) 辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA) 细胞自噬
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Midkine对神经母细胞瘤TNB1细胞生长与分化的影响 被引量:2
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作者 朱琳 陈潞萍 牟萍 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期109-114,共6页
目的:通过对中期因子(midkine,MK)在神经母细胞瘤TNB1细胞中的生物学作用进行研究,揭示该因子在肿瘤细胞生长和分化中相关分子机制。方法:1)利用神经母细胞瘤临床患者数据库,明确MK的表达与神经母细胞瘤患者生存率之间的关系。在体外细... 目的:通过对中期因子(midkine,MK)在神经母细胞瘤TNB1细胞中的生物学作用进行研究,揭示该因子在肿瘤细胞生长和分化中相关分子机制。方法:1)利用神经母细胞瘤临床患者数据库,明确MK的表达与神经母细胞瘤患者生存率之间的关系。在体外细胞实验中,利用携带MK shRNA载体的慢病毒体外感染神经母细胞瘤TNB1细胞,分析MK的敲减对其生长与分化的影响;2)通过进一步临床数据分析,找到与MK表达的相关基因,并采用Real-time PCR验证MK对相关基因之间表达联系;3)联合使用携带MK shRNA和肾细胞癌下调蛋白1(downregulated in renal carcinoma 1,DRR1)shRNA载体的两种慢病毒感染TNB1细胞,评价MK-DRR1轴对TNB1细胞分化以及克隆形成的影响。结果:临床数据分析显示MK的表达量与神经母细胞瘤患者生存率呈负相关(P<0.01)。体外细胞实验结果表明MK的敲减能够抑制TNB1细胞生长,同时促进TNB1细胞分化;临床数据分析结果进一步证明,在神经母细胞瘤中MK与DRR1的表达量呈负相关(P<0.01);Real-time PCR结果证实下调MK表达可增强TNB1细胞中DRR1的表达(P<0.01);细胞挽救实验显示敲低DRR1的表达可以挽救由MK敲减而产生的对TNB1细胞的分化和软琼脂克隆的影响(P<0.01)。结论:MK通过调控DRR1的表达从而参与调节TNB1细胞的生长与分化。 展开更多
关键词 中期因子 神经母细胞瘤 生长 分化 肾细胞癌下调蛋白1
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DRR1对小鼠神经干细胞分化以及神经元突起形成的影响 被引量:1
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作者 曹振楠 党浠钮 +5 位作者 徐英姿 王哲 雷明 宋京书 宿芊芊 牟萍 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 2021年第1期21-27,共7页
目的:本研究旨在阐明肾细胞癌下调蛋白1(DRR1)在小鼠大脑组织中的表达谱及相关生物学功能。方法:首先,通过real time RT-PCR的方法明确在不同发育阶段的小鼠大脑组织中DRR1的表达水平;利用免疫荧光染色法检测DRR1在原代培养的神经干细... 目的:本研究旨在阐明肾细胞癌下调蛋白1(DRR1)在小鼠大脑组织中的表达谱及相关生物学功能。方法:首先,通过real time RT-PCR的方法明确在不同发育阶段的小鼠大脑组织中DRR1的表达水平;利用免疫荧光染色法检测DRR1在原代培养的神经干细胞以及神经元中的表达情况。其次,采用real time RT-PCR的方法分别检测DRR1在诱导分化前后的神经干细胞中的表达水平。最后,利用慢病毒感染的方法在原代培养的神经干细胞以及神经元中分别上调或者下调DRR1的表达,进而评价DRR1对原代培养的神经干细胞的分化以及神经元的突起形成的影响。结果:DRR1在各个发育阶段的小鼠大脑组织中均有表达,并且其表达水平随发育呈逐渐上升趋势。DRR1在分化前后的神经干细胞中均表达,但在诱导分化后的细胞中的表达水平显著高于其分化前的表达水平(P<0.01)。同时,过表达DRR1可促进神经干细胞的分化。DRR1在分化成熟的原代神经元的树突以及轴突均有表达,且DRR1的表达水平影响神经元的突起形成(P<0.01)。结论:DRR1在各发育阶段的小鼠大脑及分化前后的神经干细胞中均有表达,其作用与神经干细胞分化调控以及神经元突起形成有关。 展开更多
关键词 肾细胞癌下调蛋白1 神经干细胞 神经元 细胞分化 突起形成 小鼠
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