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马铃薯Y病毒的RT-PCR检测
被引量：
30
1
作者
李浩戈
吴元华
赵秀香
《沈阳农业大学学报》
CAS
CSCD
1999年第3期244-246,共3页
通过两种方法提取了烟草病叶中PVY病毒的RNA，然后针对PVY^N的CP基因序列，设计合成了一对特异性引物，运用反转录PCR技术对提取的PVY－RNA进行了体外扩增，结果得到与预期大小相一致的780bp片段，而对照未得到任何产物，从而建立了运...
通过两种方法提取了烟草病叶中PVY病毒的RNA，然后针对PVY^N的CP基因序列，设计合成了一对特异性引物，运用反转录PCR技术对提取的PVY－RNA进行了体外扩增，结果得到与预期大小相一致的780bp片段，而对照未得到任何产物，从而建立了运用RT－PCR手段检测植物中PVY的又一有效途径，并运用此方法对东北三省部分地区马铃薯种薯中PVY的带毒情况进行了检测。
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关键词
反转录PCR
马铃薯
Y病毒
检测
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职称材料
转马铃薯Y病毒复制酶基因烟草的获得及抗病性分析
被引量：
6
2
作者
吴元华
郑云泽
+3 位作者
贝纳新
孙淑英
李浩戈
王振东
《中国烟草科学》
CSCD
1997年第3期23-26,共4页
重组克隆ＤＮＡ用ＫｐｎＩ／ＢａｍＨＩ双酶切得到马铃薯Ｙ病毒ＮＩｂ基因，将其插入质粒ｐＲＯＫ２相应切点中构成植物表达载体。用重组质粒ｐＲＯＫ２转化农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｍｅｆａ－ｃｉｅｎｓ）ＬＢＡ４４０...
重组克隆ＤＮＡ用ＫｐｎＩ／ＢａｍＨＩ双酶切得到马铃薯Ｙ病毒ＮＩｂ基因，将其插入质粒ｐＲＯＫ２相应切点中构成植物表达载体。用重组质粒ｐＲＯＫ２转化农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｍｅｆａ－ｃｉｅｎｓ）ＬＢＡ４４０４菌株，叶盘法将ＮＩｂ基因转入烤烟品种ＮＣ８９的染色体，获得抗卡那霉素的转化再生植株。经抗性筛选、ＰＣＲ检测、无性扩繁和大量重复抗病鉴定，结果表明，转化烟草植株ＤＮＡ中整合了外源目的基因，且表现抵抗２０μｇ／ｍｌＰＶＹＮ的侵染，ＥＬＩＳＡ分析认为抗性植株无病毒累积，初步筛选出对ＰＶＹＮ侵染具有较高抗性的转基因烟草植株。
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关键词
马铃薯Y病毒
复制酶基因
转基因烟草
抗病性
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职称材料
番茄叶霉病高抗基因Cf-9的CAPS标记创建
被引量：
4
3
作者
陈丽静
李天来
+4 位作者
李君明
宋燕
王玉昆
王孝宣
徐合金
《植物保护》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第3期21-24,共4页
根据番茄叶霉病高抗基因Cf-9的基因序列设计3对特异扩增引物,以近等基因系和本组的多重PCR检测材料为试材,扩增Cf-9基因1～2867 bp之间的单拷贝片段,3对引物分别扩增出560 bp,1 000 bp,1 080 bp的特异片段.分别用限制性内切酶TaqⅠ,Hind...
根据番茄叶霉病高抗基因Cf-9的基因序列设计3对特异扩增引物,以近等基因系和本组的多重PCR检测材料为试材,扩增Cf-9基因1～2867 bp之间的单拷贝片段,3对引物分别扩增出560 bp,1 000 bp,1 080 bp的特异片段.分别用限制性内切酶TaqⅠ,Hind Ⅲ,HinfⅠ,EcorⅠ酶切,限制性内切酶TaqⅠ酶切特异引物SCAR1扩增的560特异片段具有酶切多态性,抗病品种酶切出450 bp,330 bp,290 bp的特异片段,感病品种酶切出450 bp,290 bp的特异片段.初步建成番茄叶霉病高抗基因Cf-9的CAPS标记,经近等基因系及其杂交种检验,结果稳定可靠,可用于番茄Cf-9抗病基因辅助选育.
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关键词
番茄
叶霉病
Cf-9基因
CAPS标记
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职称材料
题名
马铃薯Y病毒的RT-PCR检测
被引量：
30
1
作者
李浩戈
吴元华
赵秀香
机构
沈阳农业大学生物技术中心
出处
《沈阳农业大学学报》
CAS
CSCD
1999年第3期244-246,共3页
基金
国家烟草专卖局资助
文摘
通过两种方法提取了烟草病叶中PVY病毒的RNA，然后针对PVY^N的CP基因序列，设计合成了一对特异性引物，运用反转录PCR技术对提取的PVY－RNA进行了体外扩增，结果得到与预期大小相一致的780bp片段，而对照未得到任何产物，从而建立了运用RT－PCR手段检测植物中PVY的又一有效途径，并运用此方法对东北三省部分地区马铃薯种薯中PVY的带毒情况进行了检测。
关键词
反转录PCR
马铃薯
Y病毒
检测
Keywords
Reverse transcription and polymerase chain reaction (RT-PCR)
PVY (Potato virus Y)
分类号
S435.32 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
S432.41 [农业科学—植物病理学]
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职称材料
题名
转马铃薯Y病毒复制酶基因烟草的获得及抗病性分析
被引量：
6
2
作者
吴元华
郑云泽
贝纳新
孙淑英
李浩戈
王振东
机构
沈阳农业大学生物技术中心
辽宁省烟叶生产供应公司
出处
《中国烟草科学》
CSCD
1997年第3期23-26,共4页
基金
辽宁省烟草公司资助
文摘
重组克隆ＤＮＡ用ＫｐｎＩ／ＢａｍＨＩ双酶切得到马铃薯Ｙ病毒ＮＩｂ基因，将其插入质粒ｐＲＯＫ２相应切点中构成植物表达载体。用重组质粒ｐＲＯＫ２转化农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｍｅｆａ－ｃｉｅｎｓ）ＬＢＡ４４０４菌株，叶盘法将ＮＩｂ基因转入烤烟品种ＮＣ８９的染色体，获得抗卡那霉素的转化再生植株。经抗性筛选、ＰＣＲ检测、无性扩繁和大量重复抗病鉴定，结果表明，转化烟草植株ＤＮＡ中整合了外源目的基因，且表现抵抗２０μｇ／ｍｌＰＶＹＮ的侵染，ＥＬＩＳＡ分析认为抗性植株无病毒累积，初步筛选出对ＰＶＹＮ侵染具有较高抗性的转基因烟草植株。
关键词
马铃薯Y病毒
复制酶基因
转基因烟草
抗病性
Keywords
PVY N
Replicase gene
Transgenic NC89
Resistance to PVY N
分类号
S572.034 [农业科学—烟草工业]
S435.32 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
番茄叶霉病高抗基因Cf-9的CAPS标记创建
被引量：
4
3
作者
陈丽静
李天来
李君明
宋燕
王玉昆
王孝宣
徐合金
机构
沈阳农业大学生物技术中心
沈阳
农业
大学
园艺学院
中国
农业
科学院蔬菜花卉研究所
沈阳
农业
大学
植物保护学院
出处
《植物保护》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第3期21-24,共4页
基金
国家自然科学基金项目(30100124)
文摘
根据番茄叶霉病高抗基因Cf-9的基因序列设计3对特异扩增引物,以近等基因系和本组的多重PCR检测材料为试材,扩增Cf-9基因1～2867 bp之间的单拷贝片段,3对引物分别扩增出560 bp,1 000 bp,1 080 bp的特异片段.分别用限制性内切酶TaqⅠ,Hind Ⅲ,HinfⅠ,EcorⅠ酶切,限制性内切酶TaqⅠ酶切特异引物SCAR1扩增的560特异片段具有酶切多态性,抗病品种酶切出450 bp,330 bp,290 bp的特异片段,感病品种酶切出450 bp,290 bp的特异片段.初步建成番茄叶霉病高抗基因Cf-9的CAPS标记,经近等基因系及其杂交种检验,结果稳定可靠,可用于番茄Cf-9抗病基因辅助选育.
关键词
番茄
叶霉病
Cf-9基因
CAPS标记
Keywords
tomato
leaf mould
Cf-9 gene
CAPS marker
分类号
S432.23 [农业科学—植物病理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
马铃薯Y病毒的RT-PCR检测
李浩戈
吴元华
赵秀香
《沈阳农业大学学报》
CAS
CSCD
1999
30
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
转马铃薯Y病毒复制酶基因烟草的获得及抗病性分析
吴元华
郑云泽
贝纳新
孙淑英
李浩戈
王振东
《中国烟草科学》
CSCD
1997
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
番茄叶霉病高抗基因Cf-9的CAPS标记创建
陈丽静
李天来
李君明
宋燕
王玉昆
王孝宣
徐合金
《植物保护》
CAS
CSCD
北大核心
2006
4
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职称材料
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